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小分子荧光探针检测内皮细胞自噬信号的药理学实验研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
缩略词表第9-12页
1 前言第12-20页
    1.1 自噬研究概状第12-14页
        1.1.1 自噬的分类第12页
        1.1.2 自噬的分子机制第12-14页
        1.1.3 传统的自噬检测方法第14页
    1.2 自噬探针的研究第14-18页
        1.2.1 基于内源性胞浆蛋白的自噬探针第15页
        1.2.2 基于同位素标记的氨基酸或糖的自噬探针第15页
        1.2.3 基于纳米颗粒的自噬研究第15页
        1.2.4 基于荧光小鼠的自噬研究第15-16页
        1.2.5 基于荧光探针的自噬研究第16-18页
    1.3 本课题研究的意义和内容第18-20页
        1.3.1 本课题研究的目的、意义第18-19页
        1.3.2 本课题的研究内容第19-20页
2 材料、仪器和方法第20-28页
    2.1 实验材料第20-23页
        2.1.1 细胞株第20页
        2.1.2 探针第20页
        2.1.3 实验药物第20页
        2.1.4 实验试剂第20-22页
        2.1.5 实验仪器第22-23页
    2.2 实验方法第23-28页
        2.2.1 探针合成第23页
        2.2.2 探针对PH及ONOO~-、NO、O_2~-的响应分析第23页
        2.2.3 探针与药物的配制及给予第23-24页
        2.2.4 细胞培养第24页
        2.2.5 内皮细胞HBSS饥饿模型第24页
        2.2.6 内皮细胞AFG-1对自噬抑制剂的响应第24-25页
        2.2.7 内皮细胞AFG-1与RFP-LC3的共定位情况第25页
        2.2.8 内皮细胞沉默ATG 5表达对荧光探针分子AFG-1的影响第25-26页
        2.2.9 内皮细胞荧光封片第26页
        2.2.10 ONOO-清除剂UA和FeTTPs对荧光探针分子AFG-1的影响第26页
        2.2.11 活细胞检测荧光分子探针AFG-1与溶酶体的共定位情况第26-27页
        2.2.12 探针与LC3共定位活细胞检测第27页
        2.2.13 数据分析第27-28页
3 实验结果第28-37页
    3.1 探针的理化性质: 响应酸性环境和硝/氧化应激第28-29页
    3.2 AFG-1对饥饿引起的内皮细胞自噬现象响应敏感第29-33页
        3.2.1 AFG-1响应饥饿具有时效依赖性第29页
        3.2.2 AFG-1能够响应自噬抑制剂的药理学调控第29-30页
        3.2.3 AFG-1与LC3共定位检测第30-31页
        3.2.4 ATG5依赖的探针响应第31-33页
        3.2.5 AFG-1荧光的增强依赖于ONOO~-的存在第33页
    3.3 AFG-1能够对活细胞自噬进行实时监测第33-37页
        3.3.1 AFG-1与溶酶体共定位分析第33-35页
        3.3.2 AFG-1与LC3共定位研究第35-37页
4 实验讨论第37-40页
参考文献第40-44页
综述 细胞自噬检测研究进展综述第44-54页
    参考文献第52-54页
作者简介第54页
硕士期间已发表和待发表的论文第54页
参加科研项目第54-55页
获奖情况第55页
学术会议与交流第55页

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