| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-17页 |
| 1.1 巴贝斯虫病简介 | 第13页 |
| 1.2 醛酮还原酶的研究 | 第13-16页 |
| 1.3 小结与展望 | 第16-17页 |
| 第二章 田鼠巴贝斯虫AKR的基因克隆和分析 | 第17-28页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.2.2 实验虫株 | 第17页 |
| 2.2.3 试剂及其制备 | 第17页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-21页 |
| 2.3.1 血涂片制备和染虫率统计 | 第18页 |
| 2.3.2 B.microti的冻存与传代 | 第18页 |
| 2.3.3 B.microti总RNA提取及cDNA的合成 | 第18-19页 |
| 2.3.4 BmAKR1与BmAKR2部分序列扩增 | 第19-20页 |
| 2.3.5 BmAKR 5'端和 3'端快速扩增 | 第20-21页 |
| 2.3.6 全长序列分析 | 第21页 |
| 2.4 结果分析 | 第21-27页 |
| 2.4.1 染虫率观察与统计 | 第21-22页 |
| 2.4.2 田鼠巴贝斯虫转录组数据库筛选 | 第22页 |
| 2.4.3 BmAKR1和BmAKR2全长cDNA序列及推测的氨基酸序列 | 第22-24页 |
| 2.4.4 BmAKR1和BmAKR2基因结构示意图 | 第24-25页 |
| 2.4.5 蛋白基本信息分析 | 第25-26页 |
| 2.4.6 BmAKR1和BmAKR2的同源性分析 | 第26-27页 |
| 2.5 讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 BmAKR的原核表达与鉴定 | 第28-39页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 实验材料 | 第28页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第28页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28-33页 |
| 3.3.1 表达质粒构建 | 第28-29页 |
| 3.3.2 重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第29-30页 |
| 3.3.3 多克隆抗体的制备 | 第30页 |
| 3.3.4 天然BmAKR分子的Western-Blot鉴定 | 第30-31页 |
| 3.3.5 BmAKR分子的亚细胞定位 | 第31页 |
| 3.3.6 不同感染时期BmAKR相对表达水平 | 第31-32页 |
| 3.3.7 不同感染时期小鼠的抗BmAKR抗体表达水平 | 第32-33页 |
| 3.3.8 统计学分析 | 第33页 |
| 3.4 结果分析 | 第33-37页 |
| 3.4.1 蛋白表达纯化结果 | 第33-34页 |
| 3.4.2 Western Blot鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.4.3 BmAKR的亚细胞定位结果 | 第35-36页 |
| 3.4.4 红细胞期不同感染时期两种BmAKR相对表达水平 | 第36-37页 |
| 3.4.5 感染后不同时期的抗BmAKR抗体水平检测 | 第37页 |
| 3.5 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 BmAKR1抗氧化功能研究 | 第39-45页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 实验材料和仪器 | 第39-40页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第39页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第39-40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-41页 |
| 4.3.1 田鼠巴贝斯虫体外培养 | 第40页 |
| 4.3.2 田鼠巴贝斯虫体外培养活力测定 | 第40页 |
| 4.3.3 模拟氧化应激 | 第40-41页 |
| 4.3.4 统计学分析 | 第41页 |
| 4.4 结果分析 | 第41-44页 |
| 4.4.1 标准曲线的建立 | 第41-42页 |
| 4.4.2 活力测定 | 第42-43页 |
| 4.4.3 在氧化应激条件下BmAKR1相对表达水平上调 | 第43-44页 |
| 4.5 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 常用抗虫药物对BmARK1基因转录的影响 | 第45-50页 |
| 5.1 引言 | 第45页 |
| 5.2 实验材料和仪器 | 第45-46页 |
| 5.2.1 主要实验材料 | 第45-46页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第46页 |
| 5.3 实验方法 | 第46-47页 |
| 5.3.1 田鼠巴贝斯虫体外培养 | 第46页 |
| 5.3.2 抗虫药物处理 | 第46页 |
| 5.3.3 统计学分析 | 第46-47页 |
| 5.4 实验结果 | 第47-49页 |
| 5.4.1 青蒿素处理结果 | 第47页 |
| 5.4.2 奎宁处理结果 | 第47-48页 |
| 5.4.3 阿托伐醌处理结果 | 第48页 |
| 5.4.4 氯苯胍处理结果 | 第48-49页 |
| 5.5 讨论 | 第49-50页 |
| 第六章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
