| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 引言 | 第9-18页 |
| 0.1 胆固醇 | 第9页 |
| 0.2 细胞凋亡 | 第9-10页 |
| 0.3 氧化应激 | 第10-11页 |
| 0.4 内质网应激及内质网应激与β胰岛细胞功能的关系 | 第11-12页 |
| 0.5 MIN6 细胞 | 第12-13页 |
| 0.6 SDS-PAGE 电泳 | 第13页 |
| 0.7 免疫印迹法 | 第13-14页 |
| 0.8 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ） | 第14-15页 |
| 0.9 TUNEL 的原理及应用 | 第15-16页 |
| 0.10 研究背景及意义 | 第16-18页 |
| 第1章 游离胆固醇施加对 MIN6 细胞的细胞毒性的研究 | 第18-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第18页 |
| 1.2 试剂盒 | 第18页 |
| 1.3 实验使用仪器 | 第18-19页 |
| 1.4 实验方法 | 第19-22页 |
| 1.4.1 MIN6 细胞体外传代培养及保种 | 第19-20页 |
| 1.4.2 anti-rabbit active caspase 3 免疫荧光 | 第20页 |
| 1.4.3 TUNEL 方法检测细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 1.4.4 小鼠胰岛素含量测定方法 | 第21页 |
| 1.4.5 胆固醇含量测定 | 第21-22页 |
| 1.5 结果与讨论 | 第22-26页 |
| 1.5.1 胆固醇施加诱导MIN6 细胞凋亡 | 第22-25页 |
| 1.5.2 胆固醇的去除阻止了胆固醇负荷诱导的MIN6 细胞的凋亡 | 第25-26页 |
| 1.6 结论 | 第26-28页 |
| 第2章 游离胆固醇对 MIN6 细胞毒性的细胞信号转导研究 | 第28-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.2 抗体 | 第28页 |
| 2.3 实验使用仪器 | 第28-29页 |
| 2.4 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.4.1 制作蛋白标准曲线及测量待测样品浓度 | 第29页 |
| 2.4.2 Western blot | 第29-31页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第31-34页 |
| 2.5.1 Western blot 方法检测SAPKs 的磷酸化水平 | 第31-32页 |
| 2.5.2 SAPK 抑制剂在挽救细胞免于胆固醇施加诱导的细胞凋亡产生的效应 | 第32-33页 |
| 2.5.3 内质网应激通路在胆固醇诱导的细胞凋亡未活化 | 第33页 |
| 2.5.4 胆固醇施加到MIN6 细胞后活化的和磷酸化的Akt(P-Akt)的变化 | 第33-34页 |
| 2.6 结论 | 第34-35页 |
| 第3章 游离胆固醇施加对 MIN6 细胞活性氧水平影响的研究 | 第35-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.2 实验使用仪器 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35页 |
| 3.3.1 DCFHDA 测定细胞内ROS | 第35页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第35-37页 |
| 3.5 结论 | 第37-38页 |
| 第4章 结果与展望 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第44-45页 |
