| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一部分 紫草素对甲状腺癌TT细胞凋亡的作用及机制的研究响 | 第13-35页 |
| 一、紫草素对甲状腺癌TT细胞增殖及凋亡的检测 | 第13-22页 |
| (一) 实验材料与方法 | 第13-22页 |
| 1. 实验细胞系 | 第13页 |
| 2. 实验药品 | 第13页 |
| 3. 实验器材 | 第13-17页 |
| (1) 主要试剂 | 第13-14页 |
| (2) 主要仪器 | 第14-15页 |
| (3) 细胞培养基及主要溶液的配置 | 第15-17页 |
| 4. 实验方法 | 第17-22页 |
| (1) 甲状腺癌TT细胞培养与传代 | 第17页 |
| (2) MTT法测定紫草素对甲状腺癌TT细胞增殖抑制率 | 第17页 |
| (3) 流式细胞仪检测甲状腺癌TT细胞周期 | 第17-18页 |
| (4) 流式细胞仪结合PI及AnnexinⅤ-FITC双标记染色测定TT细胞凋亡 | 第18页 |
| (5) 透射电镜样品制备与观察细胞凋亡的形态 | 第18-19页 |
| (6) 流式细胞仪检测线粒体膜电位的改变 | 第19页 |
| (7) Real-time PCR检测凋亡相关基因变化 | 第19-21页 |
| (8) Western blotting分析紫草素对Bcl-2家族蛋白caspases酶的表达的影响 | 第21-22页 |
| (9) 统计学处理 | 第22页 |
| 二、结果 | 第22-26页 |
| (一) 紫草素对甲状腺癌TT细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
| (二) 流式细胞仪检测甲状腺癌TT细胞的周期 | 第23页 |
| (三) 流式细胞仪结合PI及AnnexinV-FITC双标记染色测定TT细胞凋亡 | 第23页 |
| (四) 透射电镜样品制备与观察TT细胞凋亡的形态 | 第23-24页 |
| (五) 流式细胞仪检测线粒体膜电位的改变 | 第24页 |
| (六) Real-time PCR检测凋亡相关基因变化 | 第24-26页 |
| (七) Western blotting分析紫草素对Bcl-2家族蛋白及caspases酶的表达的影响 | 第26页 |
| 三、分析与讨论 | 第26-34页 |
| (一) MTT法检测紫草素对人T T细胞增殖的影响 | 第30页 |
| (二) 流式细胞仪检测甲状腺癌TT细胞的周期 | 第30-31页 |
| (三) 流式细胞仪结合P E及AnnexinV-FITC双标记染色测定TT细胞凋亡 | 第31-32页 |
| (四) 透射电镜观察T T细胞凋亡的形态变化 | 第32页 |
| (五) 紫草素对T T细胞线粒体膜电位及线粒体形态的影响 | 第32-33页 |
| (六) 紫草素对T T细胞Bcl-2家族蛋白的影响 | 第33页 |
| (七) 紫草素对T T细胞Bcl-2家族蛋白的影响caspases酶的影响 | 第33-34页 |
| 四、小结 | 第34-35页 |
| 第二部分 紫草素诱导人甲状腺癌T T细胞自噬的实验研究 | 第35-44页 |
| 一 紫草素诱导人甲状腺癌细胞自臨的检测 | 第35-37页 |
| (一) 实验材料与方法 | 第35-37页 |
| 1. 实验细胞系 | 第35页 |
| 2. 实验药品 | 第35页 |
| 3. 实验器材 | 第35页 |
| (1) 主要试剂 | 第35页 |
| (2) 主要仪器 | 第35页 |
| 4. 实验方法 | 第35-37页 |
| (1) 透射电镜样品制备与观察TT细胞自噬的形态 | 第35-36页 |
| (2) Western blotting检测自噬标志物Beclin1和LC3蛋白的表达 | 第36-37页 |
| (3) 荧光显微镜观察LC3的点状聚集 | 第37页 |
| 二、结果 | 第37-38页 |
| (一) 透射电镜样品制备与观察TT细胞自噬的形态 | 第37页 |
| (二) Western blotting检测自噬标志物Beclinl和LC3蛋白的表达 | 第37-38页 |
| (三) 荧光显微镜观察GFP—LC3的点状聚集 | 第38页 |
| 三、分析与讨论 | 第38-43页 |
| (一) 透射电镜样品制备与观察TT细胞自噬的形态 | 第41-42页 |
| (二) Western blotting检测自噬标志物Beclin1和LC3蛋白的表达 | 第42页 |
| (三) 荧光显微镜观察GFP—LC3的点状聚集 | 第42-43页 |
| 四、小结 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附图 | 第51-62页 |
| 附录 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 文献综述 | 第73-83页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
