摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第8-14页 |
1 文献综述及前言 | 第14-29页 |
1.1 国内外相关研究进展 | 第14-28页 |
1.1.1 植物类病变研究进展 | 第14-22页 |
1.1.2 植物尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)生理功能研究进展 | 第22页 |
1.1.3 植物中催化UDPG代谢的焦磷酸化酶研究进展 | 第22-26页 |
1.1.4 烯调控植物PCD研究进展 | 第26-28页 |
1.2 前言 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-55页 |
2.1 材料 | 第29-33页 |
2.1.1 植物材料 | 第29页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第29-30页 |
2.1.3 抗体 | 第30页 |
2.1.4 试剂 | 第30页 |
2.1.5 引物 | 第30页 |
2.1.6 主要仪器 | 第30-33页 |
2.2 方法 | 第33-55页 |
2.2.1 培养基配制 | 第33页 |
2.2.2 水稻种植 | 第33-34页 |
2.2.3 突变体表型鉴定及农艺性状调查 | 第34页 |
2.2.4 光照对突变体类病变发生的影响 | 第34页 |
2.2.5 细胞死亡鉴定 | 第34-35页 |
2.2.6 活性氧和胼胝质的检测 | 第35页 |
2.2.7 叶细胞超微结构观察与花粉活力检测 | 第35页 |
2.2.8 生理生化指标测定 | 第35-36页 |
2.2.9 水稻基因组DNA提取 | 第36-37页 |
2.2.10 SSR分子标记检测 | 第37页 |
2.2.11 OsUGP8图位克隆 | 第37-38页 |
2.2.12 OsUGP8生物信息学分析 | 第38-39页 |
2.2.13 水稻总RNA的提取 | 第39页 |
2.2.14 cDNA第一链的制备 | 第39-40页 |
2.2.15 qPCR检测基因表达 | 第40-41页 |
2.2.16 基因克隆 | 第41-44页 |
2.2.17 载体构建 | 第44页 |
2.2.18 农杆菌AGL0电击感受态制备及转化 | 第44-45页 |
2.2.19 转基因材料的获得 | 第45页 |
2.2.20 重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第45-47页 |
2.2.21 植物总蛋白的提取 | 第47-48页 |
2.2.22 SDS-PAGE | 第48-49页 |
2.2.23 Western Blot检测 | 第49-50页 |
2.2.24 原生质体提取及转化 | 第50-52页 |
2.2.25 农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达分析 | 第52-53页 |
2.2.26 GUS染色分析 | 第53页 |
2.2.27 基因表达分析 | 第53-54页 |
2.2.28 体外及水稻体内酶活性测定 | 第54-55页 |
2.2.29 叶片的UDPG含量分析 | 第55页 |
2.2.30 乙烯释放量的测定 | 第55页 |
2.2.31 UDPG或乙烯对类病变的发生的影响 | 第55页 |
3 结果与分析 | 第55-88页 |
3.1 突变体ugp8表型与农艺性状 | 第55-56页 |
3.2 突变体ugp8类病斑的产生依赖于光 | 第56-58页 |
3.3 突变体ugp8细胞死亡及PCD特征 | 第58-59页 |
3.4 突变体ugp8活性氧与胼胝体的积累 | 第59-60页 |
3.5 突变体ugp8叶细胞超微结构及花粉活力 | 第60-62页 |
3.6 突变体ugp8生理特征 | 第62-63页 |
3.7 突变体ugp8的遗传特性 | 第63页 |
3.8 突变基因的初定位 | 第63-64页 |
3.9 突变基因的精细定位 | 第64-66页 |
3.10 Os08g0206900是引起水稻类病变的候选基因 | 第66-67页 |
3.11 OsUGP8功能互补验证 | 第67-68页 |
3.12 OsUGP8生物信息学 | 第68-70页 |
3.12.1 OsUGP8结构预测 | 第68-69页 |
3.12.2 OsUGP8在水稻中有一个同源性很高的蛋白OsUGP4 | 第69-70页 |
3.13 OsUGP8在胞质和核内均有分布 | 第70-71页 |
3.14 OSUGP8表达模式 | 第71-73页 |
3.14.1 OsUGP8组织表达特性 | 第71-72页 |
3.14.2 OsUGP8诱导表达特性 | 第72-73页 |
3.15 OsUGP8酶活性及点突变对酶活性的影响 | 第73-76页 |
3.15.1 体外酶活性 | 第73-74页 |
3.15.2 体内酶活性 | 第74-76页 |
3.16 OsUGP8突变导致UDPG代谢失调 | 第76-79页 |
3.16.1 OsUGP8突变导致UDPG积累 | 第76-78页 |
3.16.2 OsUGP8过表达导致UDPG含量降低 | 第78-79页 |
3.17 突变体ACS2表达与乙烯合成上调 | 第79-80页 |
3.18 UDPG诱导乙烯合成相关酶基因的表达与乙烯释放 | 第80-81页 |
3.19 UDPG和乙烯促进突变体类病变的发生 | 第81-84页 |
3.20 转录本测序 | 第84-88页 |
3.20.1 转录本测序分析差异基因 | 第84-85页 |
3.20.2 qPCR验证差异基因表达水平 | 第85-88页 |
4 讨论 | 第88-92页 |
4.1 关于植物PCD与ROS | 第88-89页 |
4.2 关于类病变发生的光依赖性 | 第89页 |
4.3 关于植物UAGPase | 第89-91页 |
4.4 关于突变体ugp8类病变发生的分子机制 | 第91-92页 |
5 结论、创新点及下一步工作计划 | 第92-94页 |
5.1 结论 | 第92页 |
5.2 创新点 | 第92-93页 |
5.3 下一步工作计划 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
作者简历 | 第110-111页 |