| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第13-24页 |
| 1 角膜的结构与功能 | 第13-15页 |
| 1.1 角膜上皮层 | 第13页 |
| 1.2 前弹力层 | 第13-14页 |
| 1.3 角膜基质层 | 第14页 |
| 1.4 后弹力层 | 第14-15页 |
| 1.5 角膜内皮层 | 第15页 |
| 2 组织工程前板层半角膜的研究进展 | 第15-23页 |
| 2.1 组织工程前板层半角膜种子细胞研究进展 | 第15-19页 |
| 2.1.1 组织工程前板层半角膜上皮层的种子细胞 | 第15-18页 |
| 2.1.2 组织工程前板层半角膜基质层的种子细胞 | 第18-19页 |
| 2.2 组织工程前板层半角膜支架材料研究进展 | 第19-22页 |
| 2.2.1 胶原蛋白 | 第19-21页 |
| 2.2.2 脱细胞猪角膜基质 | 第21-22页 |
| 2.3 组织工程前板层半角膜构建中急需解决的问题 | 第22-23页 |
| 3 本文研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 牛胶原蛋白-硫酸软骨素(BCOL-CS)复合支架的制备 | 第24-37页 |
| 1 材料与用品 | 第24-26页 |
| 1.1 实验材料 | 第24页 |
| 1.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 1.3 实验试剂 | 第25页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第25-26页 |
| 1.4.1 PBS缓冲液 | 第25页 |
| 1.4.2 交联剂 | 第25页 |
| 1.4.3 D-Hanks平衡盐溶液 | 第25-26页 |
| 1.4.4 伊红染液 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.1 BCOL-CS复合支架制备条件的摸索 | 第26页 |
| 2.2 BCOL-CS复合支架的制备 | 第26-27页 |
| 2.3 BCOL-CS复合支架的理化性质检测 | 第27-28页 |
| 2.3.1 外观观察 | 第27页 |
| 2.3.2 透光率检测 | 第27页 |
| 2.3.3 厚度测量 | 第27页 |
| 2.3.4 含水量检测 | 第27页 |
| 2.3.5 机械性能检测 | 第27页 |
| 2.3.6 浸提液MTT检测 | 第27-28页 |
| 2.4 BCOL-CS复合支架的组织结构检测 | 第28页 |
| 2.4.1 BCOL-CS复合支架的HE及阿利新蓝染色 | 第28页 |
| 2.4.2 扫描电镜检测 | 第28页 |
| 2.4.3 透射电镜检测 | 第28页 |
| 3 实验结果 | 第28-34页 |
| 3.1 BCOL-CS复合支架制备条件的摸索 | 第28-30页 |
| 3.2 BCOL-CS复合支架的理化性质检测 | 第30-33页 |
| 3.2.1 外观观察 | 第30页 |
| 3.2.2 透光率检测 | 第30-31页 |
| 3.2.3 厚度测量 | 第31页 |
| 3.2.4 含水量检测 | 第31-32页 |
| 3.2.5 机械性能检测 | 第32页 |
| 3.2.6 浸提液MTT检测 | 第32-33页 |
| 3.3 BCOL-CS复合支架的组织结构检测 | 第33-34页 |
| 3.3.1 HE染色 | 第33页 |
| 3.3.2 阿利新蓝染色 | 第33-34页 |
| 3.3.3 扫描电镜检测 | 第34页 |
| 3.3.4 透射电镜检测 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 组织工程人前板层半角膜(TE-aHC)种子细胞的体外扩增培养及其鉴定 | 第37-49页 |
| 1 材料与用品 | 第37-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第37页 |
| 1.2 实验仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 实验试剂 | 第38页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第38-39页 |
| 1.4.1 D-Hanks平衡盐溶液 | 第38-39页 |
| 1.4.2 0.25%胰蛋白酶 | 第39页 |
| 1.4.3 磷酸缓冲液 | 第39页 |
| 1.4.4 吉姆萨染液 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-41页 |
| 2.1 HCEP细胞及HCS细胞的复苏及扩增培养 | 第39-40页 |
| 2.2 HCEP细胞及HCS细胞的生长曲线测定 | 第40页 |
| 2.3 HCEP细胞及HCS细胞的染色体组型分析 | 第40-41页 |
| 2.4 HCEP细胞及HCS细胞的免疫细胞化学检测 | 第41页 |
| 3 实验结果 | 第41-45页 |
| 3.1 HCEP细胞及HCS细胞的形态观察 | 第41页 |
| 3.2 HCEP细胞及HCS细胞的生长曲线测定 | 第41-42页 |
| 3.3 HCEP细胞及HCS细胞的染色体组型分析 | 第42-43页 |
| 3.4 HCEP细胞及HCS细胞的免疫细胞化学检测 | 第43-45页 |
| 3.4.1 HCEP细胞标志蛋白及功能蛋白表达情况 | 第43-44页 |
| 3.4.2 HCS细胞标志蛋白及功能蛋白表达情况 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 5 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 组织工程人前板层半角膜(TE-aHC)的体外构建及性质鉴定 | 第49-62页 |
| 1 材料与用品 | 第49-51页 |
| 1.1 实验材料 | 第49页 |
| 1.2 实验仪器 | 第49-50页 |
| 1.3 实验试剂 | 第50-51页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第51页 |
| 1.4.1 PBS缓冲液 | 第51页 |
| 1.4.2 0.1 mol/L磷酸氢二钠水溶液 | 第51页 |
| 1.4.3 甲醛明胶溶液 | 第51页 |
| 1.4.4 苏木精染液 | 第51页 |
| 1.4.5 伊红染液 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-54页 |
| 2.1 TE-aHC的体外构建 | 第51-53页 |
| 2.1.1 种子细胞的体外培养 | 第52页 |
| 2.1.2 体外培养种子细胞的荧光标记 | 第52页 |
| 2.1.3 TE-aHC的体外构建 | 第52-53页 |
| 2.2 TE-aHC的形态结构鉴定 | 第53-54页 |
| 2.2.1 TE-aHC的外观观察 | 第53页 |
| 2.2.2 TE-aHC的透光率检测 | 第53页 |
| 2.2.3 TE-aHC的HE染色 | 第53页 |
| 2.2.4 TE-aHC的细胞标记荧光观察 | 第53页 |
| 2.2.5 TE-aHC的免疫细胞化学检测 | 第53-54页 |
| 2.2.6 TE-aHC的扫描电镜检测 | 第54页 |
| 2.2.7 TE-aHC的透射电镜检测 | 第54页 |
| 3 实验结果 | 第54-58页 |
| 3.1 TE-aHC的外观观察 | 第54页 |
| 3.2 TE-aHC的透光率检测 | 第54页 |
| 3.3 TE-aHC的HE染色 | 第54-55页 |
| 3.4 TE-aHC的细胞标记荧光观察 | 第55-56页 |
| 3.5 TE-aHC的免疫细胞化学检测 | 第56-58页 |
| 3.6 TE-aHC的扫描电镜检测 | 第58页 |
| 3.7 TE-aHC的透射电镜检测 | 第58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 5 本章小结 | 第61-62页 |
| 全文总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简历 | 第73页 |
| 发表的学术论文 | 第73页 |
