摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
符号与缩略语说明 | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 阿特拉津简介 | 第11页 |
2 阿特拉津造成的危害 | 第11-12页 |
3 环境中阿特拉津残留的标准 | 第12-13页 |
4 微生物对阿特拉津降解的途径及相关基因 | 第13-18页 |
·阿特拉津降解途径 | 第13-15页 |
·阿特拉津相关降解酶及基因 | 第15-18页 |
5 基因工程菌的构建及应用 | 第18-21页 |
·基因工程菌的构建思路及关键因素 | 第19-20页 |
·基因工程菌的应用前景 | 第20-21页 |
6 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 阿特拉津降解菌的分离和生物学特性研究 | 第23-31页 |
1 材料与方法 | 第23-27页 |
·培养基和试剂 | 第23页 |
·降解菌株的分离 | 第23-24页 |
·降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第24页 |
·降解菌株16S rRNA基因序列的扩增及测序 | 第24-26页 |
·降解菌株系统发育地位的确定 | 第26页 |
·菌体生长量的测定 | 第26页 |
·阿特拉津的含量测定 | 第26-27页 |
2 结果与讨论 | 第27-29页 |
·阿特拉津降解菌株的分离 | 第27页 |
·降解菌株X-4的菌落形态及生理生化特征 | 第27-28页 |
·菌株X-4的16S rRNA基因扩增 | 第28-29页 |
3 小结 | 第29-31页 |
第三章 菌株X-4生长特性和降解特性研究 | 第31-41页 |
1 材料与方法 | 第31页 |
·供试菌株 | 第31页 |
·培养基 | 第31页 |
·菌体生长量的测定方法 | 第31页 |
·阿特拉津含量测定 | 第31页 |
·种子液制备 | 第31页 |
2 结果与讨论 | 第31-38页 |
·温度对菌株X-4生长的影响 | 第31-32页 |
·初始pH对菌株X-4生长的影响 | 第32页 |
·通气量对菌株X-4生长的影响 | 第32-33页 |
·NaCl浓度对菌株X-4生长的影响 | 第33-34页 |
·不同碳源对菌株X-4生长的影响 | 第34页 |
·不同氮源对菌株X-4生长的影响 | 第34-35页 |
·菌株X-4对抗生素的耐受性 | 第35页 |
·菌株X-4的生长和阿特拉津降解的关系 | 第35-36页 |
·阿特拉津起始浓度对菌株X-4降解阿特拉津的影响 | 第36页 |
·接种量对菌株X-4降解阿特拉津的影响 | 第36页 |
·不同金属离子对菌株X-4降解阿特拉津的影响 | 第36-37页 |
·温度对菌株X-4降解阿特拉津的影响 | 第37-38页 |
3 菌株X-4中阿特拉津降解酶基因的初步扩增 | 第38-39页 |
4 小结 | 第39-41页 |
第四章 阿特拉津关键降解酶基因克隆及基因簇的构建 | 第41-57页 |
1 材料与方法 | 第41-46页 |
·培养基与试剂 | 第41页 |
·所用菌株与质粒 | 第41页 |
·PCR产物的纯化及T/A克隆 | 第41页 |
·质粒DNA的提取和感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
·pUCatzABC的构建策略 | 第42-43页 |
·pUCatzA、pUCatzB、pUCatzC的构建 | 第43-44页 |
·构建pUCatzAB | 第44-45页 |
·构建pUCatzABC | 第45页 |
·验证pUCatzABC的功能 | 第45-46页 |
2 结果与讨论 | 第46-56页 |
·构建pUCatzA、pUCatzB、pUCatzC | 第46-50页 |
·构建pUCatzAB | 第50-53页 |
·构建pUCatzABC | 第53-55页 |
·验证pUCatzABC的功能 | 第55-56页 |
3 小结 | 第56-57页 |
全文总结 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第65-67页 |
附录二 相关DNA序列 | 第67-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77页 |