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自噬在袖状胃切除术治疗ZDF大鼠的机制以及EGCG对α细胞氧化应激保护作用的研究

第一部分 自噬在袖状胃切除术治疗2型糖尿病大鼠中的机制研究第5-7页
    摘要第5-6页
    Abstract第6-7页
第二部分 EGCG对过氧化氢诱导的α-细胞氧化应激保护作用的研究第7-15页
    摘要第7-8页
    Abstract第8-15页
第一部分 自噬在袖状胃切除术治疗2型糖尿病大鼠中的机制研究第15-46页
    第1章 前言第15-29页
        1.1 2型糖尿病的研究背景第15页
        1.2 2型糖尿病的发病原因和机理第15-16页
            1.2.1 环境因素第15-16页
            1.2.2 遗传因素第16页
        1.3 2型糖尿病的治疗方法第16-18页
            1.3.1 二甲双胍第16-17页
            1.3.2 噻唑烷二酮类第17页
            1.3.3 磺酰脲类第17页
            1.3.4 胰高血糖素样肽-1(GLP-1)极其类似物第17页
            1.3.5 针对减轻心血管并发症的药物第17页
            1.3.6 血管紧张素转换酶抑制剂第17页
            1.3.7 他汀类药物第17-18页
            1.3.8 阿司匹林第18页
        1.4 2型糖尿病的影响因素第18-22页
            1.4.1 遗传因素对2型糖尿病的影响第18页
            1.4.2 细胞机制第18-22页
        1.5 减重手术的研究背景第22-23页
            1.5.1 减重手术机制的研究第22页
            1.5.2 减重手术术式第22-23页
        1.6 自噬的研究背景第23-29页
            1.6.1 自噬过程第24-25页
            1.6.2 自噬在肝脏脂代谢中的研究第25-29页
    第2章 实验材料与方法第29-36页
        2.1 动物分组和二型糖尿病模型的建立第29页
            2.1.1 实验动物的分组和喂养第29页
            2.1.2 袖状胃切除术的实施第29页
        2.2 肝脏总蛋白样品的提取第29-30页
        2.3 总蛋白的定量和变性第30页
            2.3.1 BCA法测定蛋白浓度第30页
        2.4 蛋白免疫印迹分析(Western Blot)第30-32页
            2.4.1 SDS-PAGE胶的配制第30页
            2.4.2 电泳第30-31页
            2.4.3 转膜第31页
            2.4.4 封闭第31页
            2.4.5 孵育一抗第31页
            2.4.6 孵育二抗第31-32页
            2.4.7 显影第32页
            2.4.8 灰度值分析第32页
        2.5 RT-PCR第32-33页
            2.5.1 组织总RNA的提取第32页
            2.5.2 RNA样本浓度的测定第32-33页
            2.5.3 荧光定量PCR第33页
            2.5.4 引物序列第33页
        2.6 肝脏组织免疫荧光检测方法第33-35页
            2.6.1 组织的固定第33-34页
            2.6.2 包埋第34页
            2.6.3 切片第34页
            2.6.4 封闭第34页
            2.6.5 孵育一抗第34-35页
            2.6.6 孵育二抗第35页
        2.7 血脂指标的测定第35-36页
            2.7.1 大鼠血清的制备第35页
            2.7.2 血脂指标的检测第35-36页
    第3章 实验结果第36-43页
        3.1 术后肝脏自噬水平的检测第36-39页
            3.1.1 Western Blot验证术后肝脏自噬水平第36页
            3.1.2 免疫荧光验证袖状胃术后肝脏自噬水平第36-37页
            3.1.3 Western Blot验证Bcl-xL的表达第37-38页
            3.1.4 自噬相关基因在实施袖状胃切除术后大鼠肝脏中的表达情况第38-39页
        3.2 血脂指标的检测第39-41页
        3.3 脂肪酶的检测第41-43页
    第4章 讨论第43-45页
    第5章 结论第45-46页
第二部分 EGCG对过氧化氢诱导的α-细胞氧化应激保护作用的研究第46-58页
    第1章 前言第46-49页
        1.1 糖尿病合并低血糖第46页
        1.2 EGCG功能的研究背景第46-47页
            1.2.1 抗氧化作用第46-47页
            1.2.2 对代谢的影响第47页
            1.2.3 EGCG的抗炎作用第47页
        1.3 自由基研究背景第47-48页
        1.4 氧化应激研究背景第48页
        1.5 机体中自由基的产生和氧化应激第48-49页
    第2章 实验材料与方法第49-51页
        2.1 细胞培养第49页
        2.2 ROS检测第49页
        2.3 细胞活力检测第49页
        2.4 胰高血糖素分泌的检测第49-50页
        2.5 细胞凋亡检测第50页
        2.6 数据统计第50-51页
    第3章 实验结果第51-56页
        3.1 EGCG对过氧化氢处理的α-细胞的细胞活性的影响第51-52页
            3.1.1 活性氧的检测第51页
            3.1.2 细胞活性检测第51-52页
        3.2 胰高血糖素原mRNA的检测第52-54页
        3.3 EGCG和过氧化氢对细胞凋亡的影响第54-56页
    第4章 讨论第56-57页
    第5章 结论第57-58页
参考文献第58-68页
致谢第68-69页
附录Ⅰ 在校期间发表的文章第69页

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