| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌简介 | 第9-10页 |
| 1.2 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白简介 | 第10-12页 |
| 1.2.1 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白晶体形态的多样性 | 第10页 |
| 1.2.2 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白编码基因及其分类 | 第10-11页 |
| 1.2.3 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的结构和功能 | 第11-12页 |
| 1.3 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的作用模式 | 第12-13页 |
| 1.3.1 穿孔模式 | 第12-13页 |
| 1.3.2 信号传导模式 | 第13页 |
| 1.3.3 其它作用模式 | 第13页 |
| 1.4 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白稳定性的影响因素 | 第13-16页 |
| 1.4.1 辅助蛋白对晶体蛋白稳定性的影响 | 第13-14页 |
| 1.4.2 杀虫晶体蛋白C-端对晶体蛋白稳定性的影响 | 第14-15页 |
| 1.4.3 晶体蛋白C-端二硫键对晶体蛋白稳定性的影响 | 第15-16页 |
| 1.5 苏云金芽胞杆菌伴胞晶体的"无毒"现象 | 第16-18页 |
| 1.5.1 伴胞晶体没有杀虫活性的可能原因 | 第16页 |
| 1.5.2 杀虫晶体蛋白溶解性对毒性的影响 | 第16-17页 |
| 1.5.3 杀虫晶体蛋白的化学结构和杀虫活性 | 第17-18页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-28页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 培养基 | 第19页 |
| 2.1.3 试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 生物测定虫源 | 第20-21页 |
| 2.1.5 仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 DNA操作 | 第21-22页 |
| 2.2.2 质粒的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.3 PCR反应 | 第23页 |
| 2.2.4 重组质粒的转化和转化子的筛选 | 第23-24页 |
| 2.2.5 苏云金芽胞杆菌伴胞晶体镜检 | 第24页 |
| 2.2.6 蛋白的SDS-PAGE检测和定量分析 | 第24-25页 |
| 2.2.7 突变菌株晶体蛋白溶解性实验 | 第25-26页 |
| 2.2.8 小菜蛾的生物测定 | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-40页 |
| 3.1 杀虫晶体蛋白Cry7Ba1和Cry1C的纯化和溶解性检测 | 第28-30页 |
| 3.1.1 杀虫晶体蛋白Cry7Ba1和Cry1C的纯化 | 第28-29页 |
| 3.1.2 杀虫晶体蛋白Cry7Ba1和Cry1C的溶解性检测 | 第29-30页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第30页 |
| 3.3 含有突变半胱氨酸的穿梭表达质粒的构建 | 第30-31页 |
| 3.4 构建Cry7Ba1的半胱氨酸突变体 | 第31-32页 |
| 3.5 Cry7Ba1的半胱氨酸定点突变重组蛋白在BMB171中的表达 | 第32-33页 |
| 3.6 Cry7Ba1的半胱氨酸突变体形成晶体的能力 | 第33-34页 |
| 3.7 Cry7Ba1的半胱氨酸突变体的溶解性 | 第34-36页 |
| 3.8 Cry7Ba1的半胱氨酸突变体的杀虫活性 | 第36-40页 |
| 3.8.1 突变体晶体蛋白的浓度测定 | 第36-37页 |
| 3.8.2 BMB1162、BMB1163突变体晶体蛋白的杀虫活性 | 第37-38页 |
| 3.8.3 Cry7Ba1的6个晶胞混合物的杀虫活性 | 第38-40页 |
| 4 讨论和总结 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
