| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 前言 | 第17-28页 |
| 1.1 肝脏脂肪酸代谢 | 第17页 |
| 1.2 脂酶 | 第17-25页 |
| 1.2.1 肝酯酶 | 第18-21页 |
| 1.2.2 脂蛋白酯酶 | 第21-25页 |
| 1.3 课题研究目的及意义 | 第25-28页 |
| 第二章 吉富罗非鱼HL和LPL基因全长克隆及生物信息学分析 | 第28-67页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 实验鱼 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第28页 |
| 2.1.3 试剂盒与试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第29页 |
| 2.1.5 实验自备试剂及其制备 | 第29-30页 |
| 2.1.6 生物信息学软件 | 第30页 |
| 2.1.7 引物合成与序列测定 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-43页 |
| 2.2.1 吉富罗非鱼肝脏cDNA模板制备 | 第31-33页 |
| 2.2.2 总RNA的检测 | 第33页 |
| 2.2.3 吉富罗非鱼HL和LPL基因cDNA核心片段的克隆 | 第33-34页 |
| 2.2.4 目的片段的胶回收、TA克隆以及鉴定 | 第34-37页 |
| 2.2.5 吉富罗非鱼HL和LPL基因cDNA5’末端的克隆 | 第37-40页 |
| 2.2.6 目的片段的胶回收、TA克隆以及鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.7 吉富罗非鱼HL和LPL基因cDNA3’末端的克隆 | 第41-42页 |
| 2.2.8 目的片段的胶回收、TA克隆以及鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.9 吉富罗非鱼HL和LPL全序列拼接 | 第43页 |
| 2.2.10 吉富罗非鱼HL和LPL基因全长的生物信息学分析 | 第43页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第43-63页 |
| 2.3.1 肝脏总RNA的提取 | 第43-44页 |
| 2.3.2 HL和LPL cDNA基因的克隆 | 第44-46页 |
| 2.3.3 HL和LPL cDNA基因序列拼接 | 第46-51页 |
| 2.3.4 HL和LPL基因生物信息分析 | 第51-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-67页 |
| 2.4.1 RNA的提取及基因克隆操作过程 | 第63-64页 |
| 2.4.2 吉富罗非鱼肝脏HL、LPL基因的克隆 | 第64页 |
| 2.4.3 吉富罗非鱼肝脏HL、LPL基因的生物信息学分析 | 第64-67页 |
| 第三章 饲料脂肪和胆碱水平、投喂水平和投喂频率对肝脏中HL和LPL基因表达的影响 | 第67-79页 |
| 3.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 3.1.1 实验鱼 | 第67页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第67页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第67-68页 |
| 3.1.4 引物设计与合成 | 第68页 |
| 3.2 实验方法 | 第68-70页 |
| 3.2.1 实验饲料设计 | 第68-69页 |
| 3.2.2 养殖实验 | 第69页 |
| 3.2.4 总RNA的提取 | 第69-70页 |
| 3.2.5 cDNA第一链合成 | 第70页 |
| 3.2.6 Real-Time荧光定量法检测HL和LPL基因在肝脏中的表达 | 第70页 |
| 3.2.7 数据处理 | 第70页 |
| 3.3 结果 | 第70-75页 |
| 3.3.1 脂肪和胆碱水平对吉富罗非鱼肝脏HL和LPL基因表达的影响 | 第70-72页 |
| 3.3.2 投喂频率和投喂水平对吉富罗非鱼肝脏HL和LPL基因表达的影响 | 第72-75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-79页 |
| 3.4.1 HL基因表达特性分析 | 第75-76页 |
| 3.4.2 LPL基因表达特性分析 | 第76-79页 |
| 第四章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第95页 |
