| 英文缩略词表 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-15页 |
| 英文摘要 | 第15-20页 |
| 1 前言 | 第21-25页 |
| 2 实验材料 | 第25-31页 |
| 2.1 DLBCL患者病理组织标本和外周血样本 | 第25页 |
| 2.1.1 DLBCL患者病理组织标本 | 第25页 |
| 2.1.2 DLBCL患者外周血样本 | 第25页 |
| 2.2 淋巴瘤的Ann Arbor分期和IPI评分 | 第25-26页 |
| 2.2.1 淋巴瘤的Ann Arbor分期 | 第25-26页 |
| 2.2.2 淋巴瘤的IPI评分 | 第26页 |
| 2.3 细胞株 | 第26-27页 |
| 2.4 试剂 | 第27-28页 |
| 2.5 主要溶液的配制 | 第28-29页 |
| 2.6 仪器与设备 | 第29-31页 |
| 3 实验方法 | 第31-43页 |
| 3.1 淋巴结病理组织切片 | 第31页 |
| 3.2 HE染色 | 第31页 |
| 3.3 IHC染色(SP二步法) | 第31-32页 |
| 3.4 Ficoll密度梯度离心法分离人外周血PBMCs并纯化 | 第32-33页 |
| 3.4.1 外周血PBMCs分离方法 | 第32-33页 |
| 3.4.2 PBMCs细胞计数及活性检测 | 第33页 |
| 3.5 FCM检测人外周血PBMCs上IgD和IgDR的表达 | 第33-34页 |
| 3.5.1 FCM检测人外周血PBMCs上IgD的表达 | 第33页 |
| 3.5.2 IgD蛋白的生物素标记 | 第33-34页 |
| 3.5.3 FCM检测人外周血PBMCs上IgDR的表达 | 第34页 |
| 3.6 ELISA法检测人血清中IgD的表达 | 第34-35页 |
| 3.7 Daudi、MEC-2和REC-1细胞培养 | 第35页 |
| 3.8 CCK-8法检测Daudi、MEC-2和REC-1细胞活力 | 第35页 |
| 3.9 细胞计数法绘制Daudi细胞生长曲线 | 第35-36页 |
| 3.10 FCM检测Daudi细胞表面CD19、IgM、IgD、IgDR表达 | 第36页 |
| 3.10.1 FCM检测Daudi细胞表面CD19、IgM、IgD表达 | 第36页 |
| 3.10.2 FCM检测Daudi细胞表面IgDR表达 | 第36页 |
| 3.11 FCM检测Daudi细胞凋亡 | 第36页 |
| 3.12 FCM检测Daudi细胞周期 | 第36-37页 |
| 3.13 QRT-PCR法检测Daudi细胞c-myc、cyclin D3、CDK6和p16~(INK4a)mRNA的表达 | 第37-39页 |
| 3.13.1 总RNA的提取 | 第37页 |
| 3.13.2 RNA逆转录为cDNA | 第37-38页 |
| 3.13.3 人c-myc、cyclin D3、CDK6和p16~(INK4a)mRNA的引物 | 第38页 |
| 3.13.4 QRT-PCR法检测Daudi细胞c-myc、cyclin D3、CDK6和p16~(INK4a)mRNA的水平 | 第38-39页 |
| 3.14 Western blot法检测Daudi细胞c-myc、cyclin D3、CDK6、p16~(INK4a)、70kD蛋白、Lyn和p-Lyn蛋白表达 | 第39-42页 |
| 3.14.1 Daudi细胞蛋白质的提取 | 第39页 |
| 3.14.2 蛋白质样本的定量(Lowry法) | 第39-40页 |
| 3.14.3 Western blot的操作步骤 | 第40-42页 |
| 3.15 统计学分析 | 第42-43页 |
| 4 实验结果 | 第43-62页 |
| 4.1 IgD及IgDR在DLBCL患者和反应性增生淋巴结中的表达及与临床病理特征的关系 | 第43-51页 |
| 4.1.1 IgD及IgDR在DLBCL患者和反应性增生淋巴结中的表达 | 第43-47页 |
| 4.1.2 DLBCL患者淋巴结中IgD的表达和临床病理参数的关系 | 第47-49页 |
| 4.1.3 DLBCL患者淋巴结中IgDR的表达和临床病理参数的关系 | 第49-51页 |
| 4.2 IgD和IgDR在DLBCL患者和健康志愿者PBMCs的表达 | 第51-52页 |
| 4.3 IgD在DLBCL患者和健康志愿者血清中的表达及与临床病理参数的关系 | 第52-54页 |
| 4.3.1 IgD在DLBCL患者和健康志愿者血清中的表达 | 第52-53页 |
| 4.3.2 IgD在DLBCL患者血清中的表达与血清β_2-MG、LDH、IPI的相关性分析 | 第53-54页 |
| 4.4 hIgD对Daudi、MEC-2、REC-1细胞活力和增殖的影响 | 第54-56页 |
| 4.4.1 hIgD对Daudi细胞活力和增殖的影响 | 第54-55页 |
| 4.4.2 hIgD对MEC-2细胞活力和增殖的影响 | 第55页 |
| 4.4.3 hIgD对REC-1细胞活力和增殖的影响 | 第55-56页 |
| 4.5 hIgD对Daudi细胞生长曲线的影响 | 第56页 |
| 4.6 Daudi细胞表面CD19、IgD、IgM的表达及hIgD对Daudi细胞IgDR的影响 | 第56-58页 |
| 4.6.1 Daudi细胞表面CD19、IgD、IgM的表达 | 第56-57页 |
| 4.6.2 hIgD对Daudi细胞表面IgDR的影响 | 第57-58页 |
| 4.7 hIgD对Daudi细胞凋亡的影响 | 第58页 |
| 4.8 hIgD对Daudi细胞周期的影响 | 第58-59页 |
| 4.9 hIgD对c-myc、cyclinD3、CDK6和p16~(INK4a)的影响 | 第59-61页 |
| 4.9.1 hIgD对c-myc、cyclinD3、CDK6和p16~(INK4a)mRNA的影响 | 第59-60页 |
| 4.9.2 hIgD对c-myc、cyclinD3、CDK6和p16~(INK4a)蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
| 4.10 hIgD对Daudi细胞70kD蛋白酪氨酸磷酸化、p-Lyn和Lyn蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
| 5 讨论 | 第62-68页 |
| 5.1 IgD和IgDR参与了DLBCL的病变过程 | 第62-64页 |
| 5.2 hIgD加速Daudi细胞G1/S转换,加快细胞周期进程,促进细胞增殖 | 第64-66页 |
| 5.3 hIgD诱导IgDR的表达,启动酪氨酸磷酸化途径是促进Daudi细胞增殖的重要机制 | 第66-68页 |
| 6 结论 | 第68-69页 |
| 7 实验中不足之处及下一步工作设想 | 第69-70页 |
| 8 参考文献 | 第70-80页 |
| 附录 | 第80-83页 |
| 致谢 | 第83-86页 |
| 综述 B细胞受体信号及其靶向抑制剂在恶性淋巴瘤中的作用 | 第86-98页 |
| 参考文献 | 第92-98页 |
