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莱茵衣藻高产油脂藻株的诱变筛选及其油脂代谢关键酶基因的转录分析

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第11-31页
    1 生物柴油概述第11-13页
    2 微藻生产生物柴油第13-25页
        2.1 影响微藻生长和油脂产生的因素第13-15页
        2.3 微藻生物柴油的发展历程第15-16页
        2.4 微藻生物柴油的优势第16-17页
        2.5 微藻细胞中油脂合成途径第17-20页
        2.6 几个在油脂合成过程中的关键酶第20-25页
            2.6.1 乙酰辅酶 A 羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)第20-23页
            2.6.2 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶第23-25页
    3 微藻的遗传改良及其在生物能源上的应用第25-28页
        3.1 诱变育种第25-27页
            3.1.1 物理诱变育种第25-27页
            3.1.2 化学诱变育种第27页
        3.2 原生质体融合第27页
        3.3 基因工程育种第27-28页
    4 衣藻在能源微藻研究中的应用第28-30页
    5 研究目的和内容第30-31页
        5.1 本论文的研究目的第30页
        5.2 本论文的研究内容第30-31页
第二章 喹禾灵对紫外诱变衣藻高产油脂藻株的定向选育第31-46页
    1 材料第31-33页
        1.1 实验材料第31-32页
        1.2 培养基第32页
        1.3 试剂第32页
        1.4 仪器第32-33页
    2 方法第33-37页
        2.1 藻种的培养第33页
        2.2 细胞密度的测定第33页
        2.3 紫外线诱变辐射剂量的确定第33-34页
        2.4 有效喹禾灵浓度的选择第34页
        2.5 紫外线诱变与喹禾灵相结合对衣藻进行高油脂含量藻株的筛选第34页
        2.6 突变藻株的筛选第34-35页
        2.7 藻株油脂的尼罗红染色第35页
        2.8 莱茵衣藻生长速率的测定第35-36页
            2.8.1 正常培养条件下生长曲线的测定第35-36页
            2.8.2 限氮培养条件下生长曲线的测定第36页
        2.9 突变藻株在限氮培养条件下中性脂含量的测定第36-37页
    3 实验结果与分析第37-44页
        3.1 莱茵衣藻培养液 OD 值与细胞密度相关系数的确定第37页
        3.2 有效紫外线照射剂量的确定第37-38页
        3.3 有效喹禾灵筛选浓度的确定第38-39页
        3.4 莱茵衣藻的诱变及定向选育结果第39-40页
        3.5 根据生长速率对待测藻株的初筛第40-41页
        3.6 尼罗红染色对突变藻株进行复筛获得高油脂突变藻株第41页
        3.7 高油脂含量突变藻株的生长曲线比较第41-42页
        3.8 限氮培养条件对衣藻生长速率的影响第42-43页
        3.9 突变藻株在缺氮培养条件下的油脂含量第43-44页
    4 讨论第44-46页
第三章 莱茵衣藻突变株油脂代谢关键酶基因的转录分析第46-76页
    1 实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选第46-63页
        1.1 材料第46-47页
            1.1.1 实验材料第46-47页
            1.1.2 试剂与仪器第47页
        1.2 方法第47-52页
            1.2.1 莱茵衣藻总 RNA 的提取第47-48页
            1.2.2 cDNA 第一链的合成第48-49页
            1.2.3 引物设计及 PCR 反应条件的优化第49-50页
            1.2.4 实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选第50-51页
            1.2.5 实验数据处理第51-52页
        1.3 结果与分析第52-60页
            1.3.1 莱茵衣藻总 RNA 提取第52-53页
            1.3.2 引物检测结果第53页
            1.3.3 检测合成的 cDNA第53-54页
            1.3.4 实时荧光定量 PCR第54-60页
        1.4 讨论第60-63页
            1.4.1 内参基因的选择及不稳定因素第60-62页
            1.4.2 莱茵衣藻突变株内参基因的分析第62-63页
    2 突变藻株油脂代谢相关基因的表达分析第63-76页
        2.1 材料第63页
            2.1.1 实验材料第63页
            2.1.2 试剂与仪器第63页
        2.2 方法第63-64页
            2.2.1 引物设计及 PCR 反应条件的优化第63-64页
            2.2.2 目的基因实时荧光定量 PCR第64页
        2.3 结果与分析第64-72页
            2.3.1 引物的检测结果第64-65页
            2.3.2 目的基因 ACC 实时荧光定量 PCR第65-66页
            2.3.3 目的基因 PEPC2 实时荧光定量 PCR第66-67页
            2.3.4 目的基因 LACS 实时荧光定量 PCR第67-68页
            2.3.5 目的基因 DGAT1 基因实时荧光定量 PCR第68-69页
            2.3.6 目的基因 DGTT1 基因实时荧光定量 PCR第69-70页
            2.3.7 目的基因 DGTT2 实时荧光定量 PCR第70-71页
            2.3.8 目的基因 DGTT3 实时荧光定量 PCR第71-72页
            2.3.9 目的基因 DGTT4 实时荧光定量 PCR第72页
        2.4 讨论第72-76页
第四章 总结与展望第76-77页
参考文献第77-86页
致谢第86-87页
个人简历第87-88页

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