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纳米免疫微球的制备、表征及在免疫层析检测中的应用研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第14-30页
    1.1 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)的制备方法第15-16页
        1.1.1 免疫胶体金的制备第15页
        1.1.2 免疫胶乳的制备第15-16页
    1.2 纳米免疫微球上蛋白质性质和结构的分析方法第16-25页
        1.2.1 紫外-可见吸光光谱法第16-17页
        1.2.2 动态光散射法第17页
        1.2.3 Zeta 电位法第17-18页
        1.2.4 傅立叶变换红外光谱法第18-19页
        1.2.5 拉曼光谱第19-20页
        1.2.6 荧光光谱法第20-22页
        1.2.7 圆二色谱法第22-23页
        1.2.8 差示量热扫描法第23页
        1.2.9 核磁共振法第23-24页
        1.2.10 X 射线晶体学第24页
        1.2.11 质谱法第24-25页
    1.3 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)的应用第25-28页
        1.3.1 斑点金免疫渗滤法第25页
        1.3.2 胶体金免疫层析法第25-26页
        1.3.3 电化学免疫分析法第26页
        1.3.4 胶乳增强免疫比浊法第26-27页
        1.3.5 胶乳免疫层析法第27页
        1.3.6 化学发光免疫分析法第27-28页
        1.3.7 时间分辨荧光免疫分析第28页
    1.4 本研究的目的和意义第28-30页
第二章 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)制备及稳定性分析第30-54页
    2.1 引言第30页
    2.2 实验材料及实验仪器第30-31页
        2.2.1 实验材料第30-31页
        2.2.2 主要仪器设备第31页
    2.3 实验方法第31-36页
        2.3.1 BCA 法测定蛋白质浓度第31-32页
        2.3.2 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)的制备第32-33页
            2.3.2.1 免疫胶体金的制备第32-33页
            2.3.2.2 免疫胶乳的制备第33页
        2.3.3 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)最佳标记条件的确定第33-35页
            2.3.3.1 胶体金最佳标记条件的确定第33-34页
            2.3.3.2 胶乳微球最佳标记条件的确定第34-35页
        2.3.4 紫外-可见吸收光谱测定第35页
        2.3.5 电镜分析第35页
        2.3.6 动态光散射分析第35-36页
        2.3.7 Zeta 电位分析第36页
    2.4 结果分析第36-52页
        2.4.1 BCA 法测定标准曲线第36页
        2.4.2 纳米免疫微球(胶体金、胶乳)最佳标记条件的确定第36-43页
            2.4.2.1 胶体金最佳标记条件的确定第36-39页
            2.4.2.2 胶乳微球最佳标记条件的确定第39-43页
        2.4.3 紫外-可见吸收光谱分析第43-45页
        2.4.4 电镜分析第45-48页
        2.4.5 动态光散射分析第48-50页
        2.4.6 Zeta 电位分析第50-52页
    2.5 小结第52-54页
第三章 微球与抗体蛋白的结合对蛋白质二级结构的影响第54-74页
    3.1 引言第54-55页
    3.2 实验材料及实验仪器第55-56页
        3.2.1 实验材料第55页
        3.2.2 实验仪器第55-56页
    3.3 实验方法第56-57页
        3.3.1 免疫微球(胶体金、胶乳)的制备第56页
            3.3.1.1 免疫胶体金的制备第56页
            3.3.1.2 免疫胶乳的制备第56页
        3.3.2 免疫微球(胶体金、胶乳)红外光谱分析第56-57页
            3.3.2.1 免疫胶体金 ATR-FTIR 光谱测定第56页
            3.3.2.2 免疫胶乳 FTIR 光谱测定第56页
            3.3.2.3 图谱分析方法第56-57页
    3.4 结果分析第57-73页
        3.4.1 免疫胶体金 ATR-FTIR 光谱测定第57-63页
            3.4.1.1 免疫胶体金红外光谱酰胺 I 带差谱分析第57页
            3.4.1.2 不同作用条件对免疫胶体金中蛋白质二级结构的影响第57-63页
        3.4.2 免疫胶乳红外光谱分析第63-73页
            3.4.2.1 共价偶联前后 FTIR 图谱分析第63-65页
            3.4.2.2 偶联条件对免疫胶乳中蛋白质二级结构的影响第65-73页
    3.5 小结第73-74页
第四章 纳米微球与抗体蛋白相互作用的机理研究第74-89页
    4.1 引言第74页
    4.2 实验材料及实验仪器第74-75页
        4.2.1 实验材料第74-75页
        4.2.2 实验仪器第75页
    4.3 实验方法第75-76页
        4.3.1 免疫微球(胶体金、胶乳)的制备第75-76页
            4.3.1.1 免疫胶体金的制备第75-76页
            4.3.1.2 免疫胶乳的制备第76页
        4.3.2 内源荧光光谱测定第76页
        4.3.3 外源荧光光谱测定第76页
        4.3.4 表面疏水性指数(S0)测定第76页
    4.4 结果分析第76-87页
        4.4.1 免疫微球(胶体金、胶乳)内源荧光光谱分析第76-84页
            4.4.1.1 胶体金-抗体蛋白复合物的内源荧光光谱分析第76-82页
            4.4.1.2 免疫胶乳内源荧光光谱分析第82-84页
        4.4.2 免疫胶乳外源荧光光谱分析第84-86页
        4.4.3 表面疏水性指数(S0)分析第86-87页
    4.5 小结第87-89页
第五章 免疫胶体金在免疫层析检测中的应用第89-104页
    5.1 引言第89页
    5.2 材料与方法第89-93页
        5.2.1 实验材料第89-90页
        5.2.2 实验仪器第90页
        5.2.3 胶体金标记物的纯化第90页
        5.2.4 免疫层析试纸条的设计与组成结构第90-91页
        5.2.5 免疫胶体金层析试纸条参数条件优化第91-92页
        5.2.6 胶体金免疫层析试纸条灵敏度的检测第92-93页
        5.2.7 胶体金免疫层析试纸条特异性的检测第93页
        5.2.8 胶体金浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第93页
    5.3 结果分析第93-103页
        5.3.1 胶体金免疫层析试纸条工艺优化结果第93-97页
        5.3.2 胶体金浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性影响研究第97-100页
            5.3.2.1 不同胶体金浓度对灵敏度及特异性的影响第97-98页
            5.3.2.2 不同胶体金浓度下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性的关系第98-100页
        5.3.3 pH 值对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性影响研究第100-103页
            5.3.3.1 不同作用 pH 值对灵敏度及特异性的影响第100-101页
            5.3.3.2 不同 pH 值条件下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性的关系第101-103页
    5.4 小结第103-104页
第六章 免疫胶乳在免疫层析检测中的应用第104-118页
    6.1 引言第104页
    6.2 实验材料与方法第104-106页
        6.2.1 实验材料第104-105页
        6.2.2 实验仪器第105页
        6.2.3 HCG 免疫胶乳检测试纸条的设计及制备方法第105页
        6.2.4 胶乳免疫层析试纸条灵敏度的检测第105页
        6.2.5 胶乳免疫层析试纸条特异性的检测第105页
        6.2.6 pH 值对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第105-106页
        6.2.7 抗体蛋白浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第106页
        6.2.8 胶乳浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第106页
    6.3 结果分析第106-116页
        6.3.1 pH 值对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第106-109页
            6.3.1.1 不同偶联 pH 值对灵敏度及特异性的影响第106-107页
            6.3.1.2 不同 pH 值条件下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性的关系第107-109页
        6.3.2 抗体蛋白浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第109-113页
            6.3.2.1 不同抗体蛋白浓度对灵敏度及特异性的影响第109-111页
            6.3.2.2 不同抗体蛋白浓度下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性关系第111-113页
        6.3.3 胶乳浓度对蛋白结构及试纸条灵敏度、特异性的影响研究第113-116页
            6.3.3.1 不同胶乳浓度体系对灵敏度及特异性的影响第113-114页
            6.3.3.2 不同胶乳浓度下蛋白质的二级结构与灵敏度及特异性关系第114-116页
    6.4 小结第116-118页
结论与展望第118-121页
    一、结论第118-119页
    二、本论文的主要创新点第119-120页
    三、展望第120-121页
参考文献第121-133页
附录第133-135页
攻读博士学位期间取得的研究成果第135-137页
致谢第137-138页
答辩委员会对论文的评定意见第138页

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