摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 引言 | 第15-23页 |
1.1.1 山鸡椒研究概况 | 第15-17页 |
1.1.2 萜类化合物 | 第17-20页 |
1.1.3 1-脱氧木酮糖5磷酸还原异构酶(DXR)研究进展 | 第20-23页 |
1.2 研究目的意义及主要内容 | 第23-25页 |
1.2.1 研究的目的意义 | 第23页 |
1.2.2 研究的主要内容 | 第23-24页 |
1.2.3 研究的技术路线 | 第24-25页 |
第二章 山鸡椒 1-脱氧木酮糖5磷酸还原异构酶基因DXR全长cDNA的克隆 | 第25-39页 |
2.1 材料与方法 | 第25-31页 |
2.1.1 材料 | 第25页 |
2.1.2 试剂及仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 实验方法 | 第26-31页 |
2.2 结果与分析 | 第31-37页 |
2.2.1 山鸡椒DXR的cDNA全长扩增 | 第31-32页 |
2.2.2 重组子PCR验证 | 第32页 |
2.2.3 重组子的测序及序列分析 | 第32-33页 |
2.2.4 多序列比对及进化树分析 | 第33-35页 |
2.2.5 LcDXR保守结构域分析 | 第35页 |
2.2.6 LcDXR氨基酸组成及理化性质预测 | 第35-36页 |
2.2.7 LcDXR的二级结构分析 | 第36页 |
2.2.8 LcDXR三级结构预测 | 第36-37页 |
2.3 讨论 | 第37-38页 |
2.4 小结 | 第38-39页 |
第三章 山鸡椒DXR基因的原核表达 | 第39-60页 |
3.1 材料与方法 | 第39-46页 |
3.1.1 实验材料 | 第39页 |
3.1.2 试剂及仪器 | 第39-41页 |
3.1.3 方法 | 第41-46页 |
3.2 结果与分析 | 第46-57页 |
3.2.1 原核表达载体pET-28a-LcDXR的构建 | 第46-47页 |
3.2.2 表达LcDXR蛋白的重组菌的筛选 | 第47-51页 |
3.2.3 重组蛋白LcDXR的可溶性鉴定 | 第51-52页 |
3.2.4 增加蛋白可溶性的探索 | 第52-55页 |
3.2.5 LcDXR的纯化与复性 | 第55页 |
3.2.6 LcDXR的Western Blot鉴定 | 第55-56页 |
3.2.7 LcDXR的活性鉴定 | 第56-57页 |
3.3 讨论 | 第57-59页 |
3.4 小结 | 第59-60页 |
第四章 植物表达载体的构建及烟草的转化 | 第60-72页 |
4.1 材料与方法 | 第60-66页 |
4.1.1 实验材料 | 第60页 |
4.1.2 试剂及仪器 | 第60-62页 |
4.1.3 实验方法 | 第62-66页 |
4.2 结果与分析 | 第66-70页 |
4.2.1 植物表达载体pCAMBIA1301-LcDXR的构建 | 第66-67页 |
4.2.2 农杆菌pCAMBIA1301-LcDXR/EHA105的鉴定 | 第67-68页 |
4.2.3 转基因烟草的培养 | 第68-69页 |
4.2.4 转基因烟草的PCR鉴定 | 第69-70页 |
4.3 讨论 | 第70-71页 |
4.4 小结 | 第71-72页 |
第五章 结论与展望 | 第72-74页 |
5.1 结论 | 第72-73页 |
5.2 展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
在读期间学术研究 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |