| 中文摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 一、研究对象与方法 | 第12-24页 |
| (一)研究对象 | 第12-14页 |
| 1.COPD患者临床资料及肺组织收集 | 第12页 |
| 2.Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离与培养 | 第12页 |
| 3.实验试剂 | 第12-14页 |
| 4.实验仪器 | 第14页 |
| (二)实验方法 | 第14-22页 |
| 1.肺功能的测定 | 第14-15页 |
| 2.肺组织病理学检测(HE染色) | 第15页 |
| 3.肺组织免疫组化染色 | 第15-16页 |
| 4.肺组织β-半乳糖苷酶染色 | 第16页 |
| 5.Real-timePCR检测肺组织衰老相关指标 | 第16-18页 |
| 6.Westernblot检测P53、P21、SIRT1、FOXO3α蛋白水平 | 第18-20页 |
| 7.分离、培养及鉴定人肺组织来源的Ⅱ型肺泡上皮细胞 | 第20-21页 |
| 8.制备香烟烟雾混悬液,干预AECⅡ,诱导细胞衰老 | 第21-22页 |
| 9.构建慢病毒过表达的SAL-RNA1载体,观察SAL-RNA1过表达能否延缓AECⅡ细胞衰老 | 第22页 |
| (三)统计分析 | 第22-24页 |
| 二、结果 | 第24-28页 |
| (一)COPD组与对照组人群临床特征情况比较,细胞衰老水平比较 | 第24-26页 |
| 1.COPD组与对照组人群一般情况比较 | 第24页 |
| 2.COPD组与对照组人群肺功能比较 | 第24-25页 |
| 3.COPD组与对照组人群肺组织HE染色结果比较 | 第25页 |
| 4.COPD组与对照组人群肺组织细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色水平比较 | 第25页 |
| 5.COPD组与对照组人群肺组织细胞衰老相关lncRNAs表达水平比较 | 第25页 |
| 6.COPD组与对照组人群肺组织细胞衰老相关mRNA表达水平比较 | 第25-26页 |
| 7.COPD组与对照组人群肺组织细胞衰老相关SIRT1、FOXO3α、P53和P21蛋白水平比较 | 第26页 |
| (二)体外分离、培养及鉴定AECII,建立CSE诱导的AECII衰老模型 | 第26页 |
| 1.AECII分离、培养及电镜鉴定 | 第26页 |
| 2.建立了一套基于恒流蠕动泵的制备CSE的装置 | 第26页 |
| 3.成功构建CSE诱导的AECⅡ衰老模型 | 第26页 |
| (三)建立慢病毒过表达的lncRNASAL-RNA1,研究SAL-RNA1过表达能否延缓AECII细胞衰老 | 第26-28页 |
| 1.成功构建携带目的基因SAL-RNA1过表达慢病毒载体 | 第26-27页 |
| 2.LncRNASAL-RNA1过表达能够延缓CSE诱导的AECⅡ衰老性状 | 第27-28页 |
| 三、分析和讨论 | 第28-30页 |
| 四、结论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 附图 | 第35-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 文献综述 | 第46-52页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
