| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 研究现状、成果 | 第13-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-15页 |
| 1. 材料与方法 | 第15-31页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 1.1.1 细胞 | 第15页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第15-17页 |
| 1.2 实验方法 | 第17-31页 |
| 1.2.1 构建pELNS-BMP-2,-4,-6,7,-9,wnt3a表达质粒载体 | 第17-22页 |
| 1.2.2 pELNS-BMP-2,pELNS-BMP-4,pELNS-BMP-6,pELNS-BMP-7,pELNS-BMP-9,pELNS-wnt3a慢病毒载体质粒的制备和鉴定 | 第22-25页 |
| 1.2.3 重组慢病毒感染MC3T3-E1细胞及各基因单独转染成骨效能的评价 | 第25-28页 |
| 1.2.4 双基因联合转染MC3T3-E1细胞及联合转染成骨效能的评 | 第28-31页 |
| 2. 结果 | 第31-37页 |
| 2.1 pELNS-BMP-2、pELNS-BMP-4、pELNS-BMP-6、pELNS-BMP-7、pELNS-BMP-9、pELNS-wnt3a表达质粒的构建 | 第31页 |
| 2.2 重组慢病毒pELNS-BMP-2,pELNS-BMP-4,pELNS-BMP-6,pELNS-BMP-7,pELNS-BMP-9,pELNS-wnt3a感染MC3T3-E1细胞 | 第31-33页 |
| 2.2.1 荧光显微镜下观察：重组慢病毒成功感染MC3T3-E1细胞 | 第32-33页 |
| 2.2.2 real time PCR检测Runt2 mRNA表达水平,鉴定单独转染的成骨效能 | 第33页 |
| 2.3 双基因联合转染的成骨效能评价 | 第33-36页 |
| 2.3.1 Elisa鉴定8种方法联合转染MC3T3-E1细胞中BGP和ALP表达水平 | 第33-35页 |
| 2.3.2 real time PCR检测Runt2 mRNA表达水平,鉴定联合转染的成骨效能 | 第35-36页 |
| 2.4 BMP2和BMP7(T5)联合转染的成骨效能评价 | 第36-37页 |
| 2.4.1 免疫荧光检测BMP2和BMP7联合转染MC3T3-E1细胞 | 第36页 |
| 2.4.2 Western blot检测BMPs和Wnt3a蛋白的表达水平 | 第36-37页 |
| 3. 讨论 | 第37-53页 |
| 3.1 基因修饰的干细胞 | 第37-39页 |
| 3.2 病毒载体的选择 | 第39-44页 |
| 3.3 成骨分化诱导因子 | 第44-53页 |
| 4. 结论 | 第53-55页 |
| 全文结论 | 第55-56页 |
| 论文创新点 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-69页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-83页 |
| 综述 BMP的研究进展与临床应用 | 第83-98页 |
| 综述参考文献 | 第93-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
