摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第14-30页 |
1.1 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)的制备方法 | 第15-16页 |
1.1.1 免疫胶体金的制备 | 第15页 |
1.1.2 免疫胶乳的制备 | 第15-16页 |
1.2 纳米免疫微球上蛋白质性质和结构的分析方法 | 第16-25页 |
1.2.1 紫外-可见吸光光谱法 | 第16-17页 |
1.2.2 动态光散射法 | 第17页 |
1.2.3 Zeta 电位法 | 第17-18页 |
1.2.4 傅立叶变换红外光谱法 | 第18-19页 |
1.2.5 拉曼光谱 | 第19-20页 |
1.2.6 荧光光谱法 | 第20-22页 |
1.2.7 圆二色谱法 | 第22-23页 |
1.2.8 差示量热扫描法 | 第23页 |
1.2.9 核磁共振法 | 第23-24页 |
1.2.10 X 射线晶体学 | 第24页 |
1.2.11 质谱法 | 第24-25页 |
1.3 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)的应用 | 第25-28页 |
1.3.1 斑点金免疫渗滤法 | 第25页 |
1.3.2 胶体金免疫层析法 | 第25-26页 |
1.3.3 电化学免疫分析法 | 第26页 |
1.3.4 胶乳增强免疫比浊法 | 第26-27页 |
1.3.5 胶乳免疫层析法 | 第27页 |
1.3.6 化学发光免疫分析法 | 第27-28页 |
1.3.7 时间分辨荧光免疫分析 | 第28页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
第二章 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)制备及稳定性分析 | 第30-54页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 实验材料及实验仪器 | 第30-31页 |
2.2.1 实验材料 | 第30-31页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第31页 |
2.3 实验方法 | 第31-36页 |
2.3.1 BCA 法测定蛋白质浓度 | 第31-32页 |
2.3.2 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)的制备 | 第32-33页 |
2.3.2.1 免疫胶体金的制备 | 第32-33页 |
2.3.2.2 免疫胶乳的制备 | 第33页 |
2.3.3 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)最佳标记条件的确定 | 第33-35页 |
2.3.3.1 胶体金最佳标记条件的确定 | 第33-34页 |
2.3.3.2 胶乳微球最佳标记条件的确定 | 第34-35页 |
2.3.4 紫外-可见吸收光谱测定 | 第35页 |
2.3.5 电镜分析 | 第35页 |
2.3.6 动态光散射分析 | 第35-36页 |
2.3.7 Zeta 电位分析 | 第36页 |
2.4 结果分析 | 第36-52页 |
2.4.1 BCA 法测定标准曲线 | 第36页 |
2.4.2 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)最佳标记条件的确定 | 第36-43页 |
2.4.2.1 胶体金最佳标记条件的确定 | 第36-39页 |
2.4.2.2 胶乳微球最佳标记条件的确定 | 第39-43页 |
2.4.3 紫外-可见吸收光谱分析 | 第43-45页 |
2.4.4 电镜分析 | 第45-48页 |
2.4.5 动态光散射分析 | 第48-50页 |
2.4.6 Zeta 电位分析 | 第50-52页 |
2.5 小结 | 第52-54页 |
第三章 微球与抗体蛋白的结合对蛋白质二级结构的影响 | 第54-74页 |
3.1 引言 | 第54-55页 |
3.2 实验材料及实验仪器 | 第55-56页 |
3.2.1 实验材料 | 第55页 |
3.2.2 实验仪器 | 第55-56页 |
3.3 实验方法 | 第56-57页 |
3.3.1 免疫微球(胶体金、胶乳)的制备 | 第56页 |
3.3.1.1 免疫胶体金的制备 | 第56页 |
3.3.1.2 免疫胶乳的制备 | 第56页 |
3.3.2 免疫微球(胶体金、胶乳)红外光谱分析 | 第56-57页 |
3.3.2.1 免疫胶体金 ATR-FTIR 光谱测定 | 第56页 |
3.3.2.2 免疫胶乳 FTIR 光谱测定 | 第56页 |
3.3.2.3 图谱分析方法 | 第56-57页 |
3.4 结果分析 | 第57-73页 |
3.4.1 免疫胶体金 ATR-FTIR 光谱测定 | 第57-63页 |
3.4.1.1 免疫胶体金红外光谱酰胺 I 带差谱分析 | 第57页 |
3.4.1.2 不同作用条件对免疫胶体金中蛋白质二级结构的影响 | 第57-63页 |
3.4.2 免疫胶乳红外光谱分析 | 第63-73页 |
3.4.2.1 共价偶联前后 FTIR 图谱分析 | 第63-65页 |
3.4.2.2 偶联条件对免疫胶乳中蛋白质二级结构的影响 | 第65-73页 |
3.5 小结 | 第73-74页 |
第四章 纳米微球与抗体蛋白相互作用的机理研究 | 第74-89页 |
4.1 引言 | 第74页 |
4.2 实验材料及实验仪器 | 第74-75页 |
4.2.1 实验材料 | 第74-75页 |
4.2.2 实验仪器 | 第75页 |
4.3 实验方法 | 第75-76页 |
4.3.1 免疫微球(胶体金、胶乳)的制备 | 第75-76页 |
4.3.1.1 免疫胶体金的制备 | 第75-76页 |
4.3.1.2 免疫胶乳的制备 | 第76页 |
4.3.2 内源荧光光谱测定 | 第76页 |
4.3.3 外源荧光光谱测定 | 第76页 |
4.3.4 表面疏水性指数(S0)测定 | 第76页 |
4.4 结果分析 | 第76-87页 |
4.4.1 免疫微球(胶体金、胶乳)内源荧光光谱分析 | 第76-84页 |
4.4.1.1 胶体金-抗体蛋白复合物的内源荧光光谱分析 | 第76-82页 |
4.4.1.2 免疫胶乳内源荧光光谱分析 | 第82-84页 |
4.4.2 免疫胶乳外源荧光光谱分析 | 第84-86页 |
4.4.3 表面疏水性指数(S0)分析 | 第86-87页 |
4.5 小结 | 第87-89页 |
第五章 免疫胶体金在免疫层析检测中的应用 | 第89-104页 |
5.1 引言 | 第89页 |
5.2 材料与方法 | 第89-93页 |
5.2.1 实验材料 | 第89-90页 |
5.2.2 实验仪器 | 第90页 |
5.2.3 胶体金标记物的纯化 | 第90页 |
5.2.4 免疫层析试纸条的设计与组成结构 | 第90-91页 |
5.2.5 免疫胶体金层析试纸条参数条件优化 | 第91-92页 |
5.2.6 胶体金免疫层析试纸条灵敏度的检测 | 第92-93页 |
5.2.7 胶体金免疫层析试纸条特异性的检测 | 第93页 |
5.2.8 胶体金浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第93页 |
5.3 结果分析 | 第93-103页 |
5.3.1 胶体金免疫层析试纸条工艺优化结果 | 第93-97页 |
5.3.2 胶体金浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性影响研究 | 第97-100页 |
5.3.2.1 不同胶体金浓度对灵敏度及特异性的影响 | 第97-98页 |
5.3.2.2 不同胶体金浓度下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性的关系 | 第98-100页 |
5.3.3 pH 值对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性影响研究 | 第100-103页 |
5.3.3.1 不同作用 pH 值对灵敏度及特异性的影响 | 第100-101页 |
5.3.3.2 不同 pH 值条件下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性的关系 | 第101-103页 |
5.4 小结 | 第103-104页 |
第六章 免疫胶乳在免疫层析检测中的应用 | 第104-118页 |
6.1 引言 | 第104页 |
6.2 实验材料与方法 | 第104-106页 |
6.2.1 实验材料 | 第104-105页 |
6.2.2 实验仪器 | 第105页 |
6.2.3 HCG 免疫胶乳检测试纸条的设计及制备方法 | 第105页 |
6.2.4 胶乳免疫层析试纸条灵敏度的检测 | 第105页 |
6.2.5 胶乳免疫层析试纸条特异性的检测 | 第105页 |
6.2.6 pH 值对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第105-106页 |
6.2.7 抗体蛋白浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第106页 |
6.2.8 胶乳浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第106页 |
6.3 结果分析 | 第106-116页 |
6.3.1 pH 值对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第106-109页 |
6.3.1.1 不同偶联 pH 值对灵敏度及特异性的影响 | 第106-107页 |
6.3.1.2 不同 pH 值条件下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性的关系 | 第107-109页 |
6.3.2 抗体蛋白浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第109-113页 |
6.3.2.1 不同抗体蛋白浓度对灵敏度及特异性的影响 | 第109-111页 |
6.3.2.2 不同抗体蛋白浓度下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性关系 | 第111-113页 |
6.3.3 胶乳浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究 | 第113-116页 |
6.3.3.1 不同胶乳浓度体系对灵敏度及特异性的影响 | 第113-114页 |
6.3.3.2 不同胶乳浓度下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性关系 | 第114-116页 |
6.4 小结 | 第116-118页 |
结论与展望 | 第118-121页 |
一、结论 | 第118-119页 |
二、本论文的主要创新点 | 第119-120页 |
三、展望 | 第120-121页 |
参考文献 | 第121-133页 |
附录 | 第133-135页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第135-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
答辩委员会对论文的评定意见 | 第138页 |