| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 ARC6和PDV2：叶绿体分裂装置的重要元件 | 第14-17页 |
| 1.1.1 本课题的研究意义 | 第14-15页 |
| 1.1.2 本课题的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2 重组蛋白纯化方法 | 第17-20页 |
| 1.2.1 亲和层析 | 第17-18页 |
| 1.2.2 亲和标签 | 第18-19页 |
| 1.2.3 凝胶过滤层析 | 第19-20页 |
| 1.3 蛋白晶体学 | 第20-24页 |
| 1.3.1 蛋白生长的原理 | 第21-22页 |
| 1.3.2 蛋白晶体的优化 | 第22-24页 |
| 第二章 ARC6和PDV2克隆的构建 | 第24-32页 |
| 2.1 简介 | 第24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.1 质粒和菌株 | 第24页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.2.3 培养基 | 第24-25页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第25页 |
| 2.3 构建克隆pETDuet-ARC6-PDV2 | 第25-29页 |
| 2.3.1 聚合酶链式反应扩增PDV2和ARC6基因 | 第25-27页 |
| 2.3.2 目的基因和载体的双酶切 | 第27页 |
| 2.3.3 连接 | 第27-28页 |
| 2.3.4 转化 | 第28页 |
| 2.3.5 重组子pETDuet-PDV2、pGEX6p-1-PDV2的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.6 构建克隆pETDuet-ARC6-PDV2 | 第29页 |
| 2.4 构建关于PDV2的克隆 | 第29-30页 |
| 2.4.1 构建克隆pET28a-PDV2,pGEX6p-1-PDV2 | 第29-30页 |
| 2.4.2 构建克隆pET28a-sumo-PDV2 | 第30页 |
| 2.5 构建关于ARC(76-618aa)的克隆 | 第30页 |
| 2.6 实验结果 | 第30-31页 |
| 2.7 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 ARC6(646-801aa)和PDV2的表达与纯化 | 第32-59页 |
| 3.1 简介 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-35页 |
| 3.2.1 菌种 | 第32页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第32-34页 |
| 3.2.3 培养基 | 第34页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.3 目的蛋白的表达与鉴定 | 第35-42页 |
| 3.3.1 目的蛋白的小量诱导表达 | 第35页 |
| 3.3.2 目的蛋白的试表达与纯化 | 第35-36页 |
| 3.3.3 亲和层析纯化方法 | 第36-39页 |
| 3.3.4 凝胶层析 | 第39-41页 |
| 3.3.5 亲和层析柱的处理 | 第41-42页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第42-58页 |
| 3.4.1 小量诱导表达pETDuet-ARC6-PDV2 | 第42-43页 |
| 3.4.2 试表达pET28a-PDV2(236-307aa) | 第43-45页 |
| 3.4.3 试表达pET28a-sumo-PDV2(236-307aa) | 第45-47页 |
| 3.4.4 试表达pGEX6p-1-PDV2(236-307aa) | 第47-48页 |
| 3.4.5 提高pGEX6p-1-PDV2(236-307aa)里目的蛋白的表达量 | 第48-51页 |
| 3.4.6 ARC6(646-801aa)和PDV2复合物的获得 | 第51-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 目的蛋白的结晶以及晶体衍射 | 第59-69页 |
| 4.1 简介 | 第59页 |
| 4.2 实验材料 | 第59页 |
| 4.2.1 主要试剂和材料 | 第59页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第59页 |
| 4.3 晶体优化方法 | 第59-61页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第61-68页 |
| 4.4.1 晶体的发现与优化 | 第61-64页 |
| 4.4.2 Native晶体的获得 | 第64-65页 |
| 4.4.3 硒代晶体的获得 | 第65-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-69页 |
| 第五章 ARC6(646-801aa)与PDV2(280-307aa)的共结晶 | 第69-82页 |
| 5.1 简介 | 第69页 |
| 5.2 实验材料 | 第69页 |
| 5.3 关于获得晶体复合物的一些实验 | 第69-71页 |
| 5.3.1 尝试获得ARC6(674-801aa)和PDV2(236-307aa)的复合物 | 第69-70页 |
| 5.3.2 GST-pull down | 第70-71页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第71-81页 |
| 5.4.1 ARC6(674-801aa)和PDV2(236-307aa)的复合物 | 第71-73页 |
| 5.4.2 GST-pull down的实验结果 | 第73-77页 |
| 5.4.3 ARC6(646-801aa)与PDV2(280-307aa)的共结晶 | 第77-81页 |
| 5.5 小结 | 第81-82页 |
| 第六章 ARC6(76-618aa)的纯化与结晶 | 第82-88页 |
| 6.1 简介 | 第82页 |
| 6.2 实验材料 | 第82页 |
| 6.3 实验结果与讨论 | 第82-87页 |
| 6.3 小结 | 第87-88页 |
| 第七章 结论与建议 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-92页 |
| 附录 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 作者和导师简介 | 第95-96页 |
| 硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第96-97页 |
