| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 引言 | 第12-19页 |
| 0.1 木质素研究概况 | 第12-15页 |
| 0.1.1 木质素的分布及其生物学意义 | 第12页 |
| 0.1.2 木质素的种类 | 第12-13页 |
| 0.1.3 木质素单体的生物合成过程 | 第13-15页 |
| 0.2 木质素生物合成调控研究进展 | 第15-17页 |
| 0.2.1 木质素合成的调控 | 第15-16页 |
| 0.2.2 4CL基因及功能研究 | 第16-17页 |
| 0.3 反义RNA技术 | 第17-18页 |
| 0.3.1 反义RNA技术原理 | 第17页 |
| 0.3.2 应用 | 第17-18页 |
| 0.4 本实验研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第1章 农杆菌介导反义4CL基因转化烟草 | 第19-30页 |
| 1.1 仪器设备和试剂 | 第19-21页 |
| 1.1.1 主要仪器设备 | 第19页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 1.1.3 主要试剂配制方法 | 第19-20页 |
| 1.1.4 培养基 | 第20-21页 |
| 1.2 实验材料及菌种 | 第21-22页 |
| 1.2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.2.2 菌种及重组质粒 | 第22页 |
| 1.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 1.3.1 农杆菌的活化与扩大培养 | 第22-23页 |
| 1.3.2 菌液的准备 | 第23页 |
| 1.3.3 农杆菌介导反义4CL基因转化烟草 | 第23-24页 |
| 1.4 转基因烟草的分子检测 | 第24-27页 |
| 1.4.1 转基因烟草基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| 1.4.2 农杆菌质粒DNA的提取 | 第25页 |
| 1.4.3 PCR扩增检测目的基因 | 第25-26页 |
| 1.4.4 转化烟草目的基因测序 | 第26页 |
| 1.4.5 转基因烟草表型观察 | 第26-27页 |
| 1.5 结果分析 | 第27-29页 |
| 1.5.1 农杆菌介导反义4CL基因转化烟草 | 第27页 |
| 1.5.2 T0代转反义4CL基因烟草PCR检测结果 | 第27-28页 |
| 1.5.3 T0代转反义4CL基因烟草PCR测序结果 | 第28-29页 |
| 1.5.4 T0代转基因烟草表型观察 | 第29页 |
| 1.6 结论 | 第29-30页 |
| 第2章 T1代烟草转化植株的检测 | 第30-50页 |
| 2.1 仪器设备和试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.2.1 T1代转基因烟草植株的培养 | 第31页 |
| 2.2.2 T1代转基因烟草植株PCR验证 | 第31页 |
| 2.2.3 T1代转基因烟草植株PCR测序 | 第31页 |
| 2.2.4 T1代转基因烟草植株RT-PCR验证 | 第31-34页 |
| 2.2.5 T1代转基因植物遗传稳定性的检测 | 第34页 |
| 2.2.6 qRT-PCR检测T1代转基因烟草4CL1基因的表达情况 | 第34-36页 |
| 2.2.7 ELISA检测烟草4CL含量 | 第36页 |
| 2.2.8 T1代转基因植株的表型观察 | 第36-37页 |
| 2.2.9 T1代转化植株木质素含量的测定 | 第37页 |
| 2.3 结果分析 | 第37-49页 |
| 2.3.1 T1代转基因植物PCR验证 | 第37-38页 |
| 2.3.2 T1代转基因植物PCR产物测序 | 第38-39页 |
| 2.3.3 T1代转基因烟草植株RT-PCR验证结果 | 第39-40页 |
| 2.3.4 T1代转基因植物遗传稳定性的检测 | 第40-42页 |
| 2.3.5 qRT-PCR检测T1代转基因植株4CL1基因的表达结果 | 第42-43页 |
| 2.3.6 ELISA法检测烟草4CL含量 | 第43-44页 |
| 2.3.7 T1代转基因植株的生长状况 | 第44-46页 |
| 2.3.8 T1代转化植株木质素含量 | 第46-49页 |
| 2.4 结论 | 第49-50页 |
| 第3章 结论与讨论 | 第50-52页 |
| 3.1 农杆菌介导反义4CL基因转化烟草 | 第50页 |
| 3.2 T1代烟草植株分子指标的检测 | 第50页 |
| 3.3 烟草4CL1基因表达检测 | 第50-51页 |
| 3.4 烟草4CL含量的检测 | 第51页 |
| 3.5 实验进一步研究方向 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 缩写符号说明 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第58页 |
