| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1 核盘菌生防菌盾壳霉的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.1 核盘菌及油菜菌核病 | 第15页 |
| 1.2 盾壳霉的生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.3 盾壳霉的生态学特性 | 第16-17页 |
| 1.4 盾壳霉防治核盘菌的主要机制 | 第17-18页 |
| 1.5 盾壳霉的分子生物学研究 | 第18页 |
| 2 真菌抱子形成机理的研究 | 第18-19页 |
| 3 cAMP信号途径参与调控真菌产袍 | 第19-21页 |
| 3.1 cAMP信号调控途径概述 | 第19-20页 |
| 3.2 cAMP信号途径参与调控真菌产袍 | 第20页 |
| 3.3 磷酸核糖焦磷酸转酸胺酶(PRAT)的概述 | 第20-21页 |
| 4 病原侵染及病理防御反应中的信号转导研究进展 | 第21-22页 |
| 5 选题的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 盾壳霉产袍缺陷型突变体Z5-1T21828的基本生 物学性状研究 | 第23-31页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| 1.1 材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 菌株 | 第23页 |
| 1.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 1.2 方法 | 第24-25页 |
| 1.2.1 突变体ZS-1T21882的形态特征观察 | 第24页 |
| 1.2.2 突变体ZS-1T21882菌丝生长速度的测定 | 第24页 |
| 1.2.3 突变体ZS-1T21882在PDA培养基上产抗细菌物质能力测定 | 第24页 |
| 1.2.4 突变体ZS-1T21882在PDA上产抗真菌物质能力测定 | 第24-25页 |
| 1.2.5 核盘菌促使突变体ZS-1T21882恢复产孢 | 第25页 |
| 1.2.6 突变体ZS-1T21882寄生致腐核盘菌菌核能力测定 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.1 突变体ZS-1T21882的形态特征观察 | 第25-26页 |
| 2.2 突变体ZS-1T21882的菌丝生长速度测定 | 第26页 |
| 2.3 突变体ZS-1T21882丧失产生抗白叶枯病菌物质的能力 | 第26-27页 |
| 2.4 突变体ZS-1T21882丧失产抗真菌物质的能力 | 第27-28页 |
| 2.5 核盘菌促使突变体ZS-1T21882恢复产孢 | 第28-29页 |
| 2.6 突变体ZS-1T21882的寄生致腐菌核能力测定 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 盾壳霉产抱相关基因cmpart的gDNA克隆及序 列分析 | 第31-44页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| 1.1 材料 | 第31-32页 |
| 1.1.1 菌株、载体 | 第31页 |
| 1.1.2 培养基、试剂和抗生素 | 第31-32页 |
| 1.1.3 限制性内切酶及其它酶类、试剂盒 | 第32页 |
| 1.1.4 DNA分子量标记 | 第32页 |
| 1.2 方法 | 第32-37页 |
| 1.2.1 菌株ZS-1基因组总DNA提取 | 第32-33页 |
| 1.2.2 PCR扩增cmPrat基因genomic DNA | 第33页 |
| 1.2.3 Inverse-PCR扩增cmPrat基因gDNA侧翼序列 | 第33-35页 |
| 1.2.4 目的片段的回收及纯化 | 第35页 |
| 1.2.5 目的片段的连接和转化 | 第35-36页 |
| 1.2.6 重组质粒的提取、鉴定、保存和测序 | 第36页 |
| 1.2.7 克隆序列分析 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-42页 |
| 2.1 cmPrat基因genomic DNA的PCR扩增 | 第37页 |
| 2.2 cmPrat基因gDNA侧翼序列的Inverse-PCR扩增 | 第37-39页 |
| 2.3 cmPrat基因gDNA序列和侧翼序列全长及相关分析 | 第39-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 盾壳霉产抱相关基因cmPrat的功能验证 | 第44-68页 |
| 1 材料和方法 | 第44-58页 |
| 1.1 材料 | 第44-46页 |
| 1.1.1 菌株、载体 | 第44页 |
| 1.1.2 培养基、试剂 | 第44-45页 |
| 1.1.3 抗生素 | 第45页 |
| 1.1.4 杂交药品 | 第45-46页 |
| 1.1.5 试剂盒 | 第46页 |
| 1.2 方法 | 第46-58页 |
| 1.2.1 各种核苷酸对突变体ZS-1T21882孢子形成的互补作用 | 第46页 |
| 1.2.2 敲除载体pCMAMPRS3300的构建 | 第46-49页 |
| 1.2.3 含质粒pCMAMPRS3300农杆菌的获取和转化 | 第49-50页 |
| 1.2.4 cmPrat基因敲除转化子的生物学性状测定 | 第50页 |
| 1.2.5 cmPrat基因敲除转化子的PCR鉴定 | 第50-51页 |
| 1.2.6 cmPrat基因互补载体的构建 | 第51-53页 |
| 1.2.7 含质粒CPAMPRS农杆菌的获取及转化 | 第53-54页 |
| 1.2.8 cmPrat基因互补转化子的生物学性状测定 | 第54页 |
| 1.2.9 敲除转化子和互补转化子的suothem杂交鉴定 | 第54-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-67页 |
| 2.1 添加外源核苷酸对突变体ZS-1T21882产孢能力的恢复效果 | 第58-59页 |
| 2.2 敲除载体pCMAMPRS3300的构建及鉴定 | 第59页 |
| 2.3 含质粒pCMAMPRS3300的农杆菌获取及转化 | 第59-60页 |
| 2.3.1 含质粒pCMAMPRS3300的农杆菌获取及鉴定 | 第59-60页 |
| 2.3.2 农杆菌介导敲除载体转化盾壳霉菌株ZS-1 | 第60页 |
| 2.4 cmPrat基因敲除转化子的生物学性状测定 | 第60-62页 |
| 2.4.1 敲除转化子的形态特征观察 | 第60-61页 |
| 2.4.2 敲除转化子的菌丝生长速度测定 | 第61-62页 |
| 2.4.3 添加外源IMP促使敲除转化子恢复产孢 | 第62页 |
| 2.5 cmPrat基因敲除转化子的PCR鉴定 | 第62-63页 |
| 2.6 互补载体CPAMPRS的构建及鉴定 | 第63页 |
| 2.7 含质粒CPAMPRS农杆菌的获取及转化 | 第63-65页 |
| 2.7.1 含质粒CPAMPRS的农杆菌的获取及鉴定 | 第63页 |
| 2.7.2 农杆菌介导互补载体转化盾壳霉突变体菌株KO363 | 第63-65页 |
| 2.8 cmPrat基因互补转化子的生物学性状测定 | 第65页 |
| 2.8.1 互补转化子的的形态特征观察 | 第65页 |
| 2.8.2 互补转化子的菌丝生长速度测定 | 第65页 |
| 2.9 敲除转化子和互补转化子的southern杂交鉴定 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 核盘菌与盾壳霉在cAMP信号途径中的互作 | 第68-76页 |
| 1 材料和方法 | 第68-71页 |
| 1.1 材料 | 第68页 |
| 1.1.1 菌株 | 第68页 |
| 1.1.2 抗生素 | 第68页 |
| 1.2 方法 | 第68-71页 |
| 1.2.1 核盘菌腺甘酸环化酶基因沉默载体的构建 | 第68-69页 |
| 1.2.2 含质粒pSacRNAi3300农杆菌的获取及鉴定 | 第69-70页 |
| 1.2.3 农杆菌介导转化核盘菌菌株Ep-1PNA367 | 第70-71页 |
| 1.2.4 核盘菌Sac基因沉默转化子的形态特征观察 | 第71页 |
| 1.2.5 核盘菌Sac基因沉默转化子与突变体ZS-1T21882对峙培养观察 | 第71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-74页 |
| 2.1 核盘菌腺甘酸环化酶基因沉默载体的构建 | 第71-73页 |
| 2.2 含质粒pSacRNAi3300的农杆菌获取及鉴定 | 第73页 |
| 2.3 农杆菌介导转化核盘菌EP-1PNA367菌株 | 第73页 |
| 2.4 核盘菌Sac基因沉默转化子的形态特征观察 | 第73-74页 |
| 2.5 核盘菌Sac基因沉默转化子与突变体ZS-1T21882对峙培养观察 | 第74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 结论与展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
