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OsUGP8调控水稻(Oryza sativa L.)类病变发生的分子基础研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩写词表第8-14页
1 文献综述及前言第14-29页
    1.1 国内外相关研究进展第14-28页
        1.1.1 植物类病变研究进展第14-22页
        1.1.2 植物尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)生理功能研究进展第22页
        1.1.3 植物中催化UDPG代谢的焦磷酸化酶研究进展第22-26页
        1.1.4 烯调控植物PCD研究进展第26-28页
    1.2 前言第28-29页
2 材料与方法第29-55页
    2.1 材料第29-33页
        2.1.1 植物材料第29页
        2.1.2 菌株与质粒第29-30页
        2.1.3 抗体第30页
        2.1.4 试剂第30页
        2.1.5 引物第30页
        2.1.6 主要仪器第30-33页
    2.2 方法第33-55页
        2.2.1 培养基配制第33页
        2.2.2 水稻种植第33-34页
        2.2.3 突变体表型鉴定及农艺性状调查第34页
        2.2.4 光照对突变体类病变发生的影响第34页
        2.2.5 细胞死亡鉴定第34-35页
        2.2.6 活性氧和胼胝质的检测第35页
        2.2.7 叶细胞超微结构观察与花粉活力检测第35页
        2.2.8 生理生化指标测定第35-36页
        2.2.9 水稻基因组DNA提取第36-37页
        2.2.10 SSR分子标记检测第37页
        2.2.11 OsUGP8图位克隆第37-38页
        2.2.12 OsUGP8生物信息学分析第38-39页
        2.2.13 水稻总RNA的提取第39页
        2.2.14 cDNA第一链的制备第39-40页
        2.2.15 qPCR检测基因表达第40-41页
        2.2.16 基因克隆第41-44页
        2.2.17 载体构建第44页
        2.2.18 农杆菌AGL0电击感受态制备及转化第44-45页
        2.2.19 转基因材料的获得第45页
        2.2.20 重组蛋白的诱导表达与纯化第45-47页
        2.2.21 植物总蛋白的提取第47-48页
        2.2.22 SDS-PAGE第48-49页
        2.2.23 Western Blot检测第49-50页
        2.2.24 原生质体提取及转化第50-52页
        2.2.25 农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达分析第52-53页
        2.2.26 GUS染色分析第53页
        2.2.27 基因表达分析第53-54页
        2.2.28 体外及水稻体内酶活性测定第54-55页
        2.2.29 叶片的UDPG含量分析第55页
        2.2.30 乙烯释放量的测定第55页
        2.2.31 UDPG或乙烯对类病变的发生的影响第55页
3 结果与分析第55-88页
    3.1 突变体ugp8表型与农艺性状第55-56页
    3.2 突变体ugp8类病斑的产生依赖于光第56-58页
    3.3 突变体ugp8细胞死亡及PCD特征第58-59页
    3.4 突变体ugp8活性氧与胼胝体的积累第59-60页
    3.5 突变体ugp8叶细胞超微结构及花粉活力第60-62页
    3.6 突变体ugp8生理特征第62-63页
    3.7 突变体ugp8的遗传特性第63页
    3.8 突变基因的初定位第63-64页
    3.9 突变基因的精细定位第64-66页
    3.10 Os08g0206900是引起水稻类病变的候选基因第66-67页
    3.11 OsUGP8功能互补验证第67-68页
    3.12 OsUGP8生物信息学第68-70页
        3.12.1 OsUGP8结构预测第68-69页
        3.12.2 OsUGP8在水稻中有一个同源性很高的蛋白OsUGP4第69-70页
    3.13 OsUGP8在胞质和核内均有分布第70-71页
    3.14 OSUGP8表达模式第71-73页
        3.14.1 OsUGP8组织表达特性第71-72页
        3.14.2 OsUGP8诱导表达特性第72-73页
    3.15 OsUGP8酶活性及点突变对酶活性的影响第73-76页
        3.15.1 体外酶活性第73-74页
        3.15.2 体内酶活性第74-76页
    3.16 OsUGP8突变导致UDPG代谢失调第76-79页
        3.16.1 OsUGP8突变导致UDPG积累第76-78页
        3.16.2 OsUGP8过表达导致UDPG含量降低第78-79页
    3.17 突变体ACS2表达与乙烯合成上调第79-80页
    3.18 UDPG诱导乙烯合成相关酶基因的表达与乙烯释放第80-81页
    3.19 UDPG和乙烯促进突变体类病变的发生第81-84页
    3.20 转录本测序第84-88页
        3.20.1 转录本测序分析差异基因第84-85页
        3.20.2 qPCR验证差异基因表达水平第85-88页
4 讨论第88-92页
    4.1 关于植物PCD与ROS第88-89页
    4.2 关于类病变发生的光依赖性第89页
    4.3 关于植物UAGPase第89-91页
    4.4 关于突变体ugp8类病变发生的分子机制第91-92页
5 结论、创新点及下一步工作计划第92-94页
    5.1 结论第92页
    5.2 创新点第92-93页
    5.3 下一步工作计划第93-94页
参考文献第94-109页
致谢第109-110页
作者简历第110-111页

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