摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1. 前言 | 第8-14页 |
1.1 卤虫的研究概况 | 第8-9页 |
1.1.1 卤虫的形态与生物学特征 | 第8页 |
1.1.2 卤虫的经济价值 | 第8-9页 |
1.2 甘油激酶基因的结构特征及功能 | 第9-13页 |
1.2.1 甘油激酶(GK)的结构特征 | 第9-11页 |
1.2.2 GK 的功能 | 第11-12页 |
1.2.3 GK 的活性调节 | 第12-13页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第13-14页 |
2. 材料与方法 | 第14-36页 |
2.1 材料 | 第14-20页 |
2.1.1 卤虫的孵化及培养 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂 | 第14-19页 |
2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
2.2 方法 | 第20-36页 |
2.2.1 卤虫总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
2.2.2 cDNA 合成反应 | 第21页 |
2.2.3 目的基因片段的扩增 | 第21-22页 |
2.2.4 cDNA 末端快速扩增(RACE) | 第22-25页 |
2.2.5 PCR 产物的回收与克隆 | 第25-27页 |
2.2.6 原位杂交 | 第27-29页 |
2.2.7 实时荧光定量 PCR | 第29-30页 |
2.2.8 As-GK 蛋白的原核表达 | 第30-32页 |
2.2.9 As-GK 重组蛋白的大量诱导和纯化 | 第32-33页 |
2.2.10 Western Blot | 第33-35页 |
2.2.11 As-gk 的生物信息学与统计学分析 | 第35-36页 |
3. 结果 | 第36-53页 |
3.1 As-gk 基因的克隆及结构特征 | 第36-39页 |
3.1.1 As-gk 基因部分序列 | 第36页 |
3.1.2 As-gk 基因 3’端序列 | 第36-37页 |
3.1.3 As-gk 基因 5’端序列 | 第37页 |
3.1.4 As-gk 基因全长序列 | 第37-39页 |
3.2 As-gk 的生物信息学分析 | 第39-42页 |
3.3 序列进化关系分析 | 第42-45页 |
3.4 As-gk 表达模式 | 第45-48页 |
3.4.1 As-gk 的表达部位 | 第45-46页 |
3.4.2 As-gk 的表达水平 | 第46-48页 |
3.5 As-GK 开放阅读框(ORF)的扩增 | 第48页 |
3.6 As-GK 重组蛋白的表达及纯化 | 第48-50页 |
3.7 As-GK 蛋白的表达模式 | 第50-53页 |
3.7.1 卤虫不同发育时期 As-GK 蛋白的表达 | 第50页 |
3.7.2 卤虫温度刺激下 As-GK 蛋白的表达 | 第50页 |
3.7.3 卤虫盐度刺激下 As-GK 蛋白的表达 | 第50-53页 |
4. 讨论 | 第53-56页 |
4.1 中国卤虫 As-gk 基因全长及进化特征 | 第53-54页 |
4.2 As-gk 在不同发育时期的表达部位 | 第54页 |
4.3 As-GK 在不同发育时期的表达水平 | 第54页 |
4.4 温度和盐胁迫条件下 As-GK 的表达水平 | 第54-55页 |
4.5 As-GK 在滞育过程中和滞育胚胎重启过程中的作用 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |