| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写词 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-36页 |
| 1.1 研究耐盐作物对全球农业环境的意义 | 第10页 |
| 1.2 盐胁迫对植物的影响 | 第10-12页 |
| 1.3 植物对盐耐受机制 | 第12-17页 |
| 1.3.1 维持离子稳态和渗透平衡 | 第12-15页 |
| 1.3.2 胁迫伤害控制和修复 | 第15-16页 |
| 1.3.3 盐胁迫环境下植物的生长调节 | 第16-17页 |
| 1.4 钙离子在细胞内的重要作用 | 第17-29页 |
| 1.4.1 植物对外界信号的感受及钙离子表征的产生 | 第19-23页 |
| 1.4.2 钙信号的传递及各种钙信号通路上的传感元件 | 第23-28页 |
| 1.4.3 钙信号通路与其它胁迫信号通路之间的交叉机制 | 第28-29页 |
| 1.5 aequorin荧光蛋白在钙信号相关研究中的作用 | 第29-34页 |
| 1.5.1 如何检测内源性钙离子 | 第29-30页 |
| 1.5.2 aequorin荧光蛋白的发现和发光机理 | 第30-31页 |
| 1.5.3 aequorin蛋白的cDNA克隆及体外表达 | 第31-32页 |
| 1.5.4 细胞内钙离子相对浓度的换算方法 | 第32页 |
| 1.5.5 细胞内定位表达和在植物中的应用 | 第32-34页 |
| 1.5.6 aequorin荧光蛋白检测技术的优缺点 | 第34页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 材料和方法 | 第36-47页 |
| 2.1 植物材料和生长条件 | 第36页 |
| 2.2 T-DNA插入突变体库 | 第36页 |
| 2.3 aequorin生物荧光检测 | 第36-37页 |
| 2.4 NCA1基因克隆 | 第37-39页 |
| 2.4.1 TAIL-PCR | 第37-38页 |
| 2.4.2 nca1突变体纯杂合鉴定 | 第38-39页 |
| 2.5 RT-PCR测定NCA1基因的表达量变化 | 第39-41页 |
| 2.5.1 Trizol法提取拟南芥总RNA | 第39-40页 |
| 2.5.2 反转录合成cDNA(RT) | 第40页 |
| 2.5.3 扩增目的基因片段(PCR) | 第40-41页 |
| 2.6 载体构建 | 第41-45页 |
| 2.6.1 PCR扩增NCA1基因全长cDNA编码序列 | 第41-42页 |
| 2.6.2 TOPO& | 第42页 |
| 2.6.3 转化One Shot& | 第42页 |
| 2.6.4 大肠杆菌质粒的提取 | 第42-43页 |
| 2.6.5 Gateway& | 第43页 |
| 2.6.6 农杆菌感受态细胞的制备和外源基因转化 | 第43-44页 |
| 2.6.7 农杆菌质粒的提取 | 第44-45页 |
| 2.7 GFP与NCA1基因融合 | 第45页 |
| 2.8 构建NCA1启动子表达GUS基因载体 | 第45-46页 |
| 2.9 生理表型测定 | 第46页 |
| 2.10 NCA1基因补偿和过表达实验 | 第46页 |
| 2.11 数据统计分析 | 第46-47页 |
| 第三章 实验结果 | 第47-61页 |
| 3.1 拟南芥T-DNA插入突变体库中筛选得到nca1 | 第47-48页 |
| 3.2 nca1特异性对NA~+盐胁迫不敏感表型 | 第48-49页 |
| 3.3 克隆得到NCA1并对基因进行鉴定分析 | 第49-50页 |
| 3.4 NCA1亚细胞定位分析 | 第50-51页 |
| 3.5 NCA1基因组织定位表达 | 第51-52页 |
| 3.6 nca1生理表型分析 | 第52-54页 |
| 3.7 NCA1基因互补和过表达植株表型分析 | 第54-57页 |
| 3.8 NCA1预测功能位点突变植株表型 | 第57-58页 |
| 3.9 NCA1在盐胁迫信号通路上的相关分析 | 第58-60页 |
| 3.10 nc81-1本底钙水平测定 | 第60-61页 |
| 第四章 讨论和结论 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-82页 |
| 在学期间的研究成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
