| 缩略词表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 第一章 hTNFα /CHO基因工程细胞的构建及其蛋白分泌功能的检定 | 第18-29页 |
| 1 材料 | 第18-19页 |
| 1.1 载体及试剂 | 第18-19页 |
| 1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-23页 |
| 2.1 重组质粒的制备 | 第19-20页 |
| 2.2 重组质粒扩增和回收 | 第20-21页 |
| 2.3 细胞转染及稳定株筛选 | 第21-22页 |
| 2.4 细胞稳定株的鉴定 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-27页 |
| 3.1 GV141酶切电泳结果 | 第23页 |
| 3.2 hTNFα 基因PCR鉴定 | 第23-24页 |
| 3.3 重组质粒PCR产物的鉴定和阳性克隆测序 | 第24页 |
| 3.4 G418浓度筛选 | 第24页 |
| 3.5 hTNFα /CHO稳定转染细胞系的鉴定 | 第24-27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| 5 小结 | 第28-29页 |
| 第二章 APA-hTNFα /CHO细胞微囊对体外培养肿瘤细胞生长的抑制作用 | 第29-47页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 肿瘤细胞 | 第29页 |
| 1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-31页 |
| 2.1 微囊化h TNFα /CHO细胞及 0/CHO细胞的制备 | 第30页 |
| 2.2 肿瘤细胞种类、接种及培养 | 第30页 |
| 2.3 实验分组 | 第30-31页 |
| 2.4 实验方法及步骤 | 第31页 |
| 2.5 检测时间 | 第31页 |
| 2.6 统计学分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-45页 |
| 3.1 微囊化hTNFα /CHO细胞形态 | 第31-32页 |
| 3.2 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人肝癌细胞HEPG2生长的抑制作用 | 第32-33页 |
| 3.3 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人结肠癌细胞LOVO生长的抑制作用 | 第33-35页 |
| 3.4 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人宫颈癌细胞HELA生长的抑制作用 | 第35-36页 |
| 3.5 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人肺癌细胞H460生长的抑制作用 | 第36-38页 |
| 3.6 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人乳腺癌细胞MCF-7 生长的抑制作用 | 第38-39页 |
| 3.7 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人膀胱癌细胞T24生长的抑制作用 | 第39-41页 |
| 3.8 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人乳腺癌细胞T47D生长的抑制作用 | 第41-42页 |
| 3.9 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人肺腺癌细胞A549生长的抑制作用 | 第42-44页 |
| 3.10 体外培养下APA-hTNFα /CHO细胞微囊对人肾癌细胞ACHN生长的抑制作用 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 APA-hTNFα /CHO细胞微囊植入对裸鼠移植瘤生长的抑制效应 | 第47-58页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| 1.1 实验动物及饲养条件 | 第47页 |
| 1.2 肿瘤细胞 | 第47页 |
| 1.3 主要用品 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-49页 |
| 2.1 荷瘤鼠模型的的制备 | 第47页 |
| 2.2 APA-hTNFα /CHO细胞微囊及 0/CHO细胞微囊的制备 | 第47-48页 |
| 2.3 实验动物给药途径及分组说明 | 第48页 |
| 2.4 APA-hTNFα /CHO细胞微囊及 0/CHO细胞微囊的植入方法 | 第48页 |
| 2.5 观测指标 | 第48页 |
| 2.6 肿瘤标本的取材 | 第48页 |
| 2.7 统计学处理 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-57页 |
| 3.1 APA-hTNFα /CHO细胞微囊植入对荷人结肠癌细胞LOVO裸鼠移植瘤生长的抑制作用 | 第49-53页 |
| 3.2 APA-hTNFα /CHO细胞微囊植入对荷人肝癌细胞HEPG2裸鼠移植瘤生长的抑制作用 | 第53-57页 |
| 4 讨论 | 第57页 |
| 5 小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 附录Ⅰ质粒抽提剂盒使用说明书 | 第61-63页 |
| 附录Ⅱ hTNFα 蛋白ELISA试剂盒使用说明书 | 第63-65页 |
| 个人简介 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
