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水稻包穗基因ESP2的表达与功能分析

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
引言第10-11页
文献综述第11-21页
    1 水稻包穗的研究进展第11-16页
        1.1 水稻的包穗现象第11-12页
        1.2 水稻包穗基因的研究现状第12页
        1.3 水稻矮杆突变体的研究进展第12-14页
        1.4 磷脂酰丝氨酸合成酶的生物学特性第14-15页
        1.5 磷脂酰丝氨酸合成酶的研究进展第15-16页
    2 植物基因功能验证的一般方法第16-21页
        2.1 功能互补实验第16-17页
        2.2 RNA干扰第17页
        2.3 基因的过量表达与RT-PCR第17-19页
        2.4 转基因植株的检测方法第19-21页
材料与方法第21-29页
    1 实验材料第21页
        1.1 植物材料第21页
        1.2 本试验所用载体第21页
        1.3 常用分子生物学试剂第21页
    2 实验方法第21-29页
        2.1 生物信息学分析的工具第21-22页
        2.2 载体构建第22-24页
            2.2.1 pESP2:GUS表达载体构建第22-23页
            2.2.2 Ubi:ESP2过量表达载体的构建第23-24页
            2.2.3 RT-PCR分析转基因植株中ESP2的表达第24页
        2.3 农杆菌介导的水稻遗传转化第24-26页
            2.3.1 传统侵染成熟胚愈伤的方法第24-26页
                2.3.1.1 接种第25页
                2.3.1.2 掐芽第25页
                2.3.1.3 继代第25页
                2.3.1.4 农杆菌介导的水稻遗传转化第25-26页
                2.3.1.5 抗性愈伤的继代筛选与再生植株第26页
            2.3.2 培养基第26页
        2.4 GUS基因的活性检测(组织化学定位法)第26-27页
        2.5 转基因植株的检测第27-29页
            2.5.1 转基因植株潮霉素引物的PCR检测第27页
            2.5.2 转基因植株的潮霉素溶液检测第27-29页
结果与分析第29-39页
    1 ESP2基因的生物信息学分析第29-33页
        1.1 ESP2候选基因编码一种磷脂酰丝氨酸合成酶蛋白第29-30页
        1.2 ESP2可能是一种膜蛋白第30-31页
        1.3 ESP2基因启动子的生物信息学分析第31-33页
    2 pESP2:GUS表达载体构建及遗传转化第33-36页
        2.1 pESP2:GUS载体的构建第33-34页
        2.2 pESP2:GUS载体的遗传转化及检测第34-35页
        2.3 GUS活性检测第35-36页
    3 ESP2的过量表达载体的构建及遗传转化第36-39页
        3.1 Ubi:ESP2表达载体的构建第36-37页
        3.2 Ubi:ESP2表达载体的遗传转化及检测第37-38页
        3.3 ESP2过量植株表达水平的分析第38-39页
讨论第39-41页
    1 ESP2是一个调节水稻倒一节伸长的关键基因第39页
    2 ESP2转基因过量植株T_0表型与非转基因植株表型没有明显差异的原因第39-40页
    3 下一步的工作第40-41页
参考文献第41-47页
附录第47-62页
    附录1 本论文所使用的表达载体的结构示意图第47-48页
    附录2 分子生物学实验中PCR体系的建立第48-50页
    附录3 本实验所用的其他实验方法第50-53页
    附录4 本实验所用基本培养基配方第53-57页
    附录5 GUS活性检测重要溶液第57-58页
    附录6 ESP2启动子的序列分析第58-61页
    附录7 缩写词第61-62页
致谢第62页

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