| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 实验材料 | 第13-23页 |
| 1、主要化学试剂及材料 | 第13-14页 |
| 1.1 主要试剂 | 第13-14页 |
| 1.2 Real-time PCR 所用引物 | 第14页 |
| 1.3 转染试剂 | 第14页 |
| 2、主要试剂和缓冲液配制 | 第14-19页 |
| 3、标本来源和临床资料 | 第19-20页 |
| 4、仪器 | 第20-21页 |
| 5、生物信息学软件和网络数据库 | 第21-23页 |
| 实验方法 | 第23-33页 |
| 1、患者骨髓穿刺涂片进行瑞氏染色和细胞学鉴定 | 第23页 |
| 2、患者骨髓样品 microRNA 的提取 | 第23-24页 |
| 2.1 所用器具准备 | 第23页 |
| 2.2 提取步骤 | 第23-24页 |
| 3、Real-Time PCR 检测患者骨髓样品的 microRNA 的表达 | 第24-25页 |
| 3.1 microRNA 逆转录 | 第24页 |
| 3.2 Real-time PCR 检测 | 第24-25页 |
| 4、K562 细胞培养与传代 | 第25-26页 |
| 4.1 细胞培养 | 第25页 |
| 4.2 细胞传代 | 第25-26页 |
| 5、K562 瞬时转染 MICRORNA-127，MICRORNA-154，MICRORNA-185，MICRORNA-17-3P | 第26-27页 |
| 5.1 转染 microRNA-127，microRNA-154，microRNA-185，microRNA-17-3p 的序列 | 第26页 |
| 5.2 转染步骤 | 第26-27页 |
| 6、MTT 法测 MICRNA-127、MICRORNA-154、MICRORNA-185、MICRORNA-17-3P 对K562 细胞增殖的影响 | 第27页 |
| 7、转染后细胞计数描绘细胞生长曲线 | 第27页 |
| 8、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测 MYADM 基因的表达 | 第27-29页 |
| 8.1 提取细胞总 RNA | 第27-28页 |
| 8.2 细胞总 RNA 鉴定 | 第28页 |
| 8.3 逆转录合成 cDNA 第一链 | 第28页 |
| 8.4 PCR 检测细胞分化相关蛋白 Myadm mRNA 表达水平的改变 | 第28-29页 |
| 8.5 琼脂糖凝胶电泳鉴定 PCR 产物 | 第29页 |
| 9、免疫印记（WESTERN BLOT）检测分化相关蛋白 MYADM 的表达水平 | 第29-31页 |
| 10、瑞氏染色检测 K562 细胞分化的形态学变化 | 第31页 |
| 11、统计学处理 | 第31-33页 |
| 实验结果 | 第33-41页 |
| 1、患者骨髓镜检结果（油镜） | 第33页 |
| 2、Real-timePCR 检测髓系白血病患者几种 microRNA 的表达 | 第33-35页 |
| 3、microRNA-127, microRNA-154 对 K562 细胞增殖促进作用 | 第35-36页 |
| 4、microRNA-185，microRNA-17-3p 表达对 K562 增殖抑制作用 | 第36页 |
| 5、RT-PCR 检测细胞分化相关蛋白 Myadm mRNA 的表达水平 | 第36-38页 |
| 6、MICRORNA-127, MICRORNA-154，MICRORNA-185，MICRORNA-17-3P 对 K562 细胞分化相关蛋白 MYADM 表达水平的调节作用 | 第38页 |
| 7、MICRORNA-127, MICRORNA-154 诱导 K562 细胞分化后的形态学变化 | 第38-41页 |
| 讨论 | 第41-43页 |
| 结论及不足之处 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 文献综述 | 第45-61页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 1.英文缩略词表 | 第61-62页 |
| 2.个人简历 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
