致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 自噬研究概状 | 第12-14页 |
1.1.1 自噬的分类 | 第12页 |
1.1.2 自噬的分子机制 | 第12-14页 |
1.1.3 传统的自噬检测方法 | 第14页 |
1.2 自噬探针的研究 | 第14-18页 |
1.2.1 基于内源性胞浆蛋白的自噬探针 | 第15页 |
1.2.2 基于同位素标记的氨基酸或糖的自噬探针 | 第15页 |
1.2.3 基于纳米颗粒的自噬研究 | 第15页 |
1.2.4 基于荧光小鼠的自噬研究 | 第15-16页 |
1.2.5 基于荧光探针的自噬研究 | 第16-18页 |
1.3 本课题研究的意义和内容 | 第18-20页 |
1.3.1 本课题研究的目的、意义 | 第18-19页 |
1.3.2 本课题的研究内容 | 第19-20页 |
2 材料、仪器和方法 | 第20-28页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 细胞株 | 第20页 |
2.1.2 探针 | 第20页 |
2.1.3 实验药物 | 第20页 |
2.1.4 实验试剂 | 第20-22页 |
2.1.5 实验仪器 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 探针合成 | 第23页 |
2.2.2 探针对PH及ONOO~-、NO、O_2~-的响应分析 | 第23页 |
2.2.3 探针与药物的配制及给予 | 第23-24页 |
2.2.4 细胞培养 | 第24页 |
2.2.5 内皮细胞HBSS饥饿模型 | 第24页 |
2.2.6 内皮细胞AFG-1对自噬抑制剂的响应 | 第24-25页 |
2.2.7 内皮细胞AFG-1与RFP-LC3的共定位情况 | 第25页 |
2.2.8 内皮细胞沉默ATG 5表达对荧光探针分子AFG-1的影响 | 第25-26页 |
2.2.9 内皮细胞荧光封片 | 第26页 |
2.2.10 ONOO-清除剂UA和FeTTPs对荧光探针分子AFG-1的影响 | 第26页 |
2.2.11 活细胞检测荧光分子探针AFG-1与溶酶体的共定位情况 | 第26-27页 |
2.2.12 探针与LC3共定位活细胞检测 | 第27页 |
2.2.13 数据分析 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-37页 |
3.1 探针的理化性质: 响应酸性环境和硝/氧化应激 | 第28-29页 |
3.2 AFG-1对饥饿引起的内皮细胞自噬现象响应敏感 | 第29-33页 |
3.2.1 AFG-1响应饥饿具有时效依赖性 | 第29页 |
3.2.2 AFG-1能够响应自噬抑制剂的药理学调控 | 第29-30页 |
3.2.3 AFG-1与LC3共定位检测 | 第30-31页 |
3.2.4 ATG5依赖的探针响应 | 第31-33页 |
3.2.5 AFG-1荧光的增强依赖于ONOO~-的存在 | 第33页 |
3.3 AFG-1能够对活细胞自噬进行实时监测 | 第33-37页 |
3.3.1 AFG-1与溶酶体共定位分析 | 第33-35页 |
3.3.2 AFG-1与LC3共定位研究 | 第35-37页 |
4 实验讨论 | 第37-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
综述 细胞自噬检测研究进展综述 | 第44-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |
作者简介 | 第54页 |
硕士期间已发表和待发表的论文 | 第54页 |
参加科研项目 | 第54-55页 |
获奖情况 | 第55页 |
学术会议与交流 | 第55页 |