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中国卤虫甘油激酶基因(As-gk)在胚胎滞育解除过程中的表达模式分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1. 前言第8-14页
    1.1 卤虫的研究概况第8-9页
        1.1.1 卤虫的形态与生物学特征第8页
        1.1.2 卤虫的经济价值第8-9页
    1.2 甘油激酶基因的结构特征及功能第9-13页
        1.2.1 甘油激酶(GK)的结构特征第9-11页
        1.2.2 GK 的功能第11-12页
        1.2.3 GK 的活性调节第12-13页
    1.3 本研究的目的及意义第13-14页
2. 材料与方法第14-36页
    2.1 材料第14-20页
        2.1.1 卤虫的孵化及培养第14页
        2.1.2 主要试剂第14-19页
        2.1.3 主要仪器第19-20页
    2.2 方法第20-36页
        2.2.1 卤虫总 RNA 的提取第20-21页
        2.2.2 cDNA 合成反应第21页
        2.2.3 目的基因片段的扩增第21-22页
        2.2.4 cDNA 末端快速扩增(RACE)第22-25页
        2.2.5 PCR 产物的回收与克隆第25-27页
        2.2.6 原位杂交第27-29页
        2.2.7 实时荧光定量 PCR第29-30页
        2.2.8 As-GK 蛋白的原核表达第30-32页
        2.2.9 As-GK 重组蛋白的大量诱导和纯化第32-33页
        2.2.10 Western Blot第33-35页
        2.2.11 As-gk 的生物信息学与统计学分析第35-36页
3. 结果第36-53页
    3.1 As-gk 基因的克隆及结构特征第36-39页
        3.1.1 As-gk 基因部分序列第36页
        3.1.2 As-gk 基因 3’端序列第36-37页
        3.1.3 As-gk 基因 5’端序列第37页
        3.1.4 As-gk 基因全长序列第37-39页
    3.2 As-gk 的生物信息学分析第39-42页
    3.3 序列进化关系分析第42-45页
    3.4 As-gk 表达模式第45-48页
        3.4.1 As-gk 的表达部位第45-46页
        3.4.2 As-gk 的表达水平第46-48页
    3.5 As-GK 开放阅读框(ORF)的扩增第48页
    3.6 As-GK 重组蛋白的表达及纯化第48-50页
    3.7 As-GK 蛋白的表达模式第50-53页
        3.7.1 卤虫不同发育时期 As-GK 蛋白的表达第50页
        3.7.2 卤虫温度刺激下 As-GK 蛋白的表达第50页
        3.7.3 卤虫盐度刺激下 As-GK 蛋白的表达第50-53页
4. 讨论第53-56页
    4.1 中国卤虫 As-gk 基因全长及进化特征第53-54页
    4.2 As-gk 在不同发育时期的表达部位第54页
    4.3 As-GK 在不同发育时期的表达水平第54页
    4.4 温度和盐胁迫条件下 As-GK 的表达水平第54-55页
    4.5 As-GK 在滞育过程中和滞育胚胎重启过程中的作用第55-56页
结论第56-57页
参考文献第57-62页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第62-63页
致谢第63页

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