中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1 前言 | 第8-14页 |
1.1 卤虫的研究概况 | 第8-9页 |
1.1.1 卤虫的形态学特征及地理分布 | 第8页 |
1.1.2 卤虫的生殖特征 | 第8-9页 |
1.1.3 经济价值 | 第9页 |
1.2 PDRG1的研究概况 | 第9-12页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第12-14页 |
2 材料与方法 | 第14-30页 |
2.1 材料 | 第14-18页 |
2.1.1 中国卤虫的培养及孵化 | 第14页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第14-17页 |
2.1.3 仪器与设备 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-30页 |
2.2.1 中国卤虫总RNA提取 | 第18页 |
2.2.2 用逆转录法合成cDNA | 第18-19页 |
2.2.3 目的基因片段的扩增 | 第19页 |
2.2.4 cDNA3'RACE | 第19-20页 |
2.2.5 PCR产物纯化与转化 | 第20-21页 |
2.2.6 cDNA5'RACE | 第21-23页 |
2.2.7 实时定量PCR(qPCR) | 第23-24页 |
2.2.8 As-pdrg1的原核表达 | 第24-25页 |
2.2.9 As-PDRG1重组蛋白的大量诱导和纯化 | 第25-26页 |
2.2.10 原位杂交 | 第26-27页 |
2.2.11 蛋白免疫印迹实验 | 第27-29页 |
2.2.12 RNA干扰 | 第29页 |
2.2.13 生物信息学及生物统计分析 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-47页 |
3.1 As-pdrg1基因全长序列 | 第30-32页 |
3.1.1 As-pdrg1片段的获得 | 第30页 |
3.1.2 As-pdrg13'端序列的获得 | 第30-31页 |
3.1.3 As-pdrg15'端序列的获得 | 第31-32页 |
3.1.4 As-pdrg1cDNA序列全长 | 第32页 |
3.2 生物信息学分析 | 第32-36页 |
3.3 As-PDRG1进化关系分析 | 第36-38页 |
3.4 As-pdrg1的表达水平 | 第38-40页 |
3.4.1 As-pdrg1在不同发育时期的表达 | 第38-39页 |
3.4.2 As-pdrg1在低温胁迫下的表达 | 第39-40页 |
3.5 As-pdrg1的表达部位 | 第40-41页 |
3.6 As-PDRG1重组蛋白的表达及纯化 | 第41-43页 |
3.7 PDRG1蛋白的表达模式 | 第43-45页 |
3.7.1 PDRG1在中国卤虫不同发育时期的表达模式 | 第43-44页 |
3.7.2 PDRG1在中国卤虫低温胁迫下的的表达模式 | 第44-45页 |
3.8 As-pdrg1的RNA干扰 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
4.1 中国卤虫As-pdrg1基因全长以及进化特点。 | 第47页 |
4.2 As-pdrg1在中国卤虫早期胚胎的不同发育时期的表达部位 | 第47页 |
4.3 As-PDRG1在中国卤虫早期胚胎的不同发育时期的表达水平及调控关系 | 第47-48页 |
4.4 As-PDRG1在中国卤虫早期胚胎低温情况下的表达水平及调控关系 | 第48页 |
4.5 As-PDRG1在中国卤虫早期胚胎发育过程中的作用 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |