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转Bt cry1Ah基因抗虫玉米的农艺性状分析

摘要第4-5页
abstract第5-6页
1 绪论第10-26页
    1.1 Bt基因概述第10-14页
        1.1.1 Bt杀虫蛋白基因第10-11页
        1.1.2 Bt基因的分类标准第11页
        1.1.3 Bt基因的杀虫机制第11-14页
    1.2 转Bt基因玉米研究进展第14-17页
        1.2.1 国外转Bt基因玉米的研究进展第14-17页
        1.2.2 国内转Bt基因玉米的研究进展第17页
    1.3 Bt cry1Ah基因简述第17-21页
    1.4 转基因植物的筛选与鉴定第21-24页
        1.4.1 转基因植物的标记和报告基因第21页
        1.4.2 PCR聚合酶链式反应第21页
        1.4.3 RT-PCR第21-22页
        1.4.4 荧光定量 RT-PCR第22页
        1.4.5 SouthernBlot第22页
        1.4.6 ELISA第22页
        1.4.7 试纸条检测第22-23页
        1.4.8 玉米螟生物抗性鉴定第23-24页
        1.4.9 农艺性状分析第24页
    1.5 研究目的和意义第24-25页
    1.6 技术路线第25-26页
2 材料和方法第26-42页
    2.1 实验材料第26-30页
        2.1.1 植物表达载体第26-27页
        2.1.2 植物材料第27-28页
        2.1.3 供试虫源第28页
        2.1.4 主要仪器设备第28-29页
        2.1.5 实验试剂第29-30页
        2.1.6 实验所设计PCR引物表第30页
    2.2 常用溶液配制第30-32页
        2.2.1 玉米基因组DNA的提取第30-31页
        2.2.2 SouthernBlot第31页
        2.2.3 ELISA第31-32页
    2.3 实验方法第32-38页
        2.3.1 玉米基因组的提取—CTAB法第32页
        2.3.2 PCR检测转基因植株第32页
        2.3.3 SouthernBlot第32-34页
        2.3.4 玉米总RNA的提取第34-35页
        2.3.5 RT-PCR第35-36页
        2.3.6 荧光定量-PCR第36页
        2.3.7 总蛋白含量的测定第36-37页
        2.3.8 Bt Cry1Ah蛋白含量第37页
        2.3.9 试纸条检测第37-38页
    2.4 转Bt基因玉米农艺性状考察第38-42页
        2.4.1 对玉米螟的抗性测定第38-39页
        2.4.2 对农艺性状的考察第39-40页
        2.4.3 玉米种子发芽率检测第40-41页
        2.4.4 田间草甘膦耐受性试验第41页
        2.4.5 数据分析第41-42页
3 结果与分析第42-67页
    3.1 HGK60及郑单958H的遗传稳定性分析和农艺性状分析第42-56页
        3.1.1 转基因玉米外源基因cry1Ah和标记基因2mG2-epsps的PCR检测第42-44页
        3.1.2 RT-PCR检测转基因植株第44页
        3.1.3 荧光定量PCR结果第44-45页
        3.1.4 ELISA检测Cry1Ah表达量结果第45-47页
        3.1.5 试纸条检测第47-48页
        3.1.6 HGK60转基因玉米农艺性状的分析第48-52页
        3.1.7 玉米螟室内和室外生物活性检测结果第52-55页
        3.1.8 田间草甘膦耐受性试验结果第55-56页
    3.2 NK材料的遗传稳定性及农艺性状分析第56-67页
        3.2.1 转基因玉米外源基因m3-cry1Ah和标记基因bar的PCR检测第56-57页
        3.2.2 RT-PCR检测转基因植株第57-58页
        3.2.3 荧光定量PCR结果第58-59页
        3.2.4 ELISA结果第59-60页
        3.2.5 Southern杂交第60-62页
        3.2.6 试纸条检测第62页
        3.2.7 NK转基因玉米农艺性状的分析第62-64页
        3.2.8 玉米螟室内和室外生物活性检测结果第64-67页
4 讨论第67-70页
5 结论第70-71页
致谢第71-73页
参考文献第73-83页
攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果第83页

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