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促红细胞生成素调控心肌成纤维细胞Toll样受体4表达的效应与机制

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
中英缩略词表第9-10页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料与方法第13-28页
    2.1 实验材料第13-14页
        2.1.1 实验动物第13页
        2.1.2 主要试剂第13-14页
        2.1.3 主要仪器第14页
    2.2 实验方法第14-28页
        2.2.1 器材的灭菌、去 RNA 酶处理第14-15页
        2.2.2 相关试剂及液体的配置第15-17页
        2.2.3 乳鼠心肌成纤维细胞的培养及鉴定第17-19页
        2.2.4 TLR4 慢病毒感染心肌成纤维细胞确定 MOI 值(24 孔板)第19页
        2.2.5 细胞计数法摸索EPO抑制AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖的最佳浓度及时间第19-20页
        2.2.6 CCK8 法摸索 EPO 抑制 AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖的最佳浓度及时间第20页
        2.2.7 实验分组第20页
        2.2.8 细胞计数法检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况第20-21页
        2.2.9 CCK8 检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况第21页
        2.2.10 划痕试验检测各组培养细胞的迁移能力第21页
        2.2.11 ELISA 法检测培养细胞上清中 MMP9 的含量第21-22页
        2.2.12 心肌成纤维细胞总 RNA 提取及检测总 RNA 的浓度及纯度第22-23页
        2.2.13 RT-PCR 法检测各组细胞中 TLR4 的表达第23-24页
        2.2.14 流式细胞术检测各组细胞中 TLR4 的表达第24-25页
        2.2.15 心肌成纤维细胞总蛋白的提取及蛋白浓度的测定第25-26页
        2.2.16 Western bIot 法检测心肌成纤维细胞的 Akt 通路蛋白的表达第26-27页
        2.2.17 统计学处理第27-28页
第3章 结果第28-41页
    3.1 乳鼠心肌成纤维细胞生长及鉴定第28-29页
        3.1.1 倒置显微镜观察生长状态第28页
        3.1.2 免疫组织化学检测波形蛋白的表达第28-29页
    3.2 摸索 TLR4 过表达慢病毒的最佳转染复数第29-31页
        3.2.1 慢病毒感染乳鼠心肌成纤维细胞后荧光表达情况第29-30页
        3.2.2 慢病毒感染乳鼠心肌成纤维细胞后 TLR4 表达变化第30-31页
    3.3 细胞计数和 CCK8 摸索 EPO 的最佳干预时间和浓度第31页
    3.4 细胞计数检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况第31-32页
    3.5 CCK8 检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况第32-33页
    3.6 ELISA 检测细胞上清液中 MMP9 的含量第33-34页
    3.7 划痕试验检测各组细胞的迁移能力第34-36页
    3.8 RT-PCR 法检测各组心肌成纤维细胞 TLR4 的表达第36-37页
    3.9 流式细胞术检测各组心肌成纤维细胞 TLR4 的表达第37-39页
    3.10 Western blot 法检测 PI3K/Akt 通路蛋白的表达第39-41页
第4章 讨论第41-46页
    4.1 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞增殖的影响第41-42页
    4.2 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞 MMP-9 的影响第42页
    4.3 EPO 对 PDGF-BB 作用后心肌成纤维细胞迁移能力的影响第42-43页
    4.4 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞 p-Akt 表达水平的影响第43-44页
    4.5 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞 TLR4 表达水平的影响第44-46页
第5章 结论与展望第46-47页
    5.1 结论第46页
    5.2 展望第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-51页
综述第51-57页
    参考文献第55-57页

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