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应激诱导对牛卵母细胞成熟和凋亡的影响及金属硫蛋白基因的初步研究

摘要第1-7页
 Abstract第7-14页
第一章 文献综述第14-23页
   ·细胞凋亡概述第14-20页
     ·诱导细胞凋亡的因素第15页
     ·细胞凋亡的分子机制第15-18页
     ·卵母细胞的凋亡第18-20页
     ·细胞凋亡的检测方法第20页
   ·氯化镉(CdC1_2)对雌性生殖细胞凋亡的影响第20-21页
   ·紫外线对雌性生殖细胞的影响第21页
   ·活性氧(ROS)对生殖细胞凋亡的影响第21-22页
   ·金属硫蛋白第22页
   ·本研究的内容和意义第22-23页
第二章 氯化镉对牛卵母细胞体外成熟及凋亡的影响第23-36页
   ·试验材料第23-25页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·主要试剂及配制第24-25页
   ·试验方法第25-27页
     ·卵母细胞的采集第25页
     ·卵母细胞的体外成熟第25页
     ·卵母细胞的体外成熟的鉴定第25页
     ·不同浓度CdC1_2 处理的成熟卵母细胞早期凋亡检测第25页
     ·不同浓度CdC1_2 处理的成熟卵母细胞Ca~(2+)分布及相对荧光强度检测第25页
     ·不同浓度CdC1_2 处理的成熟卵母细胞线粒体膜电位检测第25页
     ·RT-PCR 检测Bcl-2 和Bax 基因的相对表达第25-27页
     ·数据分析第27页
   ·结果与分析第27-34页
     ·不同浓度的CdC1_2 对卵母细胞成熟及凋亡的影响第27-29页
     ·不同浓度的CdC1_2 处理的成熟卵母细胞的Ca~(2+)分布及相对荧光强度的检测第29-31页
     ·不同浓度的CdC1_2 处理的成熟卵母细胞线粒体膜电位的检测第31-33页
     ·RT-PCR 检测Bcl-2 和Bax 基因的相对表达第33-34页
   ·讨论第34-36页
第三章 紫外线对牛卵母细胞体外成熟及凋亡的影响第36-46页
   ·试验材料第36页
     ·主要仪器设备第36页
     ·主要试剂及配制第36页
   ·试验方法第36-37页
     ·卵母细胞的采集、体外培养成熟第36页
     ·紫外线对卵母细胞照射不同的时间后对其早期凋亡的检测第36页
     ·紫外线对卵母细胞照射不同的时间后对其Ca~(2+)强度的检测第36页
     ·紫外线对卵母细胞照射不同的时间后对其线粒体膜电位的检测第36页
     ·紫外线对卵母细胞照射不同的时间后对其相关凋亡基因的检测第36-37页
     ·数据分析第37页
   ·结果与分析第37-44页
     ·紫外线对卵母细胞成熟及凋亡的影响第37-39页
     ·紫外线照射卵母细胞不同时间后其Ca~(2+)分布及相对荧光强度的检测第39-41页
     ·紫外线照射卵母细胞不同时间后其线粒体膜电位的检测第41-43页
     ·紫外线照射卵母细胞不同时间后卵母细胞中Bcl-2 和Bax 基因的相对表达.第43-44页
   ·讨论第44-46页
第四章 H_20_2对牛卵母细胞体外成熟及凋亡的影响第46-59页
   ·试验材料第46-47页
     ·主要仪器设备第46页
     ·主要试剂及配制第46-47页
   ·试验方法第47-48页
     ·卵母细胞的采集、体外培养成熟第47页
     ·不同浓度H_20_2 处理的卵母细胞的早期凋亡的检测第47页
     ·不同浓度H_20_2 处理的卵母细胞的TUNEL 染色第47页
     ·不同浓度H_20_2 处理的卵母细胞的Ca~(2+)强度的检测第47页
     ·不同浓度H_20_2 处理的卵母细胞的线粒体膜电位的检测第47页
     ·不同浓度H_20_2 处理的卵母细胞中的Bcl-2 和Bax 基因的相对表达第47页
     ·数据分析第47-48页
   ·结果与分析第48-57页
     ·不同浓度H_20_2 处理的卵母细胞的早期凋亡的检测第48-50页
     ·不同浓度的H_20_2 处理的成熟卵母细胞的TUNEL 染色第50-52页
     ·不同浓度的H_20_2 处理的成熟卵母细胞的Ca~(2+)分布及相对荧光强度的检测..第52-54页
     ·不同浓度的H_20_2 处理的成熟卵母细胞线粒体膜电位的检测第54-56页
     ·RT-PCR 检测H_20_2 处理的成熟卵母细胞中Bcl-2 和Bax 基因的相对表达第56-57页
   ·讨论第57-59页
第五章 牛金属硫蛋白(MT)基因的初步研究第59-69页
   ·试验材料第59-60页
     ·试验材料第59页
     ·主要仪器及设备第59页
     ·主要软件及生物学数据库第59-60页
     ·主要试剂第60页
   ·试验方法第60-64页
     ·MT 基因CDS 区的克隆第60-63页
     ·MT 基因CDS 区真核载体的构建第63-64页
   ·结果第64-67页
     ·MT 基因CDS 区的克隆第64-65页
     ·序列分析第65-66页
     ·MT 基因真核表达载体的构建第66-67页
   ·讨论第67-69页
     ·目的基因的克隆第67-68页
     ·过表达载体的构建第68-69页
第六章 全文结论第69-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-77页
作者简历第77页

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