| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-21页 |
| 1. 白血病病因和治疗情况概述 | 第11-12页 |
| 2. 硒作为一种具有前景的抗肿瘤药物 | 第12-13页 |
| 3. 细胞凋亡与自噬 | 第13-18页 |
| ·细胞凋亡 | 第13页 |
| ·细胞自噬 | 第13-14页 |
| ·细胞凋亡和自噬在癌症发生发展中的作用 | 第14-15页 |
| ·细胞凋亡与自噬的调控机制 | 第15-18页 |
| 4. 早期工作基础 | 第18-19页 |
| 5. 本研究的主要意义和工作内容 | 第19-21页 |
| ·亚硒酸钠引起白血病细胞中自噬水平的改变 | 第19页 |
| ·热休克蛋白90通过IKK/NFκB通路调控NB4细胞自噬与凋亡 | 第19页 |
| ·p38MAPK信号通路参与内质网应激相关自噬的调控 | 第19页 |
| ·p53是胞内决定自噬发生的重要因子 | 第19-20页 |
| ·DAPK通过PP2A介导的去磷酸化活化介导HL60细胞自噬 | 第20-21页 |
| 材料和方法 | 第21-51页 |
| 1. 实验材料 | 第21-27页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·使用的抗体 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR引物 | 第23页 |
| ·靶基因siRNA的合成 | 第23-24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| 2. 实验方法 | 第27-51页 |
| ·细胞的复苏、冻存及培养 | 第27-28页 |
| ·细胞增殖活力检测(CCK8分析法) | 第28页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第28-29页 |
| ·MDC染色检测酸性自噬泡 | 第29-30页 |
| ·丫啶橙染色 | 第30页 |
| ·电镜观察自噬泡形态 | 第30-31页 |
| ·Western Blot | 第31-33页 |
| ·免疫共沉淀 | 第33页 |
| ·GST pull-down | 第33-35页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第35页 |
| ·细胞转染(RNAi及质粒转染) | 第35-36页 |
| ·细菌转化与质粒提取 | 第36-37页 |
| ·实时定量PCR芯片——功能分类基因芯片 | 第37-40页 |
| ·染色质免疫共沉淀——“酶”处理染色质免疫沉淀(琼脂糖微球式) | 第40-46页 |
| ·裸鼠致瘤实验 | 第46-48页 |
| ·TUNEL检测细胞凋亡 | 第48-49页 |
| ·常规染色法(HE染色) | 第49-50页 |
| ·免疫组织化学技术(EnVision方法) | 第50页 |
| ·统计分析 | 第50-51页 |
| 实验结果 | 第51-98页 |
| 第一部分 热休克蛋白90在硒调控自噬凋亡中的作用 | 第51-72页 |
| 1. 亚硒酸钠在体内外诱导白血病细胞凋亡和自噬 | 第51-56页 |
| 2. 热休克蛋白90是发挥自噬调控的关键蛋白 | 第56-66页 |
| 3. IKK/NFκB信号通路与细胞自噬 | 第66-70页 |
| 4. p53可能是造成细胞自噬差异的根本原因 | 第70-72页 |
| 第二部分 p38MAPK参与的PERK/eIF2α/ATF4通路在硒诱导凋亡与自噬过程中的调控作用 | 第72-92页 |
| 1.亚硒酸钠诱导内质网应激 | 第72-74页 |
| 2. p38MAPK在亚硒酸钠诱导凋亡与自噬过程中发挥重要作用 | 第74-77页 |
| 3. Hsp90介导PERK对p38MAPK的活化，并激活下游信号蛋白 | 第77-81页 |
| 4. ATF4通过转录起始调控细胞自噬 | 第81-85页 |
| 5. p53是决定细胞命运的关键蛋白 | 第85-87页 |
| 6. 硒在体内对NB4细胞异种移植肿瘤的影响 | 第87-92页 |
| 第三部分 DAPK在硒诱导HL60细胞自噬过程中的作用机制 | 第92-98页 |
| 1. 亚硒酸钠诱导白血病HL60细胞发生凋亡和自噬 | 第92-93页 |
| 2. 抑制细胞自噬能使亚硒酸钠诱导的细胞凋亡率降低 | 第93-94页 |
| 3. DAPK表达变化对硒诱导自噬无明显影响 | 第94-95页 |
| 4. PP2A介导DAPK活化引起细胞自噬性死亡 | 第95-98页 |
| 讨论 | 第98-105页 |
| 1. 亚硒酸钠诱导细胞凋亡过程中，细胞自噬扮演不同的角色 | 第98-99页 |
| 2. 细胞自噬可能成为整合胞内信号的一个重要机制 | 第99-100页 |
| 3. 高通量芯片筛选技术成为研究细胞自噬的重要手段 | 第100页 |
| 4. 热休克蛋白90通过IKK/NFκB通路调控细胞自噬 | 第100-102页 |
| 5. p38MAPK与内质网应激交叉的信号通路影响细胞凋亡与自噬 | 第102-104页 |
| 6. 亚硒酸钠诱导DAPK依赖的HL60细胞自噬 | 第104-105页 |
| 全文小结 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-116页 |
| 文献综述 | 第116-132页 |
| 参考文献 | 第127-132页 |
| 缩略词表 | 第132-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 研宄生在读期间参加学术活动、发表论文情况 | 第135-137页 |
