| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-18页 |
| ·蜱的概述 | 第13-14页 |
| ·蜱抗凝血分子研究概况 | 第14页 |
| ·RNA 干扰技术在蜱研究中的应用 | 第14-17页 |
| ·本研究的基础 | 第17-18页 |
| 第二章 抗凝血分子在昆虫细胞中的表达 | 第18-41页 |
| ·前言 | 第18页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-29页 |
| ·真核重组载体 Rhipilin-1-pFast HTA、Rhipilin-2-pFast HTA 的构建 | 第20-23页 |
| ·重组质粒转化至 DH10Bac | 第23页 |
| ·重组杆粒的抽提及鉴定 | 第23-24页 |
| ·转染 | 第24页 |
| ·转染后 PCR 鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白的 SDS-PAGE | 第25页 |
| ·Western blotting 和间接免疫荧光试验 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白 Rhipilin-2 的纯化、透析 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白 Rhipilin-2 蛋白活性研究 | 第27-29页 |
| ·结果 | 第29-39页 |
| ·真核重组载体Rhipilin-1-pFast HTA 和 Rhipilin-2-pFast HTA 的构建 | 第29-30页 |
| ·重组杆粒 Rhipilin-1-Bacmid 以及 Rhipilin-2-Bacmid 的抽提及鉴定 | 第30-32页 |
| ·重组杆粒转染sf9 细胞后的 PCR 鉴定 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白的免疫荧光鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白 Western blotting 检测 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白 Rhipilin-2 蛋白活性研究结果 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·杆状病毒表达系统的选择 | 第39页 |
| ·部分凝血酶活化时间和凝血酶原时间测定 | 第39-40页 |
| ·蛋白酶酶活抑制试验 | 第40-41页 |
| 第三章 抗凝血分子的 RNA 干扰研究 | 第41-50页 |
| ·前言 | 第41页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第41-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·镰形扇头蜱的饲养 | 第43页 |
| ·dsRNA 的合成 | 第43-45页 |
| ·显微注射 | 第45页 |
| ·RNA 干扰的荧光定量 PCR 分析 | 第45-46页 |
| ·干扰结果观察分析 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-48页 |
| ·dsRNA 的合成 | 第46-47页 |
| ·干扰效果监测 | 第47页 |
| ·干扰结果 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
