摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
·引言 | 第11页 |
·大豆基因工程研究与应用发展趋势 | 第11-12页 |
·大豆遗传转化方法 | 第12-16页 |
·农杆菌介导法 | 第12-14页 |
·基因枪法 | 第14-15页 |
·花粉管通道法 | 第15页 |
·其它几种方法 | 第15-16页 |
·大豆转化受体系统 | 第16-18页 |
·器官发生系统 | 第16-17页 |
·体细胞胚胎发生系统 | 第17页 |
·原生质体发生系统 | 第17-18页 |
·植物耐低磷胁迫研究进展 | 第18-22页 |
·植物耐低磷胁迫相关基因的研究进展 | 第18页 |
·植物耐低磷胁迫相关microRNA 研究进展 | 第18-22页 |
·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 大豆 MIR398A、MIR399 及 GMSODC 基因克隆和功能验证 | 第23-34页 |
·试验材料 | 第23页 |
·供试品种 | 第23页 |
·供试菌株 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·方法 | 第23-25页 |
·靶基因预测 | 第23-24页 |
·植物基因组的提取 | 第24页 |
·PCR 扩增 | 第24页 |
·片段连接克隆载体及测序 | 第24页 |
·转化农杆菌 | 第24页 |
·大豆遗传转化 | 第24-25页 |
·表型观察 | 第25页 |
·结果与分析 | 第25-32页 |
·基因克隆与序列分析 | 第25-27页 |
·植物表达载体的构建与验证 | 第27-28页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第28-29页 |
·大豆发状根转化 | 第29页 |
·基因功能验证 | 第29-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
·发根农杆菌介导的遗传转化 | 第32-33页 |
·发根农杆菌转化受体 | 第33-34页 |
第三章 根癌农杆菌介导 MICRORNA398 靶基因 GMSODC 及 MICRORNA399 转化大豆 | 第34-45页 |
·试验材料 | 第34-35页 |
·供试品种 | 第34页 |
·供试菌株 | 第34页 |
·试剂 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-37页 |
·植物表达载体的构建与酶切鉴定 | 第35页 |
·转化农杆菌 | 第35页 |
·大豆遗传转化 | 第35-37页 |
·结果与分析 | 第37-43页 |
·植物表达载体的构建与验证 | 第37-38页 |
·农杆菌转化验证 | 第38-39页 |
·大豆转化 | 第39-40页 |
·T0 代PCR 检测 | 第40-41页 |
·T1 代PCR 检测 | 第41-42页 |
·荧光定量PCR | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·目的基因的选择 | 第43页 |
·植物表达载体构建的方法 | 第43-44页 |
·目的基因的选择 | 第44页 |
·大豆的转化方法 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附录 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |