| 个人简历 | 第3-8页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 第一部分 基于公共数据的肝癌S100A8荟萃分析与生存分析 | 第19-25页 |
| 1 前言 | 第19页 |
| 2 研究对象与方法 | 第19-22页 |
| 2.1 公共数据库荟萃分析 | 第19-21页 |
| 1) 文献数据检索 | 第19-20页 |
| 2) 入选与排除标准 | 第20页 |
| 3) 数据提取 | 第20页 |
| 4) 统计学处理 | 第20-21页 |
| 2.2 公共数据库生存分析 | 第21-22页 |
| 1) 数据下载及筛选 | 第21页 |
| 2) 数据分组及统计 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-25页 |
| 3.1 荟萃分析检索结果 | 第22页 |
| 3.2 荟萃分析结果 | 第22-23页 |
| 3.3 发表偏倚 | 第23页 |
| 3.4 敏感性分析 | 第23-24页 |
| 3.5 公共数据库生存分析结果 | 第24-25页 |
| 第二部分 S100A8甲基化在原发性肝细胞癌及癌旁组织中的验证 | 第25-37页 |
| 1 前言 | 第25页 |
| 2 材料及方法 | 第25-35页 |
| 2.1 组织标本 | 第25-26页 |
| 2.2 主要仪器设备及试剂耗材 | 第26-28页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 主要耗材及试剂 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.3.1 实验组织DNA提取与DNA定量 | 第28-29页 |
| 2.3.2 DNA Bisulfite转化及浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）与产物的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 琼脂糖水平凝胶电泳鉴定 PCR 产物（1.5%） | 第31-32页 |
| 2.3.5 焦磷酸测序 | 第32-34页 |
| 2.3.6 ROC曲线 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-37页 |
| 3.1 PCR产物鉴定结果 | 第35页 |
| 3.2 焦磷酸测序结果 | 第35-36页 |
| 3.3 焦磷酸测序法比较HCC与癌旁组织平均甲基化表达水平 | 第36页 |
| 3.4 ROC曲线分析 | 第36-37页 |
| 第三部分 S100A8在肝癌细胞中的表达及功能研究 | 第37-64页 |
| 1 前言 | 第37页 |
| 2 载体信息及实验方法 | 第37-58页 |
| 2.1 载体质粒信息 | 第37-38页 |
| 2.2 主要仪器设备及试剂耗材 | 第38-41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.3.1 LB培养基配置 | 第41-42页 |
| 2.3.2 转化 | 第42-43页 |
| 2.3.3 摇菌扩增 | 第43页 |
| 2.3.4 无内毒素质粒抽提 | 第43-44页 |
| 2.3.5 细胞培养 | 第44-45页 |
| 2.3.6 细胞冻存 | 第45页 |
| 2.3.7 最适嘌呤霉素抗生素浓度筛选 | 第45-46页 |
| 2.3.8 慢病毒包装 | 第46-47页 |
| 2.3.9 慢病毒液浓缩及滴度测定 | 第47-49页 |
| 2.4 最适慢病毒量梯度实验 | 第49-56页 |
| 2.4.1 S100A8过表达及沉默慢病毒载体侵染Huh7、97H细胞 | 第49页 |
| 2.4.2 Western blot验证 | 第49-50页 |
| 2.4.4 BCA Protein Assay Kit测定蛋白的浓度 | 第50页 |
| 2.4.5 SDS-PAGE电泳 | 第50-52页 |
| 2.4.6 转膜 | 第52-53页 |
| 2.4.7 实时荧光定量PCR | 第53-55页 |
| 2.4.8 Cell Counting Kit-8 细胞增殖检测 | 第55-56页 |
| 2.4.9 细胞划痕实验 | 第56页 |
| 2.5 Transwell小室侵袭实验 | 第56-58页 |
| 2.5.1 Transwell 小室铺胶 | 第56-57页 |
| 2.5.2 Transwell 小室种细胞 | 第57页 |
| 2.5.3 流式细胞凋亡检测 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-64页 |
| 3.1 LB平板转化 | 第58页 |
| 3.2 最佳药物浓度筛选结果 | 第58页 |
| 3.3 最适病毒量 | 第58-59页 |
| 3.4 慢病毒稳定筛选 | 第59页 |
| 3.5 Huh7-S100A8、97H-S100A8细胞系中S100A8的蛋白水平 | 第59-60页 |
| 3.6 Huh7-S100A8、97H-S100A8细胞系中S100A8的mRNA水平 | 第60-61页 |
| 3.7 Cell Counting Kit-8 细胞增殖检测结果 | 第61-62页 |
| 3.8 细胞划痕实验 | 第62页 |
| 3.9 细胞侵袭实验（Transwell小室侵袭实验） | 第62-63页 |
| 3.10 流式细胞凋亡检测 | 第63-64页 |
| 第四部分 裸鼠成瘤实验 | 第64-67页 |
| 1 前言 | 第64页 |
| 2 实验材料及试剂 | 第64-66页 |
| 2.1 实验动物 | 第64页 |
| 2.2 主要仪器及试剂耗材 | 第64-65页 |
| 2.3 实验方法 | 第65-66页 |
| 3 结果 | 第66-67页 |
| 3.1 裸鼠成瘤情况 | 第66-67页 |
| 讨论 | 第67-70页 |
| 全文小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第五部分 综述S100蛋白家族与肿瘤关系研究进展 | 第74-87页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第88-89页 |
| 1 发表论文列举 | 第88-89页 |
| 2 发明专利 | 第89页 |
