中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩写词 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-31页 |
1.1 体细胞胚胎及其受体系统 | 第15-16页 |
1.2 体细胞胚胎发生的研究进展 | 第16-17页 |
1.3 体细胞胚胎发生的影响因素 | 第17-21页 |
1.3.1 基因型 | 第17-18页 |
1.3.2 外植体 | 第18页 |
1.3.3 培养基 | 第18-19页 |
1.3.4 植物激素 | 第19-20页 |
1.3.5 其他因素 | 第20-21页 |
1.4 体细胞胚发生和形态建成的胚胎学和细胞学研究 | 第21页 |
1.5 体细胞胚胎发生过程中的关键基因 | 第21-24页 |
1.5.1 激素响应基因 | 第22-23页 |
1.5.2 信号转导基因 | 第23页 |
1.5.3 转录因子 | 第23-24页 |
1.6 植物体细胞胚胎发生的蛋白质组学研究 | 第24-26页 |
1.7 分离差异表达基因技术 | 第26-28页 |
1.7.1 抑制性差减杂交(SSH) | 第26页 |
1.7.2 DNA微阵列(DNA microarray) | 第26-27页 |
1.7.3 c DNA-AFLP技术 | 第27-28页 |
1.8 蛋白质组分析方法 | 第28-30页 |
1.8.1 双向电泳(2-DE,two-dimensional electrophoresis) | 第28-29页 |
1.8.2 同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ,isobaric tags forrelative and absolute quantitation) | 第29-30页 |
1.9 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 玉米体细胞胚胎发生和形态建成的组织学研究 | 第31-41页 |
2.1 实验材料 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-35页 |
2.2.1 体细胞胚胎诱导及分化 | 第31-32页 |
2.2.2 组织学结构研究 | 第32-34页 |
2.2.3 表面细胞组织方式研究 | 第34-35页 |
2.2.4 数据统计与图像分析 | 第35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-39页 |
2.3.1 体细胞胚胎的诱导及分化 | 第35-36页 |
2.3.2 玉米体细胞胚胎发育的组织结构研究 | 第36-38页 |
2.3.3 体细胞胚胎表面细胞组织方式研究 | 第38-39页 |
2.4 讨论 | 第39-40页 |
2.5 结论 | 第40-41页 |
第三章 玉米体细胞胚胎发生相关基因表达分析 | 第41-71页 |
3.1 实验材料 | 第41页 |
3.2 实验方法 | 第41-53页 |
3.2.1 化学试剂、酶及试剂盒 | 第41-42页 |
3.2.2 试剂配制 | 第42页 |
3.2.3 实验引物 | 第42-44页 |
3.2.4 总RNA的提取 | 第44-45页 |
3.2.5 c DNA第一条链的合成 | 第45页 |
3.2.6 c DNA第二条链的合成 | 第45-46页 |
3.2.7 c DNA-AFLP分析 | 第46-50页 |
3.2.8 差异片段的回收、测序 | 第50-52页 |
3.2.9 差异片段序列分析及同源性比较 | 第52页 |
3.2.10 q RT-PCR验证 | 第52-53页 |
3.3 结果与分析 | 第53-67页 |
3.3.1 差异表达基因的获得 | 第53-55页 |
3.3.2 差异表达基因的回收及分析 | 第55-64页 |
3.3.3 差异表达基因的功能分析 | 第64-65页 |
3.3.4 候选基因q RT-PCR验证 | 第65-67页 |
3.4 讨论 | 第67-69页 |
3.5 结论 | 第69-71页 |
第四章 体细胞胚胎相关基因的克隆及分析 | 第71-85页 |
4.1 实验材料 | 第71页 |
4.2 实验方法 | 第71-73页 |
4.2.1 菌种和载体 | 第71页 |
4.2.2 RNA的提取和c DNA的合成 | 第71页 |
4.2.3 电子克隆Zm SUF4和Zm DRP3A的CDS序列 | 第71页 |
4.2.4 Zm SUF4和Zm DRP3A的CDS区扩增 | 第71-72页 |
4.2.5 目的片段的回收、连接及测序 | 第72页 |
4.2.6 生物信息学分析 | 第72-73页 |
4.3 结果与分析 | 第73-82页 |
4.3.1 电子克隆 | 第73-74页 |
4.3.2 目的基因克隆 | 第74-79页 |
4.3.3 序列分析 | 第79-82页 |
4.4 讨论 | 第82-83页 |
4.5 结论 | 第83-85页 |
第五章 玉米体细胞胚胎蛋白质组分析 | 第85-113页 |
5.1 实验材料 | 第85页 |
5.2 实验方法 | 第85-89页 |
5.2.1 化学试剂、酶及试剂盒 | 第85页 |
5.2.2 试剂配制 | 第85页 |
5.2.3 总蛋白的提取 | 第85-86页 |
5.2.4 蛋白质定量 | 第86页 |
5.2.5 蛋白质酶解 | 第86-87页 |
5.2.6 i TRAQ标记 | 第87页 |
5.2.7 SCX分离 | 第87页 |
5.2.8 LC-ESI-MSMS分析 | 第87-88页 |
5.2.9 数据分析 | 第88-89页 |
5.2.10 候选基因转录水平验证 | 第89页 |
5.3 结果与分析 | 第89-108页 |
5.3.1 蛋白质鉴定 | 第89-91页 |
5.3.2 差异蛋白统计 | 第91-92页 |
5.3.3 差异蛋白的COG分析 | 第92-95页 |
5.3.4 差异表达蛋白的WEGO分析 | 第95-96页 |
5.3.5 差异蛋白的Pathway分析 | 第96-107页 |
5.3.6 候选基因转录水平验证 | 第107-108页 |
5.4 讨论 | 第108-110页 |
5.5 结论 | 第110-113页 |
第六章 全文结论 | 第113-115页 |
参考文献 | 第115-133页 |
作者简介 | 第133-135页 |
博士期间发表的论文及参加的课题 | 第135-136页 |
致谢 | 第136页 |