大熊猫和朱鹮胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的克隆及表达研究
| 一 摘要 | 第4-6页 |
| 二 综述 | 第6-14页 |
| 三 前言 | 第14-16页 |
| 四 材料与方法 | 第16-24页 |
| 1. 材料 | 第16页 |
| 2. 方法 | 第16-24页 |
| 2.1 DNA的提取 | 第16-17页 |
| 2.2 PCR引物的设计 | 第17页 |
| 2.3 PCR扩增 | 第17页 |
| 2.4 PCR产物的克隆 | 第17-19页 |
| 2.5 序列测定 | 第19页 |
| 2.6 表达载体的构建 | 第19-21页 |
| 2.7 重组蛋白的小量诱导表达 | 第21页 |
| 2.8 重组蛋白的SDS—PAGE检测 | 第21-22页 |
| 2.9 重组蛋白的溶解性分析 | 第22页 |
| 2.10 重组蛋白的大规模诱导表达及纯化 | 第22-23页 |
| 2.11 融合蛋白的酶切 | 第23页 |
| 2.12 Western blot | 第23-24页 |
| 五 结果 | 第24-33页 |
| 1. 大熊猫和朱鹮GDNF成熟蛋白基因的克隆 | 第24-25页 |
| 2. 大熊猫和朱鹮GDNF的序列测定和分析 | 第25-28页 |
| 3. 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| 4. 重组蛋白的小量诱导表达 | 第29-30页 |
| 5. 重组蛋白的溶解性分析 | 第30页 |
| 6. 重组蛋白的大规模诱导表达、纯化及鉴定 | 第30-32页 |
| 7. Western blot | 第32-33页 |
| 六 讨论 | 第33-38页 |
| 七 参考文献 | 第38-46页 |
| 八 致谢 | 第46页 |