内容摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第15-45页 |
1.1 基因转染及常用表面修饰策略 | 第15-32页 |
1.1.1 基因转染 | 第15-16页 |
1.1.2 基因转染载体 | 第16-17页 |
1.1.3 树形高分子基因转染载体 | 第17-21页 |
1.1.4 功能化修饰提高树形高分子的基因转染效率 | 第21-32页 |
1.2 氟及含氟化合物 | 第32-42页 |
1.2.1 氟的发现及性质 | 第32-33页 |
1.2.2 含氟高分子 | 第33-36页 |
1.2.3 含氟化合物在基因转染中的应用 | 第36-38页 |
1.2.4 提出以氟化修饰方法增强高分子载体的基因转染效率 | 第38-42页 |
1.3 论文研究思路和研究内容 | 第42-45页 |
第二章 设计和制备含氟脂肪链修饰的树形高分子作为高效、安全的基因转染载体 | 第45-83页 |
2.1 引言 | 第45-46页 |
2.2 实验材料和实验方法 | 第46-54页 |
2.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
2.2.2 氟化修饰的树形高分子或其他阳离子高分子载体的制备 | 第47-48页 |
2.2.3 材料表征 | 第48-49页 |
2.2.4 核酸复合物的制备 | 第49-50页 |
2.2.5 细胞培养 | 第50页 |
2.2.6 基因转染及其基因转染效率检测 | 第50-51页 |
2.2.7 基因转染的血清抗性 | 第51页 |
2.2.8 粒径和表面电势分析 | 第51页 |
2.2.9 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第51-52页 |
2.2.10 细胞摄入实验 | 第52-53页 |
2.2.11 内涵体逃逸能力和机制 | 第53页 |
2.2.12 以共聚焦显微镜观察核酸复合物的细胞摄入以及内涵体逃逸 | 第53页 |
2.2.13 细胞毒性实验 | 第53-54页 |
2.3 结果与分析 | 第54-80页 |
2.3.1 含氟脂肪链修饰的G5 PAMAM的合成与表征 | 第54-57页 |
2.3.2 含氟脂肪链修饰的树形高分子可以显著提高基因转染效率 | 第57页 |
2.3.3 含氟脂肪链修饰的树形高分子具有高效的基因转染效果 | 第57-61页 |
2.3.4 含氟脂肪链修饰的树形高分子与其他基因载体转染效率的比较 | 第61-62页 |
2.3.5 含氟脂肪链修饰的G5 PAMAM在转染条件下的毒性评估 | 第62-63页 |
2.3.6 含氟脂肪链修饰在基因转染中的重要性 | 第63-66页 |
2.3.7 含氟脂肪链修饰的树形高分子与DNA形成核酸复合物的表征 | 第66-69页 |
2.3.8 含氟脂肪链修饰的树形高分子与核酸复合物的细胞摄入分析 | 第69-71页 |
2.3.9 含氟脂肪链修饰的树形高分子与核酸复合物的内涵体逃逸分析 | 第71-73页 |
2.3.10 含氟脂肪链修饰的树形高分子在基因转染过程中血清抗性的分析 | 第73-74页 |
2.3.11 含氟脂肪链修饰的树形高分子稳定性分析 | 第74-77页 |
2.3.12 七氟丁基修饰的其他阳离子高分子的表征 | 第77-78页 |
2.3.13 七氟丁基修饰的其他树形高分子的基因转染分析 | 第78-80页 |
2.4 本章小结 | 第80-83页 |
第三章 系统研究含氟脂肪链修饰的树形高分子的基因转染效果 | 第83-99页 |
3.1 引言 | 第83-84页 |
3.2 实验材料和实验方法 | 第84-88页 |
3.2.1 实验材料 | 第84页 |
3.2.2 含氟脂肪链修饰的阳离子高分子载体合成 | 第84-85页 |
3.2.3 含氟脂肪链修饰的阳离子高分子载体的表征 | 第85页 |
3.2.4 核酸复合物的制备和表征 | 第85-86页 |
3.2.5 细胞培养 | 第86页 |
3.2.6 基因转染及其基因转染效率检测 | 第86-87页 |
3.2.7 含氟脂肪链修饰的树形高分子的细胞摄入分析 | 第87页 |
3.2.8 氟化修饰的树形高分子细胞毒性分析 | 第87-88页 |
3.3 结果与分析 | 第88-97页 |
3.3.1 七氟丁基修饰的树形高分子的合成与表征 | 第88-89页 |
3.3.2 七氟丁基修饰的树形高分子基因转染效果筛选 | 第89-92页 |
3.3.3 七氟丁基修饰的不同代数的树形高分子的基因转染效果比较 | 第92-94页 |
3.3.4 七氟丁基修饰的树形高分子的核酸复合物的表征 | 第94页 |
3.3.5 七氟丁基修饰的树形高分子的基因复合物的细胞摄入分析 | 第94-96页 |
3.3.6 七氟丁基修饰的树形高分子在低DNA剂量下实现高效基因转染 | 第96-97页 |
3.3.7 七氟丁基修饰的树形高分子基因载体的细胞毒性分析 | 第97页 |
3.4 本章小结 | 第97-99页 |
第四章 含氟脂肪链修饰的树形高分子作为siRNA基因载体的应用 | 第99-113页 |
4.1 引言 | 第99-100页 |
4.2 实验材料和实验方法 | 第100-103页 |
4.2.1 实验材料 | 第100页 |
4.2.2 材料合成和表征 | 第100-101页 |
4.2.3 核酸复合物的制备和表征 | 第101页 |
4.2.4 细胞培养 | 第101-102页 |
4.2.5 基因转染及其基因转染效率检测 | 第102页 |
4.2.6 含氟脂肪链修饰的树形高分子的细胞摄入分析 | 第102-103页 |
4.3 结果分析 | 第103-111页 |
4.3.1 七氟丁基修饰的树形高分子的合成与表征 | 第103页 |
4.3.2 七氟丁基修饰的树形高分子基因转染效果筛选 | 第103-106页 |
4.3.3 不同代数的七氟丁基修饰的树形高分子的基因转染效果比较 | 第106-107页 |
4.3.4 七氟丁基修饰的树形高分子的基因复合物表征 | 第107-109页 |
4.3.5 七氟丁基修饰的树形高分子的基因复合物的细胞摄入分析 | 第109-110页 |
4.3.6 七氟丁基修饰的树形高分子在极低的核酸剂量下实现高效的基因转染 | 第110-111页 |
4.4 本章小结 | 第111-113页 |
第五章 设计和制备含氟芳香环修饰的树形高分子作为高效、安全的基因转染载体 | 第113-139页 |
5.1 引言 | 第113-114页 |
5.2 实验材料和实验方法 | 第114-120页 |
5.2.1 实验材料 | 第114页 |
5.2.2 设计和制备含氟苯环以及苯甲酸、4-甲基苯甲酸修饰的树形高分子 | 第114-115页 |
5.2.3 含氟苯环以及苯甲酸、4-甲基苯甲酸修饰的树形高分子的表征 | 第115页 |
5.2.4 核酸复合物的制备 | 第115页 |
5.2.5 核酸复合物的表征 | 第115-116页 |
5.2.6 检测DNA与含氟苯环修饰的树形高分子的结合强度 | 第116页 |
5.2.7 细胞培养 | 第116页 |
5.2.8 含氟苯环修饰的树形高分子的基因转染及其效率检测 | 第116-118页 |
5.2.9 含氟苯环修饰的树形高分子的细胞毒性分析 | 第118页 |
5.2.10 溶血性分析 | 第118页 |
5.2.11 细胞摄入分析 | 第118-119页 |
5.2.12 以激光共聚焦显微镜观察核酸复合物的细胞摄入和内涵体逃逸 | 第119-120页 |
5.3 结果与分析 | 第120-136页 |
5.3.1 氟化苯环修饰的树形高分子的制备与表征 | 第120-122页 |
5.3.2 含氟苯环修饰的树形高分子的基因转染效率 | 第122-127页 |
5.3.3 氟化修饰在基因转染中的重要性 | 第127-129页 |
5.3.4 含氟苯环修饰的树形高分子与商业化试剂的比较 | 第129-130页 |
5.3.5 含氟苯环修饰的树形高分子的细胞毒性分析 | 第130-132页 |
5.3.6 含氟苯环修饰的树形高分子与DNA的核酸复合物的表征 | 第132-134页 |
5.3.7 含氟苯环修饰的树形高分子与DNA核酸复合物的的细胞摄入分析 | 第134-135页 |
5.3.8 含氟苯环修饰的树形高分子的基因转染机制分析 | 第135-136页 |
5.4 本章小结 | 第136-139页 |
第六章 结论与展望 | 第139-141页 |
参考文献 | 第141-165页 |
致谢 | 第165-167页 |
硕博连读期间发表的科研论文及申请的专利 | 第167-169页 |