| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第15-21页 |
| 1.1 抗球虫药作用机制 | 第15-16页 |
| 1.1.1 干扰虫体生物膜离子转运的药物 | 第15页 |
| 1.1.2 影响辅酶吸收和合成的药物 | 第15页 |
| 1.1.3 抑制虫体线粒体功能的药物 | 第15-16页 |
| 1.1.4 作用于虫体类质体的药物 | 第16页 |
| 1.1.5 抑制核酸合成的药物 | 第16页 |
| 1.2 耐药虫株的形成与鉴别 | 第16-17页 |
| 1.2.1 自发突变个体重复选择的结果 | 第16-17页 |
| 1.2.2 药物的选择压力 | 第17页 |
| 1.2.3 鉴别方法 | 第17页 |
| 1.3 耐药性产生的机制 | 第17-18页 |
| 1.3.1 细胞与亚细胞水平 | 第18页 |
| 1.3.2 代谢水平 | 第18页 |
| 1.3.3 分子水平 | 第18页 |
| 1.4 耐药性的延缓或解决措施 | 第18-20页 |
| 1.4.1 合理用药 | 第18-19页 |
| 1.4.2 新药研制 | 第19页 |
| 1.4.3 营养添加剂的抗球虫作用 | 第19页 |
| 1.4.4 中草药的开发 | 第19页 |
| 1.4.5 疫苗的作用 | 第19-20页 |
| 1.5 展望 | 第20-21页 |
| 第二章 柔嫩艾美耳球虫2个耐药株的耐药性评估 | 第21-26页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.2.2 饲料 | 第21页 |
| 2.2.3 试验药物 | 第21-22页 |
| 2.2.4 球虫来源 | 第22页 |
| 2.2.5 试验分组 | 第22页 |
| 2.2.6 试验步骤 | 第22页 |
| 2.2.7 耐药性判定方法及标准 | 第22-23页 |
| 2.3 结果 | 第23-24页 |
| 2.3.1 马杜拉霉素耐药株的测定 | 第23页 |
| 2.3.2 地克珠利耐药株的测定 | 第23-24页 |
| 2.3.3 敏感株球虫的测定 | 第24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 基于RNA-Seq的耐药株与敏感株的差异基因筛选及验证 | 第26-42页 |
| 3.1 引言 | 第26-27页 |
| 3.2 材料与方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第27页 |
| 3.2.2 实验虫株 | 第27页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第27页 |
| 3.2.4 主要实验所需仪器 | 第27-28页 |
| 3.2.5 3 个虫株3个不同批次孢子化卵囊的收集与纯化 | 第28页 |
| 3.2.6 3 个虫株各批次孢子化卵囊总RNA的抽提 | 第28页 |
| 3.2.7 cDNA文库的构建和Illumina HiSeq~(TM) 2000 测序 | 第28-29页 |
| 3.2.8 差异基因的验证 | 第29页 |
| 3.3 结果 | 第29-41页 |
| 3.3.1 3 个虫株孢子化卵囊的转录组测序 | 第29-33页 |
| 3.3.2 差异基因的筛选 | 第33-34页 |
| 3.3.3 差异基因功能分类 | 第34-40页 |
| 3.3.8 差异基因的验证 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 膜骨架蛋白1基因功能特性初步研究 | 第42-53页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 材料与方法 | 第42-46页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第42页 |
| 4.2.2 实验虫株、原核表达载体和细胞 | 第42页 |
| 4.2.3 实验所需主要试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.4 主要实验所需仪器 | 第43页 |
| 4.2.5 3 个不同虫株的收集与纯化 | 第43页 |
| 4.2.6 3 个虫株孢子化卵囊总RNA的抽提与cDNA的制备 | 第43-44页 |
| 4.2.7 EtIMC1的克隆与序列分析 | 第44页 |
| 4.2.8 重组蛋白EtIMC1的表达与纯化 | 第44页 |
| 4.2.9 EtIMC1重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第44-45页 |
| 4.2.10 EtIMC1在3个虫株转录水平的差异分析 | 第45页 |
| 4.2.11 EtIMC1在3个虫株蛋白质翻译水平的差异分析 | 第45页 |
| 4.2.12 EtIMC1在柔嫩艾美耳球虫入侵DF-1 细胞不同发育阶段的分布与定位分析 | 第45-46页 |
| 4.2.13 兔抗rEtIMC1多克隆抗体对球虫子孢子入侵DF-1 细胞的体外抑制分析 | 第46页 |
| 4.3 结果 | 第46-52页 |
| 4.3.1 DS、DZR、MRR孢子化卵囊总RNA的提取 | 第46页 |
| 4.3.2 EtIMC1基因的克隆和序列分析 | 第46-47页 |
| 4.3.3 rEtIMC1的诱导表达及其纯化 | 第47-48页 |
| 4.3.4 EtIMC1在3个虫株孢子化卵囊的转录水平差异分析 | 第48-49页 |
| 4.3.5 3 个虫株EtIMC1蛋白翻译水平的分析 | 第49-50页 |
| 4.3.6 EtIMC1天然蛋白的间接免疫荧光定位 | 第50页 |
| 4.3.7 兔抗rEtIMC1多克隆抗体对子孢子入侵DF-1 细胞的体外抑制实验 | 第50-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 全文总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
