| 英文缩略词对照表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 材料与方法 | 第16-31页 |
| 1 实验材料 | 第16-20页 |
| 1.1 载体和细胞 | 第16页 |
| 1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第17-19页 |
| 1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2 Raptor基因特异性沉默位点的选择及合成 | 第21-22页 |
| 2.3 靶向Raptor的sh RNA慢病毒表达载体构建与鉴定 | 第22页 |
| 2.4 氯化钙法制备感受态大肠杆菌 | 第22-23页 |
| 2.5 转化感受态大肠杆菌DH5α | 第23页 |
| 2.6 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.7 重组慢病毒载体的包装 | 第24页 |
| 2.8 确定嘌呤霉素对SKOV3细胞的最低致死浓度 | 第24-25页 |
| 2.9 慢病毒载体感染SKOV3细胞及嘌呤霉素筛选 | 第25页 |
| 2.10 细胞计数 | 第25页 |
| 2.11 MTT法测定细胞增殖 | 第25-26页 |
| 2.12 SKOV3细胞氨基酸饥饿刺激试验 | 第26页 |
| 2.13 免疫荧光共定位mTOR和LAMP2 | 第26-27页 |
| 2.14 Western Blot法检测蛋白的表达 | 第27-30页 |
| 2.15 统计学分析 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-42页 |
| 1 CAR抑制氨基酸诱导的SKOV3细胞增殖 | 第31页 |
| 2 CAR抑制SKOV3细胞Raptor蛋白表达 | 第31-32页 |
| 3 Raptor介导小豆蔻明抑制氨基酸激活mTORC1 | 第32-42页 |
| 3.1 干扰Raptor表达的SKOV3细胞株确认 | 第32-36页 |
| 3.1.1 重组慢病毒表达载体测序鉴定 | 第32-33页 |
| 3.1.2 嘌呤霉素浓度筛选 | 第33-34页 |
| 3.1.3 慢病毒感染SKOV3细胞效率 | 第34-35页 |
| 3.1.4 Lv-Raptor-shRNA感染SKOV3细胞Raptor蛋白表达 | 第35-36页 |
| 3.2 Raptor介导CAR抑制氨基酸诱导的SKOV3细胞增殖 | 第36-37页 |
| 3.3 Raptor介导CAR抑制氨基酸诱导的mTORC1活性 | 第37-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 综述 氨基酸调节mTORC1信号通路的研究进展 | 第50-57页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
