| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 文献综述 NF-κB 的介绍与研究进展 | 第10-17页 |
| 实验研究 | 第17-62页 |
| 第一章 NF-κB基因在感染鸭机体组织中的转录表达研究 | 第17-31页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 实验动物 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-23页 |
| 2.1 引物设计合成与稀释 | 第18-19页 |
| 2.2 DEV的接种与增殖 | 第19-20页 |
| 2.3 病毒PCR检测 | 第20页 |
| 2.4 总RNA提取及cDNA合成 | 第20-21页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR反应 | 第21-22页 |
| 2.6 数据处理分析 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-29页 |
| 3.1 病毒PCR检测结果 | 第23页 |
| 3.2 总RNA的检测 | 第23-24页 |
| 3.3 FQ-PCR产物的特异性分析 | 第24-26页 |
| 3.4 NF-κB基因的组织表达谱 | 第26-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 4.1 关于细胞信号通路 | 第29页 |
| 4.2 关于NF-κB信号通路 | 第29-30页 |
| 4.3 关于NF-κB基因在各组织中的相对表达情况 | 第30-31页 |
| 第二章 DEV感染对宿主细胞NF-κB信号通路的影响研究 | 第31-49页 |
| 1 材料 | 第32页 |
| 1.1 实验动物、细胞及毒株 | 第32页 |
| 1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-35页 |
| 2.1 鸭胚成纤维细胞的制备与培养 | 第32-33页 |
| 2.2 DEV感染DEF原代细胞 | 第33页 |
| 2.3 细胞及上清的收取 | 第33页 |
| 2.4 病毒的检测 | 第33-34页 |
| 2.5 细胞总RNA提取 | 第34页 |
| 2.6 cDNA合成 | 第34页 |
| 2.7 荧光定量PCR反应体系及程序 | 第34页 |
| 2.8 NF-κB信号通路关键因子的检测 | 第34-35页 |
| 2.9 数据统计分析 | 第35页 |
| 3 结果 | 第35-47页 |
| 3.1 DEV-NP基因检测 | 第35-36页 |
| 3.2 DEF细胞中NF-κB基因的转录水平 | 第36-39页 |
| 3.3 相关基因及细胞因子的ELISA检测结果 | 第39-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 4.1 细胞因子与病毒感染 | 第47-48页 |
| 4.2 关于ELISA技术在检测中的应用 | 第48页 |
| 4.3 关于DEV感染对宿主细胞NF-κB信号通路的影响研究 | 第48-49页 |
| 第三章 NF-κB基因shRNA干扰重组质粒的构建与鉴定 | 第49-62页 |
| 1 材料 | 第49-50页 |
| 1.1 主要试剂 | 第49-50页 |
| 1.3 主要仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-53页 |
| 2.1 靶向NF-κB基因的shRNA设计与寡核苷酸合成 | 第50-51页 |
| 2.2 shRNA模板的退火 | 第51页 |
| 2.3 pGPU6/GFP/Neo载体的线性化 | 第51-52页 |
| 2.4 pGPU6/GFP/Neo shRNA干扰表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-59页 |
| 3.1 shRNA的设计与寡核苷酸的合成 | 第53-55页 |
| 3.2 pGPU6/GFP/Neo shRNA重组质粒的鉴定 | 第55页 |
| 3.3 pGPU6/GFP/Neo shRNA重组质粒的测序结果 | 第55-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.1 关于RNAi的作用机制 | 第59页 |
| 4.2 关于RNAi的方法和载体 | 第59-60页 |
| 4.3 关于RNAi的应用 | 第60-62页 |
| 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
