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玉米骨干自交系体细胞胚胎发生相关基因的表达及蛋白质组学研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-9页
英文缩写词第14-15页
第一章 文献综述第15-31页
    1.1 体细胞胚胎及其受体系统第15-16页
    1.2 体细胞胚胎发生的研究进展第16-17页
    1.3 体细胞胚胎发生的影响因素第17-21页
        1.3.1 基因型第17-18页
        1.3.2 外植体第18页
        1.3.3 培养基第18-19页
        1.3.4 植物激素第19-20页
        1.3.5 其他因素第20-21页
    1.4 体细胞胚发生和形态建成的胚胎学和细胞学研究第21页
    1.5 体细胞胚胎发生过程中的关键基因第21-24页
        1.5.1 激素响应基因第22-23页
        1.5.2 信号转导基因第23页
        1.5.3 转录因子第23-24页
    1.6 植物体细胞胚胎发生的蛋白质组学研究第24-26页
    1.7 分离差异表达基因技术第26-28页
        1.7.1 抑制性差减杂交(SSH)第26页
        1.7.2 DNA微阵列(DNA microarray)第26-27页
        1.7.3 c DNA-AFLP技术第27-28页
    1.8 蛋白质组分析方法第28-30页
        1.8.1 双向电泳(2-DE,two-dimensional electrophoresis)第28-29页
        1.8.2 同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ,isobaric tags forrelative and absolute quantitation)第29-30页
    1.9 本研究的目的和意义第30-31页
第二章 玉米体细胞胚胎发生和形态建成的组织学研究第31-41页
    2.1 实验材料第31页
    2.2 实验方法第31-35页
        2.2.1 体细胞胚胎诱导及分化第31-32页
        2.2.2 组织学结构研究第32-34页
        2.2.3 表面细胞组织方式研究第34-35页
        2.2.4 数据统计与图像分析第35页
    2.3 结果与分析第35-39页
        2.3.1 体细胞胚胎的诱导及分化第35-36页
        2.3.2 玉米体细胞胚胎发育的组织结构研究第36-38页
        2.3.3 体细胞胚胎表面细胞组织方式研究第38-39页
    2.4 讨论第39-40页
    2.5 结论第40-41页
第三章 玉米体细胞胚胎发生相关基因表达分析第41-71页
    3.1 实验材料第41页
    3.2 实验方法第41-53页
        3.2.1 化学试剂、酶及试剂盒第41-42页
        3.2.2 试剂配制第42页
        3.2.3 实验引物第42-44页
        3.2.4 总RNA的提取第44-45页
        3.2.5 c DNA第一条链的合成第45页
        3.2.6 c DNA第二条链的合成第45-46页
        3.2.7 c DNA-AFLP分析第46-50页
        3.2.8 差异片段的回收、测序第50-52页
        3.2.9 差异片段序列分析及同源性比较第52页
        3.2.10 q RT-PCR验证第52-53页
    3.3 结果与分析第53-67页
        3.3.1 差异表达基因的获得第53-55页
        3.3.2 差异表达基因的回收及分析第55-64页
        3.3.3 差异表达基因的功能分析第64-65页
        3.3.4 候选基因q RT-PCR验证第65-67页
    3.4 讨论第67-69页
    3.5 结论第69-71页
第四章 体细胞胚胎相关基因的克隆及分析第71-85页
    4.1 实验材料第71页
    4.2 实验方法第71-73页
        4.2.1 菌种和载体第71页
        4.2.2 RNA的提取和c DNA的合成第71页
        4.2.3 电子克隆Zm SUF4和Zm DRP3A的CDS序列第71页
        4.2.4 Zm SUF4和Zm DRP3A的CDS区扩增第71-72页
        4.2.5 目的片段的回收、连接及测序第72页
        4.2.6 生物信息学分析第72-73页
    4.3 结果与分析第73-82页
        4.3.1 电子克隆第73-74页
        4.3.2 目的基因克隆第74-79页
        4.3.3 序列分析第79-82页
    4.4 讨论第82-83页
    4.5 结论第83-85页
第五章 玉米体细胞胚胎蛋白质组分析第85-113页
    5.1 实验材料第85页
    5.2 实验方法第85-89页
        5.2.1 化学试剂、酶及试剂盒第85页
        5.2.2 试剂配制第85页
        5.2.3 总蛋白的提取第85-86页
        5.2.4 蛋白质定量第86页
        5.2.5 蛋白质酶解第86-87页
        5.2.6 i TRAQ标记第87页
        5.2.7 SCX分离第87页
        5.2.8 LC-ESI-MSMS分析第87-88页
        5.2.9 数据分析第88-89页
        5.2.10 候选基因转录水平验证第89页
    5.3 结果与分析第89-108页
        5.3.1 蛋白质鉴定第89-91页
        5.3.2 差异蛋白统计第91-92页
        5.3.3 差异蛋白的COG分析第92-95页
        5.3.4 差异表达蛋白的WEGO分析第95-96页
        5.3.5 差异蛋白的Pathway分析第96-107页
        5.3.6 候选基因转录水平验证第107-108页
    5.4 讨论第108-110页
    5.5 结论第110-113页
第六章 全文结论第113-115页
参考文献第115-133页
作者简介第133-135页
博士期间发表的论文及参加的课题第135-136页
致谢第136页

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