| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩略词 | 第13-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-32页 |
| 1.1 泛素-蛋白酶体途径 | 第15-23页 |
| 1.1.1 泛素化 | 第16-19页 |
| 1.1.2 蛋白酶体 | 第19-20页 |
| 1.1.3 植物泛素/26S蛋白酶体途径的生理功能 | 第20-22页 |
| 1.1.4 植物19S调控颗粒研究进展 | 第22-23页 |
| 1.2 脱落酸 | 第23-28页 |
| 1.2.1 脱落酸的合成 | 第23-24页 |
| 1.2.2 脱落酸与植物生长发育 | 第24-25页 |
| 1.2.3 植物脱落酸信号转导途径 | 第25-26页 |
| 1.2.4 蛋白酶体与植物脱落酸信号转导研究进展 | 第26-28页 |
| 1.3 拟南芥表皮毛形态建成 | 第28-30页 |
| 1.3.1 拟南芥表皮毛起始的调控 | 第28-29页 |
| 1.3.2 拟南芥植物表皮毛分支调控 | 第29页 |
| 1.3.3 植物激素在表皮毛形态建成中的作用 | 第29-30页 |
| 1.3.4 蛋白酶体与植物表皮毛形态建成研究进展 | 第30页 |
| 1.4 本论文工作设想 | 第30-32页 |
| 第2章 拟南芥RPN家族基因生物信息学分析 | 第32-43页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第32-34页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.2 拟南芥RPN家族蛋白质的基本性质分析 | 第32页 |
| 2.1.3 拟南芥RPN家族基因的染色体定位 | 第32-33页 |
| 2.1.4 拟南芥RPN家族基因的系统进化树构建 | 第33页 |
| 2.1.5 拟南芥RPN家族成员的基因结构分析 | 第33页 |
| 2.1.6 拟南芥RPN1a蛋白质结构域分析 | 第33页 |
| 2.1.7 启动子区域转录调控元件分析 | 第33页 |
| 2.1.8 蛋白质的一级结构分析 | 第33-34页 |
| 2.2 结果与分析 | 第34-42页 |
| 2.2.1 拟南芥RPN家族成员信息 | 第34页 |
| 2.2.2 拟南芥RPN家族成员的染色体定位 | 第34-35页 |
| 2.2.3 RPN家族成员的系统进化树 | 第35-37页 |
| 2.2.4 RPN家族成员的基因结构 | 第37页 |
| 2.2.5 水稻中RPN1a同源蛋白质的同源性分析 | 第37-38页 |
| 2.2.6 RPN1a启动子区域转录调控元件分析 | 第38-40页 |
| 2.2.7 RPN1a蛋白质的信号肽序列分析 | 第40页 |
| 2.2.8 RPN1a蛋白质跨膜结构域预测 | 第40-41页 |
| 2.2.9 RPN1a亲水/疏水性分析 | 第41-42页 |
| 2.3 本章小结 | 第42-43页 |
| 第3章 RPN1a相互作用蛋白质分析 | 第43-60页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第43-56页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第43-45页 |
| 3.1.2 仪器 | 第45页 |
| 3.1.3 拟南芥的种子消毒、春化以及植物培养 | 第45-47页 |
| 3.1.4 E.coil DH5α高效感受态制备 | 第47页 |
| 3.1.5 大肠杆菌转化 | 第47页 |
| 3.1.6 植物总RNA提取 | 第47-48页 |
| 3.1.7 植物总RNA逆转录成cDNA | 第48页 |
| 3.1.8 质粒提取 | 第48-49页 |
| 3.1.9 酶切片段的回收 | 第49页 |
| 3.1.10 基因克隆与目的载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.1.11 酵母质粒提取 | 第51-52页 |
| 3.1.12 酵母文库筛选 | 第52-54页 |
| 3.1.13 酵母双杂交质粒共转 | 第54-55页 |
| 3.1.14 双分子荧光(BiFC) | 第55-56页 |
| 3.2 结果与分析 | 第56-59页 |
| 3.2.1 酵母双杂交筛选文库寻找RPN1a互作蛋白质 | 第56-58页 |
| 3.2.2 RPN1a与ABA信号途径其他成员相互作用分析 | 第58-59页 |
| 3.3 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 拟南芥RPN1a突变体植株鉴定及表达分析 | 第60-70页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第60-64页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第60页 |
| 4.1.2 仪器 | 第60-61页 |
| 4.1.3 拟南芥种子的消毒、春化以及植物培养 | 第61页 |
| 4.1.4 植物基因组DNA提取 | 第61页 |
| 4.1.5 植物总RNA提取 | 第61页 |
| 4.1.6 植物总RNA逆转录成cDNA | 第61页 |
| 4.1.7 突变体鉴定引物的设计 | 第61-62页 |
| 4.1.8 拟南芥RPN1A T-DNA插入突变纯合子的鉴定 | 第62-63页 |
| 4.1.9 基因表达分析 | 第63-64页 |
| 4.2 结果与分析 | 第64-69页 |
| 4.2.1 拟南芥RPN1a的表达特异性分析 | 第64-66页 |
| 4.2.2 拟南芥RPN1A T-DNA插入纯合突变体的分子鉴定 | 第66-68页 |
| 4.2.3 RPN1a的mRNA水平调控因素分析 | 第68-69页 |
| 4.3 本章小结 | 第69-70页 |
| 第5章 RPN1a在ABA信号中功能的生化分析 | 第70-82页 |
| 5.1 实验材料与方法 | 第70-72页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第70页 |
| 5.1.2 仪器 | 第70-71页 |
| 5.1.3 拟南芥种子的消毒、春化以及植物培养 | 第71页 |
| 5.1.4 种子萌发率分析 | 第71页 |
| 5.1.5 根长分析 | 第71页 |
| 5.1.6 气孔观察与气孔孔径大小的测定 | 第71页 |
| 5.1.7 失水速率的测定 | 第71页 |
| 5.1.8 外源ABA胁迫处理 | 第71-72页 |
| 5.1.9 基因表达分析 | 第72页 |
| 5.1.10 总蛋白提取及Western blot分析 | 第72页 |
| 5.1.11 酵母双杂交质粒共转 | 第72页 |
| 5.1.12 数据显著性分析 | 第72页 |
| 5.2 结果与分析 | 第72-80页 |
| 5.2.1 施加ABA对RPN1a转录和表达的影响分析 | 第72-73页 |
| 5.2.2 RPN1a在种子萌发中的作用 | 第73-75页 |
| 5.2.3 ABA抑制RPN1A T-DNA插入突变体幼苗根的伸长 | 第75-76页 |
| 5.2.4 RPN1a突变对气孔关闭的影响 | 第76-78页 |
| 5.2.5 RPN1a对ABA及胁迫应答基因表达的影响 | 第78-79页 |
| 5.2.6 RPN1a功能缺失导致ABI5蛋白质的积累 | 第79页 |
| 5.2.7 RPN1a与ABI5相互作用分析 | 第79-80页 |
| 5.3 本章小结 | 第80-82页 |
| 第6章 RPN1a参与表皮毛形态建成的分子机制 | 第82-92页 |
| 6.1 实验材料与方法 | 第82-83页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第82页 |
| 6.1.2 仪器 | 第82页 |
| 6.1.3 拟南芥材料的处理与收集 | 第82-83页 |
| 6.1.4 总RNA提取 | 第83页 |
| 6.1.5 RNA逆转录成cDNA | 第83页 |
| 6.1.6 cDNA模板的检测 | 第83页 |
| 6.1.7 引物的设计合成 | 第83页 |
| 6.1.8 基因表达分析 | 第83页 |
| 6.2 结果与分析 | 第83-90页 |
| 6.2.1 RPN1a缺失促进莲座叶表皮毛形成 | 第83-85页 |
| 6.2.2 RPN1a缺失促进主茎上表皮毛形成 | 第85-86页 |
| 6.2.3 RPN1a表达部位分析 | 第86-87页 |
| 6.2.4 表皮毛生长发育关键基因的表达分析 | 第87-89页 |
| 6.2.5 RPN1a受到GA和CK下调 | 第89-90页 |
| 6.2.6 拟南芥RPN1a表皮毛发育作用模式图 | 第90页 |
| 6.3 本章小结 | 第90-92页 |
| 结论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-109页 |
| 附录A | 第109-113页 |
| 附录B (攻读博士学位期间发表的学术论文目录) | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
