| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 立题依据及意义 | 第10页 |
| 1.2 研究背景 | 第10-16页 |
| 1.2.1 国内外关于Nrf1 的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.2 Nrf1D的研究概况 | 第13-15页 |
| 1.2.3 活细胞成像技术应用于课题相关方面的研究 | 第15-16页 |
| 1.3 研究内容及目的 | 第16-17页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第16页 |
| 1.3.2 研究目的 | 第16-17页 |
| 1.4 本课题的创新之处 | 第17-18页 |
| 2 对Nrf1D蛋白的研究 | 第18-52页 |
| 2.1 前言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-25页 |
| 2.2.1 相关设备及仪器 | 第18-20页 |
| 2.2.2 相关药品及试剂 | 第20-22页 |
| 2.2.3 药品及试剂的配制 | 第22-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-38页 |
| 2.3.1 COS-1，RL34 细胞的传代培养、接种、冻存及复苏 | 第25-26页 |
| 2.3.2 高纯度质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.3.3 质粒转染 | 第27页 |
| 2.3.4 目的DNA片段的纯化回收 | 第27-28页 |
| 2.3.5 PCR产物回收 | 第28页 |
| 2.3.6 Top10 感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 2.3.7 质粒的构建 | 第29-31页 |
| 2.3.8 总RNA提取 | 第31-33页 |
| 2.3.9 RNA的反转录 | 第33页 |
| 2.3.10 活细胞成像技术 | 第33-34页 |
| 2.3.11 双荧光素酶报告基因检测几种药物对Nrf1D表达量的影响 | 第34页 |
| 2.3.12 提取细胞内蛋白 | 第34-35页 |
| 2.3.13 Western blotting | 第35-38页 |
| 2.4 实验结果 | 第38-49页 |
| 2.4.1 反转录PCR分析鉴定Nrf1D存在的组织 | 第38-39页 |
| 2.4.2 Nrf1D-GFP-pcDNA3.1/V5-His B质粒的构建 | 第39-40页 |
| 2.4.3 DTT对Nrf1、Nrf1D以及Nrf1~（Δ670-741） 表达量的影响 | 第40-42页 |
| 2.4.4 维生素C对Nrf1、Nrf1D以及Nrf1~（Δ670-741）表达量的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.5 tBHQ对Nrf1、Nrf1D以及Nrf1~（Δ670-741）表达量的影响 | 第43-45页 |
| 2.4.6 TPA对Nrf1、Nrf1D以及Nrf1~（Δ670-741）表达量的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.7 MG132 对Nrf1、Nrf1D以及Nrf1~（Δ670-741）表达量的影响 | 第46-47页 |
| 2.4.8 活细胞成像分析Nrf1、Nrf1D以及Nrf1~（Δ670-741） | 第47-49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-52页 |
| 3 活细胞成像用于Nrf1 翻译后加工产生不同亚型的研究 | 第52-60页 |
| 3.1 前言 | 第52页 |
| 3.2 实验材料 | 第52-54页 |
| 3.2.1 相关设备及仪器 | 第52-53页 |
| 3.2.2 相关药品及试剂 | 第53页 |
| 3.2.3 药品及试剂的配制 | 第53-54页 |
| 3.3 实验方法 | 第54页 |
| 3.3.1 细胞的传代培养、接种 | 第54页 |
| 3.3.2 高纯度Nrf1-GFP和Nrf1(N275)-GFP质粒提取 | 第54页 |
| 3.3.3 Nrf1-GFP或Nrf1(N275)-GFP与ER/DsRed质粒共转染 | 第54页 |
| 3.3.4 活细胞成像技术 | 第54页 |
| 3.4 实验结果 | 第54-58页 |
| 3.4.1 Nrf1(N275)-GFP的动态变化 | 第54-56页 |
| 3.4.2 Nrf1-GFP受CHX刺激时的动态变化 | 第56页 |
| 3.4.3 Nrf1-GFP受MG132 刺激时的动态变化 | 第56-57页 |
| 3.4.4 Nrf1-GFP受CHX+MG132 刺激时的动态变化 | 第57-58页 |
| 3.5 讨论 | 第58-60页 |
| 4 活细胞成像对Nrf1 C端突变亚型降解的研究 | 第60-66页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 实验材料 | 第60-62页 |
| 4.2.1 相关设备及仪器 | 第60-61页 |
| 4.2.2 相关药品及试剂 | 第61-62页 |
| 4.2.3 药品及试剂的配制 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62页 |
| 4.3.1 细胞的传代培养、接种 | 第62页 |
| 4.3.2 高纯度质粒提取 | 第62页 |
| 4.3.3 质粒瞬时共转染 | 第62页 |
| 4.3.4 活细胞成像技术 | 第62页 |
| 4.4 实验结果 | 第62-65页 |
| 4.4.1 NTD-GFP和NTD~（Δ731741）GFP的活细胞成像结果 | 第62-63页 |
| 4.4.2 NTD~（Δ714722）GFP和NTD~（Δ723741）GFP的活细胞成像结果 | 第63-65页 |
| 4.5 讨论 | 第65-66页 |
| 5 结论与展望 | 第66-68页 |
| 5.1 本课题的主要结论 | 第66页 |
| 5.2 课题后期的展望 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| A. 作者在硕士期间发表的论文目录 | 第80页 |
| B. 作者在硕士期间取得的其他实验结果 | 第80-81页 |
