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低磷胁迫响应microRNA及靶基因的克隆和大豆遗传转化研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·引言第11页
   ·大豆基因工程研究与应用发展趋势第11-12页
   ·大豆遗传转化方法第12-16页
     ·农杆菌介导法第12-14页
     ·基因枪法第14-15页
     ·花粉管通道法第15页
     ·其它几种方法第15-16页
   ·大豆转化受体系统第16-18页
     ·器官发生系统第16-17页
     ·体细胞胚胎发生系统第17页
     ·原生质体发生系统第17-18页
   ·植物耐低磷胁迫研究进展第18-22页
     ·植物耐低磷胁迫相关基因的研究进展第18页
     ·植物耐低磷胁迫相关microRNA 研究进展第18-22页
   ·本研究的目的及意义第22-23页
第二章 大豆 MIR398A、MIR399 及 GMSODC 基因克隆和功能验证第23-34页
   ·试验材料第23页
     ·供试品种第23页
     ·供试菌株第23页
     ·试剂第23页
   ·方法第23-25页
     ·靶基因预测第23-24页
     ·植物基因组的提取第24页
     ·PCR 扩增第24页
     ·片段连接克隆载体及测序第24页
     ·转化农杆菌第24页
     ·大豆遗传转化第24-25页
     ·表型观察第25页
   ·结果与分析第25-32页
     ·基因克隆与序列分析第25-27页
     ·植物表达载体的构建与验证第27-28页
     ·植物表达载体转化农杆菌第28-29页
     ·大豆发状根转化第29页
     ·基因功能验证第29-32页
   ·讨论第32-34页
     ·发根农杆菌介导的遗传转化第32-33页
     ·发根农杆菌转化受体第33-34页
第三章 根癌农杆菌介导 MICRORNA398 靶基因 GMSODC 及 MICRORNA399 转化大豆第34-45页
   ·试验材料第34-35页
     ·供试品种第34页
     ·供试菌株第34页
     ·试剂第34-35页
   ·方法第35-37页
     ·植物表达载体的构建与酶切鉴定第35页
     ·转化农杆菌第35页
     ·大豆遗传转化第35-37页
   ·结果与分析第37-43页
     ·植物表达载体的构建与验证第37-38页
     ·农杆菌转化验证第38-39页
     ·大豆转化第39-40页
     ·T0 代PCR 检测第40-41页
     ·T1 代PCR 检测第41-42页
     ·荧光定量PCR第42-43页
   ·讨论第43-45页
     ·目的基因的选择第43页
     ·植物表达载体构建的方法第43-44页
     ·目的基因的选择第44页
     ·大豆的转化方法第44-45页
结论第45-46页
参考文献第46-51页
附录第51-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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