致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 综述 | 第8-22页 |
1.1 玉米雄性不育的研究意义 | 第8页 |
1.2 雄性不育的分类 | 第8-11页 |
1.2.1 细胞质雄性不育 | 第8页 |
1.2.2 细胞核雄性不育 | 第8页 |
1.2.3 质、核互作型雄性不育 | 第8-9页 |
1.2.4 质、核互作雄性不育型分类 | 第9-11页 |
1.3 细胞质雄性不育的败育时期及遗传特点 | 第11页 |
1.4 细胞质雄性不育的恢复基因 | 第11-12页 |
1.5 雄性不育的恢复机理 | 第12-14页 |
1.5.1 代谢与互作假说 | 第12-13页 |
1.5.2 RNA 编辑假说 | 第13页 |
1.5.3 抑制细胞程序性死亡假说 | 第13-14页 |
1.6 基因克隆方法 | 第14-18页 |
1.6.1 图位克隆 | 第14-18页 |
1.7 分子标记的种类及其发展 | 第18-22页 |
1.7.1 SSR 标记 | 第19页 |
1.7.2 InDel 标记 | 第19页 |
1.7.3 RFLP 标记 | 第19-20页 |
1.7.4 CAPS 标记 | 第20页 |
1.7.5 RAPD 标记 | 第20页 |
1.7.6 SCAR 标记 | 第20页 |
1.7.7 STS 标记 | 第20-21页 |
1.7.8 SNP 标记 | 第21-22页 |
2 引言 | 第22-23页 |
3 材料与方法 | 第23-30页 |
3.1 材料 | 第23页 |
3.2 试验设计与田间调查 | 第23页 |
3.3 高质量DNA 的提取和纯化 | 第23-25页 |
3.3.1 采用改良的SDS 方法提取亲本及群体的DNA | 第23-24页 |
3.3.2 DNA 的纯化及质量检测 | 第24-25页 |
3.4 引物设计 | 第25-26页 |
3.4.1 BAC-SSR 标记 | 第25页 |
3.4.2 InDel 标记 | 第25页 |
3.4.3 Intron 标记 | 第25-26页 |
3.5 BSA 法建池 | 第26页 |
3.6 PCR 反应体系 | 第26页 |
3.7 碱裂解法提取种子DNA 的步骤 | 第26-27页 |
3.8 碱裂解法提取种子的DNA 体系配制 | 第27页 |
3.9 PCR 反应程序 | 第27页 |
3.10 选择性扩增产物检测 | 第27-29页 |
3.10.1 扩增DNA 变性 | 第27-28页 |
3.10.2 电泳准备 | 第28页 |
3.10.3 扩增产物的电泳 | 第28页 |
3.10.4 扩增产物的银染检测——聚丙烯酰胺凝胶NaOH 染色方法 | 第28-29页 |
3.10.5 SSR 分子标记数据的收集 | 第29页 |
3.11 BAC 文库的序列分析及候选基因的预测 | 第29-30页 |
4 结果与分析 | 第30-42页 |
4.1 BC1F1 育性的田间调查 | 第30页 |
4.2 恢复基因Rf4 SSR 标记连锁分析 | 第30-37页 |
4.3 利用开发的分子标记检测交换单株,进行精细定位 | 第37-39页 |
4.4 BAC 文库的筛选及序列分析 | 第39-42页 |
5 讨论 | 第42-45页 |
5.1 分子标记精细定位应注意的问题 | 第42页 |
5.1.1 准确判断表型 | 第42页 |
5.1.2 作图群体和基因定位方法的选择 | 第42页 |
5.1.3 分子标记数据收集和处理应注意的问题 | 第42页 |
5.2 序列多态性与分子标记的开发 | 第42-43页 |
5.3 玉米CMS 雄性不育育性恢复基因的定位及克隆 | 第43页 |
5.4 B73 与87-1 之间序列之间的差异 | 第43-44页 |
5.5 进一步的研究工作 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
ABSTRACT | 第52-53页 |