| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 英文缩略语注释 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 1 研究背景和意义 | 第17-19页 |
| 2 研究思路 | 第19-20页 |
| 3 研究目标 | 第20页 |
| 4 研究内容 | 第20页 |
| 参考文献 | 第20-22页 |
| 第一章 抑肽酶修饰纳米粒递药系统的构建、表征及优化 | 第22-42页 |
| 第一节 MPEG-PLGA和MAL-PEG-PLGA合成与表征 | 第22-26页 |
| 1 材料与仪器 | 第22-23页 |
| 1.1 仪器 | 第22页 |
| 1.2 试剂 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-24页 |
| 2.1 聚合物~1H核磁分析 | 第23-24页 |
| 2.2 聚合物GPC分析 | 第24页 |
| 3 结果与讨论 | 第24-25页 |
| 4 小结 | 第25-26页 |
| 第二节 抑肽酶(APRO TININ)修饰的PEG-PLGA纳米粒的制备与表征 | 第26-33页 |
| 1 材料与仪器 | 第26-27页 |
| 1.1 仪器 | 第26页 |
| 1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 溶液的配制 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-31页 |
| 2.1 纳米粒的制备方法 | 第28页 |
| 2.2 抑肽酶的巯基化 | 第28-29页 |
| 2.2.1 巯基化方法 | 第28页 |
| 2.2.2 巯基化程度的测定及计算 | 第28-29页 |
| 2.2.3 抑肽酶巯基化反应条件的筛选 | 第29页 |
| 2.3 Apr-NP的制备 | 第29-30页 |
| 2.4 Apr-NP的表征 | 第30-31页 |
| 2.4.1 形态、粒径和表面电荷 | 第30页 |
| 2.4.2 Apr-NP表面共价修饰抑肽酶的鉴定 | 第30-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-33页 |
| 3.1 聚合物总量对粒径的影响 | 第31页 |
| 3.2 抑肽酶巯基化反应条件的确定 | 第31页 |
| 3.3 粒径及Zeta电位 | 第31-32页 |
| 3.4 Apr-NP表面共价连接抑肽酶的鉴定 | 第32-33页 |
| 4 小结 | 第33页 |
| 第三节 NP-HUP A和APR-NP-HUP A的制备和表征 | 第33-37页 |
| 1 材材与仪器 | 第33页 |
| 1.1 材料 | 第33页 |
| 1.2 仪器 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-34页 |
| 2.1 NP-Hup A和Apr-NP-Hup A的制备 | 第33页 |
| 2.2 NP-Hup A和Apr-NP-Hup A的表征 | 第33-34页 |
| 2.2.1 石杉碱甲的体外分析方法的建立 | 第34页 |
| 2.2.2 粒径及其分布 | 第34页 |
| 2.2.3 形态学考察 | 第34页 |
| 2.2.4 包封率和载药量测定 | 第34页 |
| 2.2.5 NP-Hup A和Apr-NP-Hup A在PBS中的泄露的考察 | 第34页 |
| 2.2.6 NP-Hup A和Apr-NP-Hup A在PBS中的累积释放率的测定 | 第34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-37页 |
| 3.1 石杉碱甲HPLC分析方法 | 第34-35页 |
| 3.2 粒径及电位 | 第35页 |
| 3.3 形态观察 | 第35页 |
| 3.4 包封率和载药量 | 第35-36页 |
| 3.5 NP-Hup A和Apr-NP-Hup A在PBS缓冲液中的泄露量 | 第36页 |
| 3.6 NP-Hup A和Apr-NP-Hup A在PBS缓冲液中的释药行为 | 第36-37页 |
| 4 小结 | 第37页 |
| 第四节 载DIR荧光素的NP-DIR和APR-NP-DIR制备和表征 | 第37-40页 |
| 1 材料与仪器 | 第37-38页 |
| 1.1 材料 | 第37-38页 |
| 1.2 仪器 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-39页 |
| 2.1 NP-DiR和Apr-NP-DiR的制备 | 第38页 |
| 2.2 NP-DiR和Apr-NP-DiR的包封率、载药量及泄漏量的测定 | 第38-39页 |
| 2.2.1 DiR体外测定方法 | 第38页 |
| 2.2.2 NP-DiR和Apr-NP-DiR的包封率、载药量测定 | 第38页 |
| 2.2.3 NP-DiR和Apr-NP-DiR的泄漏量测定 | 第38-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-40页 |
| 3.1 NP-DiR和Apr-NP-DiR的表征 | 第39页 |
| 3.1.1 形态观察 | 第39页 |
| 3.1.2 粒径测定 | 第39页 |
| 3.2 NP-DiR和Apr-NP-DiR的包封率、载药量及泄漏量的测定 | 第39-40页 |
| 3.2.1 DiR体外测定条件 | 第39页 |
| 3.2.2 DiR在纳米粒中的包封率及载药量测定 | 第39-40页 |
| 3.2.3 DiR的体外泄露试验 | 第40页 |
| 4 小结 | 第40页 |
| 本章结论 | 第40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 第二章 APR-NP/冰片递药系统脑靶向性评价 | 第42-70页 |
| 第一节 BCEC细胞体外摄取APR-NP/冰片递药系统的试验 | 第42-45页 |
| 1 材料与仪器 | 第42-43页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.2 仪器 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43页 |
| 2.1 Apr-NP/冰片在BCEC上的摄取 | 第43页 |
| 2.2 流式细胞仪法评价BCEC摄取Apr-NP-C6/冰片 | 第43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-45页 |
| 3.1 Apr-NP-C6/冰片在BCEC的摄取 | 第43-44页 |
| 3.2 流式细胞测定定量评价BCEC摄取Apr-NP-C6/冰片 | 第44-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45页 |
| 4 小结 | 第45页 |
| 第二节 APR-NP/冰片递药系统脑靶向性评价 | 第45-56页 |
| 1 材料与仪器 | 第45页 |
| 1.1 材料 | 第45页 |
| 1.2 仪器 | 第45页 |
| 1.3 动物 | 第45页 |
| 2 方法与结果 | 第45-55页 |
| 2.1 小鼠活体成像试验评价Apr-NP的脑靶向性 | 第45-48页 |
| 2.1.1 Apr-NP脑靶向性定性评价 | 第45-47页 |
| 2.1.2 Apr-NP脑靶向性定量评价 | 第47-48页 |
| 2.2 小鼠活体成像试验及脑病理学评价冰片对NP递药系统体内脑靶向性 | 第48-52页 |
| 2.2.1 冰片对NP的入脑量定性评价 | 第48-50页 |
| 2.2.2 冰片促NP入脑的裸鼠脑病理学切片观察 | 第50-51页 |
| 2.2.3 冰片对NP的入脑量的定量评价 | 第51-52页 |
| 2.3 小鼠活体成像试验评价Apr-NP/冰片的脑靶向性 | 第52-55页 |
| 2.3.1 Ap-NP/冰片脑靶向性定性评价 | 第52-54页 |
| 2.3.2 Ap-NP/冰片脑靶向性定量评价 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第三节 APR-NP-HUPA/冰片的大鼠药动学研究 | 第56-61页 |
| 1 材料与仪器 | 第56页 |
| 1.1 材料 | 第56页 |
| 1.2 仪器 | 第56页 |
| 1.3 试验动物 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-57页 |
| 2.1 样品制备 | 第56页 |
| 2.2 血浆样品的处理 | 第56页 |
| 2.3 石杉碱甲体内分析方法的建立 | 第56-57页 |
| 2.3.1 色谱条件的确定 | 第56-57页 |
| 2.3.2 方法专属性 | 第57页 |
| 2.3.3 标准曲线的制备 | 第57页 |
| 2.4 给药方案 | 第57页 |
| 3 结果与讨论 | 第57-60页 |
| 3.1 标准曲线的建立 | 第57-58页 |
| 3.2 方法专属性 | 第58-59页 |
| 3.3 药动学结果 | 第59-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60页 |
| 4 小结 | 第60-61页 |
| 第四节 APR-NP-HUPA/冰片递药系统的小鼠脑部药物分布研究 | 第61-67页 |
| 1 材群与仪器 | 第61页 |
| 1.1 材料 | 第61页 |
| 1.2 仪器 | 第61页 |
| 1.3 试验动物 | 第61页 |
| 2 方法 | 第61-62页 |
| 2.1 样品制备 | 第61页 |
| 2.2 脑组织及血浆样品的处理 | 第61页 |
| 2.3 石杉碱甲体内分析方法的建立 | 第61-62页 |
| 2.3.1 血浆标准曲线的建立 | 第61页 |
| 2.3.2 方法专属性 | 第61页 |
| 2.3.3 小鼠脑标准曲线的建立 | 第61-62页 |
| 2.4 给药方案 | 第62页 |
| 3 结果与讨论 | 第62-67页 |
| 3.1 标准曲线 | 第62-64页 |
| 3.1.1 血浆标准曲线 | 第62-63页 |
| 3.1.2 方法专属性 | 第63-64页 |
| 3.1.3 脑组织标准曲线 | 第64页 |
| 3.2 小鼠脑和血浆药物分布测定结果 | 第64-65页 |
| 3.2.1 脑组织药物测定结果 | 第64-65页 |
| 3.2.2 血浆中药物测定结果 | 第65页 |
| 3.3 靶向指数评价 | 第65-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-67页 |
| 4 小结 | 第67页 |
| 本章小结 | 第67页 |
| 本章结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 第三章 APR-NP-HUP A/冰片递药系统初步药效学研究 | 第70-79页 |
| 1 材料与仪器 | 第70页 |
| 1.1 材料 | 第70页 |
| 1.2 仪器 | 第70页 |
| 1.3 试验动物 | 第70页 |
| 2 方法 | 第70-72页 |
| 2.1 大鼠AD模型构建 | 第70-71页 |
| 2.2 试验分组及给药方案 | 第71页 |
| 2.3 Apr-NP-Hup A/冰片递药系统对AD大鼠药效学评价 | 第71-72页 |
| 2.3.1 定位航行试验 | 第71页 |
| 2.3.2 空间探索试验 | 第71-72页 |
| 2.3.3 大鼠海马部位组织病理切片 | 第72页 |
| 3 结果与讨论 | 第72-77页 |
| 3.1 结果 | 第72-76页 |
| 3.1.1 定位航行试验 | 第72-73页 |
| 3.1.2 空间探索试验 | 第73-75页 |
| 3.1.3 海马组织病理切片 | 第75-76页 |
| 3.2 讨论 | 第76-77页 |
| 4 小结 | 第77页 |
| 本章结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 第四章 冰片促透机理研究 | 第79-89页 |
| 1 材料与仪器 | 第79-80页 |
| 1.1 材料 | 第79-80页 |
| 1.2 仪器 | 第80页 |
| 1.3 动物 | 第80页 |
| 2 方法 | 第80-81页 |
| 2.1 冰片对BCEC中细胞间紧密连接影响 | 第80-81页 |
| 2.1.1 冰片对ZO-1表达的Western Blotting试验 | 第80页 |
| 2.1.2 冰片对膜流动性的影响试验 | 第80-81页 |
| 2.2 冰片对BCEC中外排蛋白P-gp影响 | 第81页 |
| 2.2.1 冰片对P-gp表达的Western Blotting试验 | 第81页 |
| 2.2.2 冰片对对BCEC上ATP表达影响试验 | 第81页 |
| 3 结果与讨论 | 第81-86页 |
| 3.1 冰片对BCEC中紧密连接的影响 | 第81-83页 |
| 3.1.1 冰片对ZO-1蛋白表达的WB试验 | 第81-83页 |
| 3.1.2 冰片对BCEC膜流动性的影响试验 | 第83页 |
| 3.2 冰片对BCEC外排蛋白P-gp的影响 | 第83-86页 |
| 3.2.1 冰片对P-gp表达的Western Blotting试验 | 第83-85页 |
| 3.2.2 冰片对BCEC上ATP表达影响试验 | 第85-86页 |
| 4 小结 | 第86页 |
| 本章结论 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 全文结论与展望 | 第89-91页 |
| 论文创新性 | 第91-92页 |
| 博士期间发表论文 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
