摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-31页 |
1 生物柴油概述 | 第11-13页 |
2 微藻生产生物柴油 | 第13-25页 |
2.1 影响微藻生长和油脂产生的因素 | 第13-15页 |
2.3 微藻生物柴油的发展历程 | 第15-16页 |
2.4 微藻生物柴油的优势 | 第16-17页 |
2.5 微藻细胞中油脂合成途径 | 第17-20页 |
2.6 几个在油脂合成过程中的关键酶 | 第20-25页 |
2.6.1 乙酰辅酶 A 羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase) | 第20-23页 |
2.6.2 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 | 第23-25页 |
3 微藻的遗传改良及其在生物能源上的应用 | 第25-28页 |
3.1 诱变育种 | 第25-27页 |
3.1.1 物理诱变育种 | 第25-27页 |
3.1.2 化学诱变育种 | 第27页 |
3.2 原生质体融合 | 第27页 |
3.3 基因工程育种 | 第27-28页 |
4 衣藻在能源微藻研究中的应用 | 第28-30页 |
5 研究目的和内容 | 第30-31页 |
5.1 本论文的研究目的 | 第30页 |
5.2 本论文的研究内容 | 第30-31页 |
第二章 喹禾灵对紫外诱变衣藻高产油脂藻株的定向选育 | 第31-46页 |
1 材料 | 第31-33页 |
1.1 实验材料 | 第31-32页 |
1.2 培养基 | 第32页 |
1.3 试剂 | 第32页 |
1.4 仪器 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-37页 |
2.1 藻种的培养 | 第33页 |
2.2 细胞密度的测定 | 第33页 |
2.3 紫外线诱变辐射剂量的确定 | 第33-34页 |
2.4 有效喹禾灵浓度的选择 | 第34页 |
2.5 紫外线诱变与喹禾灵相结合对衣藻进行高油脂含量藻株的筛选 | 第34页 |
2.6 突变藻株的筛选 | 第34-35页 |
2.7 藻株油脂的尼罗红染色 | 第35页 |
2.8 莱茵衣藻生长速率的测定 | 第35-36页 |
2.8.1 正常培养条件下生长曲线的测定 | 第35-36页 |
2.8.2 限氮培养条件下生长曲线的测定 | 第36页 |
2.9 突变藻株在限氮培养条件下中性脂含量的测定 | 第36-37页 |
3 实验结果与分析 | 第37-44页 |
3.1 莱茵衣藻培养液 OD 值与细胞密度相关系数的确定 | 第37页 |
3.2 有效紫外线照射剂量的确定 | 第37-38页 |
3.3 有效喹禾灵筛选浓度的确定 | 第38-39页 |
3.4 莱茵衣藻的诱变及定向选育结果 | 第39-40页 |
3.5 根据生长速率对待测藻株的初筛 | 第40-41页 |
3.6 尼罗红染色对突变藻株进行复筛获得高油脂突变藻株 | 第41页 |
3.7 高油脂含量突变藻株的生长曲线比较 | 第41-42页 |
3.8 限氮培养条件对衣藻生长速率的影响 | 第42-43页 |
3.9 突变藻株在缺氮培养条件下的油脂含量 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
第三章 莱茵衣藻突变株油脂代谢关键酶基因的转录分析 | 第46-76页 |
1 实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选 | 第46-63页 |
1.1 材料 | 第46-47页 |
1.1.1 实验材料 | 第46-47页 |
1.1.2 试剂与仪器 | 第47页 |
1.2 方法 | 第47-52页 |
1.2.1 莱茵衣藻总 RNA 的提取 | 第47-48页 |
1.2.2 cDNA 第一链的合成 | 第48-49页 |
1.2.3 引物设计及 PCR 反应条件的优化 | 第49-50页 |
1.2.4 实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选 | 第50-51页 |
1.2.5 实验数据处理 | 第51-52页 |
1.3 结果与分析 | 第52-60页 |
1.3.1 莱茵衣藻总 RNA 提取 | 第52-53页 |
1.3.2 引物检测结果 | 第53页 |
1.3.3 检测合成的 cDNA | 第53-54页 |
1.3.4 实时荧光定量 PCR | 第54-60页 |
1.4 讨论 | 第60-63页 |
1.4.1 内参基因的选择及不稳定因素 | 第60-62页 |
1.4.2 莱茵衣藻突变株内参基因的分析 | 第62-63页 |
2 突变藻株油脂代谢相关基因的表达分析 | 第63-76页 |
2.1 材料 | 第63页 |
2.1.1 实验材料 | 第63页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第63页 |
2.2 方法 | 第63-64页 |
2.2.1 引物设计及 PCR 反应条件的优化 | 第63-64页 |
2.2.2 目的基因实时荧光定量 PCR | 第64页 |
2.3 结果与分析 | 第64-72页 |
2.3.1 引物的检测结果 | 第64-65页 |
2.3.2 目的基因 ACC 实时荧光定量 PCR | 第65-66页 |
2.3.3 目的基因 PEPC2 实时荧光定量 PCR | 第66-67页 |
2.3.4 目的基因 LACS 实时荧光定量 PCR | 第67-68页 |
2.3.5 目的基因 DGAT1 基因实时荧光定量 PCR | 第68-69页 |
2.3.6 目的基因 DGTT1 基因实时荧光定量 PCR | 第69-70页 |
2.3.7 目的基因 DGTT2 实时荧光定量 PCR | 第70-71页 |
2.3.8 目的基因 DGTT3 实时荧光定量 PCR | 第71-72页 |
2.3.9 目的基因 DGTT4 实时荧光定量 PCR | 第72页 |
2.4 讨论 | 第72-76页 |
第四章 总结与展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
个人简历 | 第87-88页 |