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氟化修饰方法--制备高效、低毒的高分子基因载体

内容摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 绪论第15-45页
    1.1 基因转染及常用表面修饰策略第15-32页
        1.1.1 基因转染第15-16页
        1.1.2 基因转染载体第16-17页
        1.1.3 树形高分子基因转染载体第17-21页
        1.1.4 功能化修饰提高树形高分子的基因转染效率第21-32页
    1.2 氟及含氟化合物第32-42页
        1.2.1 氟的发现及性质第32-33页
        1.2.2 含氟高分子第33-36页
        1.2.3 含氟化合物在基因转染中的应用第36-38页
        1.2.4 提出以氟化修饰方法增强高分子载体的基因转染效率第38-42页
    1.3 论文研究思路和研究内容第42-45页
第二章 设计和制备含氟脂肪链修饰的树形高分子作为高效、安全的基因转染载体第45-83页
    2.1 引言第45-46页
    2.2 实验材料和实验方法第46-54页
        2.2.1 实验材料第46-47页
        2.2.2 氟化修饰的树形高分子或其他阳离子高分子载体的制备第47-48页
        2.2.3 材料表征第48-49页
        2.2.4 核酸复合物的制备第49-50页
        2.2.5 细胞培养第50页
        2.2.6 基因转染及其基因转染效率检测第50-51页
        2.2.7 基因转染的血清抗性第51页
        2.2.8 粒径和表面电势分析第51页
        2.2.9 琼脂糖凝胶电泳分析第51-52页
        2.2.10 细胞摄入实验第52-53页
        2.2.11 内涵体逃逸能力和机制第53页
        2.2.12 以共聚焦显微镜观察核酸复合物的细胞摄入以及内涵体逃逸第53页
        2.2.13 细胞毒性实验第53-54页
    2.3 结果与分析第54-80页
        2.3.1 含氟脂肪链修饰的G5 PAMAM的合成与表征第54-57页
        2.3.2 含氟脂肪链修饰的树形高分子可以显著提高基因转染效率第57页
        2.3.3 含氟脂肪链修饰的树形高分子具有高效的基因转染效果第57-61页
        2.3.4 含氟脂肪链修饰的树形高分子与其他基因载体转染效率的比较第61-62页
        2.3.5 含氟脂肪链修饰的G5 PAMAM在转染条件下的毒性评估第62-63页
        2.3.6 含氟脂肪链修饰在基因转染中的重要性第63-66页
        2.3.7 含氟脂肪链修饰的树形高分子与DNA形成核酸复合物的表征第66-69页
        2.3.8 含氟脂肪链修饰的树形高分子与核酸复合物的细胞摄入分析第69-71页
        2.3.9 含氟脂肪链修饰的树形高分子与核酸复合物的内涵体逃逸分析第71-73页
        2.3.10 含氟脂肪链修饰的树形高分子在基因转染过程中血清抗性的分析第73-74页
        2.3.11 含氟脂肪链修饰的树形高分子稳定性分析第74-77页
        2.3.12 七氟丁基修饰的其他阳离子高分子的表征第77-78页
        2.3.13 七氟丁基修饰的其他树形高分子的基因转染分析第78-80页
    2.4 本章小结第80-83页
第三章 系统研究含氟脂肪链修饰的树形高分子的基因转染效果第83-99页
    3.1 引言第83-84页
    3.2 实验材料和实验方法第84-88页
        3.2.1 实验材料第84页
        3.2.2 含氟脂肪链修饰的阳离子高分子载体合成第84-85页
        3.2.3 含氟脂肪链修饰的阳离子高分子载体的表征第85页
        3.2.4 核酸复合物的制备和表征第85-86页
        3.2.5 细胞培养第86页
        3.2.6 基因转染及其基因转染效率检测第86-87页
        3.2.7 含氟脂肪链修饰的树形高分子的细胞摄入分析第87页
        3.2.8 氟化修饰的树形高分子细胞毒性分析第87-88页
    3.3 结果与分析第88-97页
        3.3.1 七氟丁基修饰的树形高分子的合成与表征第88-89页
        3.3.2 七氟丁基修饰的树形高分子基因转染效果筛选第89-92页
        3.3.3 七氟丁基修饰的不同代数的树形高分子的基因转染效果比较第92-94页
        3.3.4 七氟丁基修饰的树形高分子的核酸复合物的表征第94页
        3.3.5 七氟丁基修饰的树形高分子的基因复合物的细胞摄入分析第94-96页
        3.3.6 七氟丁基修饰的树形高分子在低DNA剂量下实现高效基因转染第96-97页
        3.3.7 七氟丁基修饰的树形高分子基因载体的细胞毒性分析第97页
    3.4 本章小结第97-99页
第四章 含氟脂肪链修饰的树形高分子作为siRNA基因载体的应用第99-113页
    4.1 引言第99-100页
    4.2 实验材料和实验方法第100-103页
        4.2.1 实验材料第100页
        4.2.2 材料合成和表征第100-101页
        4.2.3 核酸复合物的制备和表征第101页
        4.2.4 细胞培养第101-102页
        4.2.5 基因转染及其基因转染效率检测第102页
        4.2.6 含氟脂肪链修饰的树形高分子的细胞摄入分析第102-103页
    4.3 结果分析第103-111页
        4.3.1 七氟丁基修饰的树形高分子的合成与表征第103页
        4.3.2 七氟丁基修饰的树形高分子基因转染效果筛选第103-106页
        4.3.3 不同代数的七氟丁基修饰的树形高分子的基因转染效果比较第106-107页
        4.3.4 七氟丁基修饰的树形高分子的基因复合物表征第107-109页
        4.3.5 七氟丁基修饰的树形高分子的基因复合物的细胞摄入分析第109-110页
        4.3.6 七氟丁基修饰的树形高分子在极低的核酸剂量下实现高效的基因转染第110-111页
    4.4 本章小结第111-113页
第五章 设计和制备含氟芳香环修饰的树形高分子作为高效、安全的基因转染载体第113-139页
    5.1 引言第113-114页
    5.2 实验材料和实验方法第114-120页
        5.2.1 实验材料第114页
        5.2.2 设计和制备含氟苯环以及苯甲酸、4-甲基苯甲酸修饰的树形高分子第114-115页
        5.2.3 含氟苯环以及苯甲酸、4-甲基苯甲酸修饰的树形高分子的表征第115页
        5.2.4 核酸复合物的制备第115页
        5.2.5 核酸复合物的表征第115-116页
        5.2.6 检测DNA与含氟苯环修饰的树形高分子的结合强度第116页
        5.2.7 细胞培养第116页
        5.2.8 含氟苯环修饰的树形高分子的基因转染及其效率检测第116-118页
        5.2.9 含氟苯环修饰的树形高分子的细胞毒性分析第118页
        5.2.10 溶血性分析第118页
        5.2.11 细胞摄入分析第118-119页
        5.2.12 以激光共聚焦显微镜观察核酸复合物的细胞摄入和内涵体逃逸第119-120页
    5.3 结果与分析第120-136页
        5.3.1 氟化苯环修饰的树形高分子的制备与表征第120-122页
        5.3.2 含氟苯环修饰的树形高分子的基因转染效率第122-127页
        5.3.3 氟化修饰在基因转染中的重要性第127-129页
        5.3.4 含氟苯环修饰的树形高分子与商业化试剂的比较第129-130页
        5.3.5 含氟苯环修饰的树形高分子的细胞毒性分析第130-132页
        5.3.6 含氟苯环修饰的树形高分子与DNA的核酸复合物的表征第132-134页
        5.3.7 含氟苯环修饰的树形高分子与DNA核酸复合物的的细胞摄入分析第134-135页
        5.3.8 含氟苯环修饰的树形高分子的基因转染机制分析第135-136页
    5.4 本章小结第136-139页
第六章 结论与展望第139-141页
参考文献第141-165页
致谢第165-167页
硕博连读期间发表的科研论文及申请的专利第167-169页

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