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温度胁迫下小麦脱水蛋白WZY2的功能及其K片段调控研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第13-25页
    1.1 脱水蛋白的研究现状第14-16页
        1.1.1 脱水蛋白的定义与结构第14-15页
        1.1.2 脱水蛋白的分类第15-16页
        1.1.3 脱水蛋白保守元件的功能第16页
    1.2 脱水蛋白的定位第16-18页
        1.2.1 脱水蛋白组织水平的定位第17页
        1.2.2 脱水蛋白亚细胞水平的定位第17-18页
    1.3 温度胁迫相关的脱水蛋白第18-22页
        1.3.1 低温胁迫相关的脱水蛋白第18-20页
        1.3.2 低温胁迫下脱水蛋白的作用机制第20-22页
        1.3.3 高温胁迫相关的脱水蛋白第22页
    1.4 本研究的目的和意义第22-25页
第二章 不同胁迫下小麦脱水蛋白WZY2及其重组蛋白对大肠杆菌活力的影响第25-47页
    2.1 材料第25-26页
        2.1.1 载体与菌种第25页
        2.1.2 主要试剂与设备第25-26页
    2.2 方法第26-29页
        2.2.1 构建脱水蛋白WZY2及其重组蛋白的表达载体第26-28页
        2.2.2 WZY2及其重组蛋白的生物信息学分析第28页
        2.2.3 原核细胞表达条件筛选第28-29页
        2.2.4 对表达WZY2及其重组蛋白的大肠杆菌的多种胁迫第29页
        2.2.5 数据统计分析第29页
    2.3 结果第29-44页
        2.3.1 WZY2及其重组蛋白表达载体构建与表达条件确定第29-31页
        2.3.2 WZY2及其重组蛋白的生物信息学分析第31-35页
        2.3.3 温度胁迫下WZY2及其重组蛋白对大肠杆菌活力的影响第35-36页
        2.3.4 过氧化胁迫下WZY2及其重组蛋白对大肠杆菌活力的影响第36-37页
        2.3.5 金属离子胁迫下WZY2及其重组蛋白对大肠杆菌活力的影响第37-44页
    2.4 讨论第44-47页
第三章 温度胁迫下小麦脱水蛋白WZY2及其重组蛋白对乳酸脱氢酶的保护作用第47-55页
    3.1 材料第47页
        3.1.1 载体与菌种第47页
        3.1.2 主要试剂与设备第47页
    3.2 方法第47-48页
        3.2.1 WZY2及其重组蛋白的提取和纯化第47-48页
        3.2.2 WZY2及其重组蛋白对LDH的保护功能分析第48页
        3.2.3 数据统计分析第48页
    3.3 结果第48-51页
        3.3.1 WZY2及其重组蛋白的提取和纯化第48-49页
        3.3.2 低温胁迫下WZY2及其重组蛋白对LDH保护的影响第49-50页
        3.3.3 高温胁迫下WZY2及其重组蛋白对LDH保护的影响第50-51页
    3.4 讨论第51-55页
第四章 低温胁迫下小麦脱水蛋白WZY2及其重组蛋白在细胞内的分布和动态变化第55-65页
    4.1 材料第55-56页
        4.1.1 载体与菌种第55页
        4.1.2 植物材料第55页
        4.1.3 主要试剂与设备第55-56页
    4.2 方法第56-57页
        4.2.1 构建脱水蛋白WZY2及其重组蛋白的亚细胞定位载体第56页
        4.2.2 培育小麦幼苗第56页
        4.2.3 基因枪法转化小麦叶表皮细胞第56-57页
        4.2.4 低温胁迫下观察脱水蛋白WZY2及其重组蛋白的定位和动态变化第57页
    4.3 结果第57-61页
        4.3.1 脱水蛋白WZY2及其重组蛋白亚细胞定位载体构建第57-58页
        4.3.2 脱水蛋白WZY2的亚细胞定位第58-59页
        4.3.3 WZY2在冬小麦和春小麦叶表皮细胞内不同的动态变化第59-60页
        4.3.4 WZY2重组蛋白在冬小麦和春小麦叶表皮细胞内不同的动态变化第60-61页
    4.4 讨论第61-65页
第五章 低温胁迫下小麦脱水蛋白WZY2在不同类型小麦中的表达特征第65-77页
    5.1 材料第65页
        5.1.1 植物材料第65页
        5.1.2 主要试剂与设备第65页
    5.2 方法第65-67页
        5.2.1 培养小麦幼苗第65-66页
        5.2.2 低温复温处理小麦幼苗第66页
        5.2.3 提取RNA第66页
        5.2.4 反转录合成cDNA第66页
        5.2.5 实时荧光定量PCR第66-67页
        5.2.6 植物总蛋白提取第67页
        5.2.7 West blot分析第67页
        5.2.8 数据统计分析第67页
    5.3 结果第67-73页
        5.3.1 小麦地上部和地下部的RNA提取与cDNA反转录第67-68页
        5.3.2 小麦地上部和地下部的总蛋白提取与Weatern blot分析第68页
        5.3.3 低温和复温处理下WZY2和WZY2在冬小麦不同组织中的相对表达量第68-71页
        5.3.4 低温和复温处理下WZY2和WZY2在春小麦不同组织中的相对表达量第71-73页
    5.4 讨论第73-77页
第六章 小麦脱水蛋白WZY2与DHN14和WCOR80的对比第77-85页
    6.1 材料第77页
        6.1.1 载体与菌种第77页
        6.1.2 主要试剂与设备第77页
    6.2 方法第77-78页
        6.2.1 构建脱水蛋白DHN14和WCOR80的表达载体第77-78页
        6.2.2 脱水蛋白DHN14和WCOR80的生物信息学分析第78页
    6.3 结果第78-82页
        6.3.1 脱水蛋白DHN14和WCOR80表达载体构建第78-79页
        6.3.2 脱水蛋白WZY2与DHN14的对比第79-81页
        6.3.3 脱水蛋白WZY2与WCOR80的对比第81-82页
    6.4 讨论第82-85页
第七章 结论第85-89页
参考文献第89-99页
缩略词表第99-101页
致谢第101-103页
作者简介第103页

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