摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 山羊胎盘滋养层细胞及其凋亡 | 第11-15页 |
1.1 胎盘滋养层的功能 | 第11-13页 |
1.1.1 胎盘滋养层细胞与妊娠识别 | 第11-12页 |
1.1.2 胎盘滋养层细胞与胚胎附植 | 第12-13页 |
1.2 胎盘滋养层细胞的凋亡 | 第13-15页 |
1.2.1 内源性调控因素 | 第13页 |
1.2.2 外源性调控因素 | 第13-14页 |
1.2.3 巨噬细胞 | 第14-15页 |
第二章 ATF6与慢病毒载体的研究进展 | 第15-26页 |
2.1 内质网应激研究进展 | 第15-21页 |
2.1.1 内质网与内质网应激 | 第15-16页 |
2.1.2 内质网应激与细胞凋亡 | 第16-17页 |
2.1.3 UPR的三个信号通路 | 第17-21页 |
2.2 ATF6研究进展 | 第21-22页 |
2.2.1 ATF6的结构与功能 | 第21-22页 |
2.2.2 ATF6与疾病 | 第22页 |
2.3 慢病毒载体研究进展 | 第22-25页 |
2.3.1 慢病毒载体的结构与功能 | 第23-24页 |
2.3.2 RNA干扰的基本原理 | 第24页 |
2.3.3 慢病毒载体的发展应用 | 第24-25页 |
2.4 研究目的及意义 | 第25-26页 |
第三章 山羊ATF6基因重组慢病毒载体的构建 | 第26-58页 |
3.1 材料 | 第26-28页 |
3.1.1 动物材料、细胞、菌株和质粒 | 第26页 |
3.1.2 试剂 | 第26-27页 |
3.1.3 仪器 | 第27-28页 |
3.2 方法 | 第28-45页 |
3.2.1 山羊ATF6基因的获取 | 第28-34页 |
3.2.2 山羊ATF6基因CDS片段的生物信息学分析 | 第34页 |
3.2.3 山羊ATF6基因慢病毒过表达载体构建 | 第34-37页 |
3.2.4 山羊ATF6基因慢病毒干扰载体构建 | 第37-40页 |
3.2.5 山羊ATF6基因重组慢病毒包装 | 第40-42页 |
3.2.6 山羊ATF6基因慢病毒效率鉴定 | 第42-45页 |
3.3 试验结果 | 第45-55页 |
3.3.1 山羊ATF6基因CDS扩增最佳退火温度的筛选 | 第45页 |
3.3.2 山羊ATF6基因CDS片段的纯化回收 | 第45页 |
3.3.3 pMD19T-ATF6-CDS质粒的双酶切鉴定 | 第45-46页 |
3.3.4 山羊ATF6基因CDS片段的生物信息学鉴定分析 | 第46-49页 |
3.3.5 pCD513B慢病毒过表达质粒的双酶切及纯化 | 第49页 |
3.3.6 pCD513B-ATF6-CDS重组过表达质粒的双酶切鉴定 | 第49页 |
3.3.7 pCD513B-U6慢病毒干扰质粒的双酶切及纯化 | 第49-50页 |
3.3.8 pCD513B-U6-shRNA-ATF6-CDS重组干扰质粒的鉴定 | 第50-51页 |
3.3.9 慢病毒包装质粒的酶切鉴定 | 第51页 |
3.3.10 慢病毒包装 | 第51页 |
3.3.11 慢病毒效率的鉴定筛选 | 第51-55页 |
3.4 讨论 | 第55-57页 |
3.5 小结 | 第57-58页 |
第四章 ATF6介导的ERS通路对GTC凋亡的影响 | 第58-64页 |
4.1 材料与仪器 | 第58-60页 |
4.1.1 细胞、质粒 | 第58页 |
4.1.2 试剂 | 第58-59页 |
4.1.3 仪器 | 第59-60页 |
4.2 方法 | 第60页 |
4.2.1 ATF6干扰GTC的构建 | 第60页 |
4.2.2 流式检测ERS时ATF6干扰GTC的凋亡率变化 | 第60页 |
4.3 试验结果 | 第60-63页 |
4.3.1 ATF6干扰GTC的构建 | 第60-62页 |
4.3.2 ATF6干扰慢病毒对GTC干扰效率的检测 | 第62页 |
4.3.3 ATF6表达抑制后GTC在ERS时凋亡率的变化 | 第62-63页 |
4.4 讨论 | 第63页 |
4.5 小结 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
附录 | 第72-74页 |
缩略词 | 第74-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78页 |