摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第9-11页 |
第一部分 牙龈间充质干细胞的分离、培养、鉴定和转染 | 第11-19页 |
材料与方法 | 第11-15页 |
1.实验材料 | 第11-12页 |
1.1 主要试剂耗材 | 第11-12页 |
1.2 实验仪器设备 | 第12页 |
2.实验方法 | 第12-15页 |
2.1 原代GMSCs的分离培养 | 第12页 |
2.2 细胞传代 | 第12-13页 |
2.3 GMSCs的鉴定 | 第13-14页 |
2.3.1 克隆形成率(CFU-F)分析 | 第13页 |
2.3.2 成脂诱导分化 | 第13页 |
2.3.3 成骨诱导分化 | 第13页 |
2.3.4 流式细胞术检测GMSCs表面标志物 | 第13-14页 |
2.4 携带GFP的慢病毒转染GMSCs | 第14-15页 |
2.4.1 确定最合适的感染复数 | 第14页 |
2.4.2 GMSCs的转染 | 第14-15页 |
结果 | 第15-18页 |
3.1 GMSCs形态学观察 | 第15页 |
3.2 克隆形成分析 | 第15页 |
3.3 成脂分化能力鉴定 | 第15-16页 |
3.4 成骨分化能力鉴定 | 第16页 |
3.5 流式细胞术检测 | 第16页 |
3.6 携GFP慢病毒感染GMSCs | 第16-18页 |
讨论 | 第18-19页 |
第二部分 系统移植的牙龈间充质干细胞对小鼠牙周炎的作用 | 第19-30页 |
材料与方法 | 第19-24页 |
1 实验材料 | 第19-20页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 主要试剂材料 | 第19-20页 |
1.3 仪器与设备 | 第20页 |
2 实验方法 | 第20-24页 |
2.1 牙周炎模型的制备 | 第20页 |
2.2 GMSCs的收集 | 第20页 |
2.3 GMSCs的系统移植 | 第20-21页 |
2.4 标本处理 | 第21-22页 |
2.4.1 循环内固定 | 第21页 |
2.4.2 外固定 | 第21页 |
2.4.3 亚甲蓝染色 | 第21-22页 |
2.4.4 组织脱矿处理 | 第22页 |
2.4.5 组织的脱水、包埋、切片 | 第22页 |
2.5 组织形态学观察 | 第22-23页 |
2.5.1 HE染色 | 第22页 |
2.5.2 MT染色 | 第22-23页 |
2.6 荧光显微镜直接观察 | 第23页 |
2.7 免疫组化染色 | 第23页 |
2.8 统计学分析 | 第23-24页 |
结果 | 第24-28页 |
3.1 实验动物体重变化 | 第24页 |
3.2 牙槽骨吸收水平 | 第24-25页 |
3.3 HE染色结果 | 第25-26页 |
3.4 MT染色结果 | 第26页 |
3.5 荧光显微镜直接观察结果 | 第26-27页 |
3.6 GFP免疫组化染色结果 | 第27-28页 |
讨论 | 第28-30页 |
结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-35页 |
综述 | 第35-46页 |
参考文献 | 第41-46页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |