摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第11-33页 |
1.1 胆碱酯酶综述 | 第11页 |
1.2 乙酰胆碱酯酶研究进展 | 第11-17页 |
1.2.1 乙酰胆碱酯酶的分子形式 | 第11-12页 |
1.2.2 乙酰胆碱酯酶的结构 | 第12-16页 |
1.2.3 乙酰胆碱酯酶的生理功能 | 第16-17页 |
1.3 乙酰胆碱酯酶基因类型分析 | 第17-26页 |
1.3.1 昆虫中的乙酰胆碱酯酶 | 第17-18页 |
1.3.2 线虫中的乙酰胆碱酯酶 | 第18-19页 |
1.3.3 蛛形纲中的乙酰胆碱酯酶 | 第19-21页 |
1.3.4 不同种类AChE的催化重要性分析 | 第21-26页 |
1.4 RNAi以及在昆虫上的应用 | 第26-30页 |
1.4.1 RNAi的作用机制 | 第26-28页 |
1.4.2 昆虫RNAi导入方法 | 第28-29页 |
1.4.3 RNAi在昆虫中的应用 | 第29-30页 |
1.5 研究目的与意义 | 第30-33页 |
第二章 利用RNAi验证拟环纹豹蛛AChE1、AChE2功能 | 第33-43页 |
2.1 材料与方法 | 第33-36页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第33页 |
2.1.2 主要试剂 | 第33页 |
2.1.3 生物测定杀虫剂对蜘蛛的毒性 | 第33-34页 |
2.1.4 dsRNA合成制备 | 第34页 |
2.1.5 dsRNA注射 | 第34-35页 |
2.1.6 实时荧光定量PCR反应 | 第35页 |
2.1.7 实时荧光定量PCR扩增效率验证 | 第35-36页 |
2.1.8 基因的mRNA表达量的比较 | 第36页 |
2.1.9 统计分析 | 第36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-40页 |
2.2.1 拟环纹豹蛛RNAi显微注射方法的确定 | 第36-38页 |
2.2.2 RNAi后拟环纹豹蛛杀虫剂敏感性测定 | 第38-40页 |
2.3 讨论 | 第40-43页 |
第三章 拟环纹豹蛛4个新乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析 | 第43-63页 |
3.1 材料与方法 | 第43-48页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第43页 |
3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
3.1.3 总RNA提取以及cDNA模板合成 | 第43-44页 |
3.1.4 拟环纹豹蛛4个新AChE基因克隆 | 第44-48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-61页 |
3.2.1 拟环纹豹蛛4个新乙酰胆碱酯酶基因全长克隆以及序列分析 | 第48-57页 |
3.2.2 与拟环纹豹蛛AChE1、2以及昆虫AChE的序列对比 | 第57-58页 |
3.2.3 拟环纹豹蛛AChE同源性分析 | 第58-60页 |
3.2.4 拟环纹豹蛛AChE与昆虫在重要位点的差异 | 第60-61页 |
3.3 讨论 | 第61-63页 |
全文总结 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录Ⅰ 攻读学位期间发表的论文 | 第73-74页 |
附录Ⅱ 攻读学位期间获得的奖励 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |