摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文对照表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-14页 |
1.1 PD患者外周血淋巴细胞生物标志物的研究 | 第10-11页 |
1.2 DRD3在PD发生发展中的作用 | 第11-13页 |
1.3 实时荧光定量RT-PCR技术 | 第13-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-23页 |
2.1 主要器材和试剂 | 第14-15页 |
2.2 样品采集 | 第15-16页 |
2.2.1 病史资料及外周血标本采集 | 第15-16页 |
2.3 外周血淋巴细胞RNA的提取和cDNA的合成 | 第16-18页 |
2.3.1 外周血淋巴细胞分离 | 第16页 |
2.3.2 外周血淋巴细胞RNA提取 | 第16-17页 |
2.3.3 RNA浓度及纯度测定 | 第17页 |
2.3.4 cDNA的合成 | 第17-18页 |
2.4 引物设计与合成 | 第18页 |
2.5 DRD3和GAPDH标准品质粒的构建 | 第18-20页 |
2.5.1 PCR分别扩增DRD3和GAPDH长片段 | 第18-19页 |
2.5.2 DRD3和GAPDH PCR产物胶回收 | 第19页 |
2.5.3 胶回收后PCR产物进行测序 | 第19页 |
2.5.4 胶回收后的PCR产物及载体的连接 | 第19页 |
2.5.5 连接产物转化感受态细胞DH5α | 第19-20页 |
2.5.6 重组质粒的提取 | 第20页 |
2.6 标准曲线的构建和绝对定量荧光定量PCR反应体系及反应条件的优化 | 第20-22页 |
2.6.1 标准品拷贝数的测定 | 第20页 |
2.6.2 荧光定量PCR反应体系及反应条件的优化 | 第20-22页 |
2.7 样品进行荧光定量PCR检测 | 第22页 |
2.8 计算 | 第22页 |
2.9 数据的统计学处理 | 第22-23页 |
第3章 结果 | 第23-31页 |
3.1 RNA纯度鉴定 | 第23页 |
3.2 荧光定量PCR方法可行性判断 | 第23-27页 |
3.2.1 扩增曲线 | 第23-24页 |
3.2.2 荧光定量PCR产物的鉴定 | 第24-26页 |
3.2.3 标准曲线 | 第26-27页 |
3.3 数据统计结果 | 第27-31页 |
第4章 讨论 | 第31-35页 |
4.1 PD外周血淋巴细胞DRD3表达水平的变化及其意义 | 第31-32页 |
4.2 左旋多巴及多巴胺受体激动剂对DRD3的影响及意义 | 第32页 |
4.3 DRD3与各量表评分的关系及意义 | 第32-33页 |
4.4 DRD3与运动并发症的关系及意义 | 第33-34页 |
4.5 外周血淋巴细胞对研究PD的意义 | 第34-35页 |
第5章 结论与展望 | 第35-36页 |
5.1 结论 | 第35页 |
5.2 不足与展望 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
附录 | 第41-52页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
综述 | 第53-59页 |
参考文献 | 第58-59页 |