中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9页 |
英文缩写词表 | 第13-15页 |
前言 | 第15-17页 |
文献回顾 | 第17-31页 |
一、 B19病毒的发现及其特征 | 第17-18页 |
二、 B19病毒与人类疾病 | 第18-23页 |
三、 B19病毒的研究方法 | 第23-26页 |
四、 B19病毒基因变异研究 | 第26-30页 |
五、 NS基因及蛋白的研究 | 第30-31页 |
材料和方法 | 第31-41页 |
Ⅰ 材料 | 第31-34页 |
一、 研究对象 | 第31页 |
二、 病毒来源 | 第31页 |
三、 试剂 | 第31-32页 |
四、 主要仪器设备 | 第32页 |
五、 几种有关化学试剂的配制 | 第32-34页 |
Ⅱ 方法 | 第34-41页 |
一、 血标本DNA提取 | 第34-35页 |
二、 PCR反应及结果观察 | 第35-36页 |
三、 基因克隆 | 第36-40页 |
(一) PCR产物的纯化 | 第36页 |
(二) 大肠杆菌JM109的增菌 | 第36-37页 |
(三) 大肠杆菌JM109感受态的制备 | 第37页 |
(四) DNA片段添A反应 | 第37-38页 |
(五) NS基因目的片段与pGEM-T载体的连接 | 第38页 |
(六) 重组DNA的转化 | 第38-39页 |
(七) 质粒的提取 | 第39页 |
(八) 酶切及鉴定 | 第39-40页 |
四、 核苷酸测序 | 第40-41页 |
结果 | 第41-46页 |
一、 PCR扩增HPV B19 NS基因的结果 | 第41-43页 |
二、 HPV B19 NS测序结果 | 第43-44页 |
三、 HPV B19 NS-pGEM-T、NSD-pGEM-T重组质粒的构建 | 第44-46页 |
讨论 | 第46-51页 |
一、 B19病毒基因变异性及其流行病学意义 | 第46-48页 |
二、 B19病毒基因克隆技术的建立及其应用价值 | 第48-51页 |
小结 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-65页 |
附图 | 第65-73页 |