摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-26页 |
1.1 Bt基因概述 | 第10-14页 |
1.1.1 Bt杀虫蛋白基因 | 第10-11页 |
1.1.2 Bt基因的分类标准 | 第11页 |
1.1.3 Bt基因的杀虫机制 | 第11-14页 |
1.2 转Bt基因玉米研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 国外转Bt基因玉米的研究进展 | 第14-17页 |
1.2.2 国内转Bt基因玉米的研究进展 | 第17页 |
1.3 Bt cry1Ah基因简述 | 第17-21页 |
1.4 转基因植物的筛选与鉴定 | 第21-24页 |
1.4.1 转基因植物的标记和报告基因 | 第21页 |
1.4.2 PCR聚合酶链式反应 | 第21页 |
1.4.3 RT-PCR | 第21-22页 |
1.4.4 荧光定量 RT-PCR | 第22页 |
1.4.5 SouthernBlot | 第22页 |
1.4.6 ELISA | 第22页 |
1.4.7 试纸条检测 | 第22-23页 |
1.4.8 玉米螟生物抗性鉴定 | 第23-24页 |
1.4.9 农艺性状分析 | 第24页 |
1.5 研究目的和意义 | 第24-25页 |
1.6 技术路线 | 第25-26页 |
2 材料和方法 | 第26-42页 |
2.1 实验材料 | 第26-30页 |
2.1.1 植物表达载体 | 第26-27页 |
2.1.2 植物材料 | 第27-28页 |
2.1.3 供试虫源 | 第28页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2.1.5 实验试剂 | 第29-30页 |
2.1.6 实验所设计PCR引物表 | 第30页 |
2.2 常用溶液配制 | 第30-32页 |
2.2.1 玉米基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
2.2.2 SouthernBlot | 第31页 |
2.2.3 ELISA | 第31-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-38页 |
2.3.1 玉米基因组的提取—CTAB法 | 第32页 |
2.3.2 PCR检测转基因植株 | 第32页 |
2.3.3 SouthernBlot | 第32-34页 |
2.3.4 玉米总RNA的提取 | 第34-35页 |
2.3.5 RT-PCR | 第35-36页 |
2.3.6 荧光定量-PCR | 第36页 |
2.3.7 总蛋白含量的测定 | 第36-37页 |
2.3.8 Bt Cry1Ah蛋白含量 | 第37页 |
2.3.9 试纸条检测 | 第37-38页 |
2.4 转Bt基因玉米农艺性状考察 | 第38-42页 |
2.4.1 对玉米螟的抗性测定 | 第38-39页 |
2.4.2 对农艺性状的考察 | 第39-40页 |
2.4.3 玉米种子发芽率检测 | 第40-41页 |
2.4.4 田间草甘膦耐受性试验 | 第41页 |
2.4.5 数据分析 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-67页 |
3.1 HGK60及郑单958H的遗传稳定性分析和农艺性状分析 | 第42-56页 |
3.1.1 转基因玉米外源基因cry1Ah和标记基因2mG2-epsps的PCR检测 | 第42-44页 |
3.1.2 RT-PCR检测转基因植株 | 第44页 |
3.1.3 荧光定量PCR结果 | 第44-45页 |
3.1.4 ELISA检测Cry1Ah表达量结果 | 第45-47页 |
3.1.5 试纸条检测 | 第47-48页 |
3.1.6 HGK60转基因玉米农艺性状的分析 | 第48-52页 |
3.1.7 玉米螟室内和室外生物活性检测结果 | 第52-55页 |
3.1.8 田间草甘膦耐受性试验结果 | 第55-56页 |
3.2 NK材料的遗传稳定性及农艺性状分析 | 第56-67页 |
3.2.1 转基因玉米外源基因m3-cry1Ah和标记基因bar的PCR检测 | 第56-57页 |
3.2.2 RT-PCR检测转基因植株 | 第57-58页 |
3.2.3 荧光定量PCR结果 | 第58-59页 |
3.2.4 ELISA结果 | 第59-60页 |
3.2.5 Southern杂交 | 第60-62页 |
3.2.6 试纸条检测 | 第62页 |
3.2.7 NK转基因玉米农艺性状的分析 | 第62-64页 |
3.2.8 玉米螟室内和室外生物活性检测结果 | 第64-67页 |
4 讨论 | 第67-70页 |
5 结论 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第83页 |