| 摘要 | 第5-6页 |
| Abatract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 植物转基因研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 植物转基因技术的原理和方法 | 第12-13页 |
| 1.1.2 双价及多价抗虫基因的研究 | 第13页 |
| 1.1.3 植物转基因技术的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 转抗虫基因在甘蓝类蔬菜上的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 转基因植株的筛选与检测技术 | 第15-16页 |
| 1.3.1 转基因植株的筛选 | 第15页 |
| 1.3.2 转基因植株的检测 | 第15-16页 |
| 1.4 转基因植物花粉对非靶标昆虫意大利蜜蜂影响的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第17-18页 |
| 1.5.1 目的意义 | 第17页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 双价载体的构建 | 第18-22页 |
| 2.1 试验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 基因序列 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 植物表达载体的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.2 PCR检测表达载体 | 第19页 |
| 2.2.3 农杆菌感受态细胞的制备 | 第19页 |
| 2.2.4 根癌农杆菌的转化 | 第19-20页 |
| 2.2.5 甘油农杆菌制备 | 第20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-21页 |
| 2.3.1 cry1Ia8-cry1C双价载体结构图 | 第20页 |
| 2.3.2 cry1Ia8-cry1C表达载体的PCR鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.3 序列测定 | 第21页 |
| 2.4 讨论 | 第21-22页 |
| 第三章 根癌农杆菌介导的双价基因在甘蓝上的遗传转化 | 第22-38页 |
| 3.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 遗传转化材料 | 第22页 |
| 3.1.2 质粒载体 | 第22页 |
| 3.1.3 培养基 | 第22-23页 |
| 3.1.4 Cry1Ia8蛋白抗体 | 第23页 |
| 3.1.5 试验所需试剂耗材 | 第23页 |
| 3.1.6 主要仪器设备 | 第23页 |
| 3.2 试验方法 | 第23-30页 |
| 3.2.1 甘蓝自交系F13J85转化体系的优化 | 第23-24页 |
| 3.2.2 转基因植株的获得 | 第24页 |
| 3.2.3 转基因植株的检测 | 第24-30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-36页 |
| 3.3.1 再生及遗传转化体系的优化 | 第30-32页 |
| 3.3.2 转基因植株的获得 | 第32-33页 |
| 3.3.3 转基因植株的PCR检测 | 第33-34页 |
| 3.3.4 转基因植株的Southern blot检测 | 第34页 |
| 3.3.5 转基因植株的RT-PCR检测 | 第34-35页 |
| 3.3.6 转基因植株的Western blot检测 | 第35-36页 |
| 3.3.7 转基因植株Bt蛋白含量测定 | 第36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 转基因甘蓝田间性状分析 | 第38-41页 |
| 4.1 试验材料 | 第38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38页 |
| 4.2.1 转基因甘蓝后代主要农艺性状调查 | 第38页 |
| 4.2.2 转基因甘蓝T4代田间害虫种类和数量调查 | 第38页 |
| 4.3 结果与分析 | 第38-40页 |
| 4.3.1 转基因甘蓝农艺性状调查分析 | 第38-39页 |
| 4.3.2 转基因甘蓝田间抗虫性研究 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第五章 转cry1Ia8基因甘蓝花粉对意大利蜜蜂工蜂的影响 | 第41-46页 |
| 5.1 试验材料 | 第41页 |
| 5.2 试验方法 | 第41-43页 |
| 5.2.1 供试蜜蜂及饲喂处理 | 第41页 |
| 5.2.2 意大利蜜蜂工蜂存活率和体重的测定 | 第41页 |
| 5.2.3 蜜蜂工蜂体内代谢解毒酶活力的测定 | 第41-42页 |
| 5.2.4 蜜蜂工蜂体内中肠蛋白酶活力的测定 | 第42-43页 |
| 5.2.5 实验数据分析 | 第43页 |
| 5.3 结果与分析 | 第43-45页 |
| 5.3.1 转cry1Ia8基因甘蓝花粉对未成熟期蜜蜂存活率的影响 | 第43页 |
| 5.3.2 取食Bt甘蓝花粉和CK甘蓝花粉后蜜蜂体重的变化 | 第43-44页 |
| 5.3.3 取食Bt甘蓝花粉和CK甘蓝花粉后蜜蜂体内主要代谢解毒酶活性的变化 | 第44页 |
| 5.3.4 取食Bt甘蓝花粉和CK甘蓝花粉后蜜蜂体内中肠蛋白酶活性的变化 | 第44-45页 |
| 5.4 讨论 | 第45-46页 |
| 第六章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
