摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-28页 |
2.1 实验材料 | 第13-14页 |
2.1.1 实验动物 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.3 主要仪器 | 第14页 |
2.2 实验方法 | 第14-28页 |
2.2.1 器材的灭菌、去 RNA 酶处理 | 第14-15页 |
2.2.2 相关试剂及液体的配置 | 第15-17页 |
2.2.3 乳鼠心肌成纤维细胞的培养及鉴定 | 第17-19页 |
2.2.4 TLR4 慢病毒感染心肌成纤维细胞确定 MOI 值(24 孔板) | 第19页 |
2.2.5 细胞计数法摸索EPO抑制AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖的最佳浓度及时间 | 第19-20页 |
2.2.6 CCK8 法摸索 EPO 抑制 AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖的最佳浓度及时间 | 第20页 |
2.2.7 实验分组 | 第20页 |
2.2.8 细胞计数法检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况 | 第20-21页 |
2.2.9 CCK8 检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况 | 第21页 |
2.2.10 划痕试验检测各组培养细胞的迁移能力 | 第21页 |
2.2.11 ELISA 法检测培养细胞上清中 MMP9 的含量 | 第21-22页 |
2.2.12 心肌成纤维细胞总 RNA 提取及检测总 RNA 的浓度及纯度 | 第22-23页 |
2.2.13 RT-PCR 法检测各组细胞中 TLR4 的表达 | 第23-24页 |
2.2.14 流式细胞术检测各组细胞中 TLR4 的表达 | 第24-25页 |
2.2.15 心肌成纤维细胞总蛋白的提取及蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
2.2.16 Western bIot 法检测心肌成纤维细胞的 Akt 通路蛋白的表达 | 第26-27页 |
2.2.17 统计学处理 | 第27-28页 |
第3章 结果 | 第28-41页 |
3.1 乳鼠心肌成纤维细胞生长及鉴定 | 第28-29页 |
3.1.1 倒置显微镜观察生长状态 | 第28页 |
3.1.2 免疫组织化学检测波形蛋白的表达 | 第28-29页 |
3.2 摸索 TLR4 过表达慢病毒的最佳转染复数 | 第29-31页 |
3.2.1 慢病毒感染乳鼠心肌成纤维细胞后荧光表达情况 | 第29-30页 |
3.2.2 慢病毒感染乳鼠心肌成纤维细胞后 TLR4 表达变化 | 第30-31页 |
3.3 细胞计数和 CCK8 摸索 EPO 的最佳干预时间和浓度 | 第31页 |
3.4 细胞计数检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况 | 第31-32页 |
3.5 CCK8 检测各组心肌成纤维细胞增殖的情况 | 第32-33页 |
3.6 ELISA 检测细胞上清液中 MMP9 的含量 | 第33-34页 |
3.7 划痕试验检测各组细胞的迁移能力 | 第34-36页 |
3.8 RT-PCR 法检测各组心肌成纤维细胞 TLR4 的表达 | 第36-37页 |
3.9 流式细胞术检测各组心肌成纤维细胞 TLR4 的表达 | 第37-39页 |
3.10 Western blot 法检测 PI3K/Akt 通路蛋白的表达 | 第39-41页 |
第4章 讨论 | 第41-46页 |
4.1 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
4.2 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞 MMP-9 的影响 | 第42页 |
4.3 EPO 对 PDGF-BB 作用后心肌成纤维细胞迁移能力的影响 | 第42-43页 |
4.4 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞 p-Akt 表达水平的影响 | 第43-44页 |
4.5 EPO 对 AngⅡ作用后心肌成纤维细胞 TLR4 表达水平的影响 | 第44-46页 |
第5章 结论与展望 | 第46-47页 |
5.1 结论 | 第46页 |
5.2 展望 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
综述 | 第51-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |