第一章 绪论 | 第9-30页 |
1 AFGF促分裂特性的生化基础 | 第9-13页 |
1.1 受体结合区 | 第10-11页 |
1.2 肝素结合区 | 第11-12页 |
1.3 核转位区 | 第12-13页 |
2 AFGF诱导的基因表达对AFGF功能的反馈调节 | 第13-14页 |
2.1 aFGF诱导一些调节基因表达 | 第13页 |
2.2 aFGF与膜受体结合启动生物化学反应 | 第13-14页 |
3 AFGF的非促有丝分裂生物学特性的生化基础 | 第14-18页 |
3.1 aFGF对于心肌缺血-再灌注后的保护作用 | 第14-15页 |
3.2 aFGF的舒张血管的作用 | 第15页 |
3.3 神经保护和神经调节作用 | 第15-18页 |
4 AFGF多肽链上其它的功能性氨基酸 | 第18-19页 |
5 RAS/MAPK的信号转导级联 | 第19-20页 |
6 C-Fos基因和AFGF | 第20-21页 |
7 BCL-2 | 第21-23页 |
8 BCL-2和细胞凋亡 | 第23页 |
9 P53 | 第23-26页 |
10 AFGF和SURAMIN | 第26-27页 |
11 AFGF非促分裂生物学活性的应用研究 | 第27-29页 |
技术路线 | 第29-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-42页 |
1 材料 | 第30-31页 |
1.1 目的蛋白和细胞株 | 第30页 |
1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
1.3 主要仪器 | 第31页 |
2 热稳定性、冻融稳定性和胰酶的敏感性 | 第31-34页 |
2.1 实验设计 | 第31-32页 |
2.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-33页 |
2.3 Western-blot操作步骤 | 第33-34页 |
3 细胞增殖检测 | 第34-35页 |
3.1 实验前细胞的制备 | 第34页 |
3.2 实验设计 | 第34页 |
3.3 细胞增殖检测 | 第34-35页 |
4 FGF受体1的磷酸化检测 | 第35-36页 |
4.1 试剂制备 | 第35页 |
4.2 实验方案 | 第35-36页 |
5 细胞周期和凋亡检测 | 第36-37页 |
5.1 试验设计 | 第36页 |
5.2 检测前细胞制备 | 第36-37页 |
6.细胞膜通透性检测 | 第37-38页 |
7 线粒体膜电位检测 | 第38页 |
7.1 线粒体膜电位检测步骤 | 第38页 |
7.2 荧光显微镜下的染色细胞观察 | 第38页 |
8 反转录PCR检测基因表达 | 第38-41页 |
8.1 实验设计 | 第38-39页 |
8.2 引物设计 | 第39页 |
8.3 总RNA提取 | 第39-40页 |
8.4 RT-PCR | 第40-41页 |
9 体内实验 | 第41页 |
9.1 实验设计 | 第41页 |
9.2 给药 | 第41页 |
10 统计分析 | 第41-42页 |
第三章 结果 | 第42-83页 |
1 热稳定性、冻融稳定性和胰酶抗性的检测 | 第43-46页 |
1.1 热稳定性 | 第43-44页 |
1.2 冻融稳定性 | 第44-45页 |
1.3 对胰酶的敏感性 | 第45-46页 |
2 细胞增值检测 | 第46-49页 |
2.1 肝素作用的检测 | 第46-48页 |
2.2 waFGF及raFGF活性的检测 | 第48-49页 |
3 AFGF受体磷酸化检测 | 第49-50页 |
4 C-FOS基因表达检测 | 第50-51页 |
5 细胞周期检测 | 第51-60页 |
5.1 G_1期检测 | 第51-56页 |
5.2 G_2期检测 | 第56-60页 |
6 凋亡检测 | 第60-65页 |
7 p53基因和BCL-2基因MRNA的表达 | 第65-67页 |
7.1 p53基因mRNA的表达 | 第65-66页 |
7.2 Bcl-2基因mRNA的表达 | 第66-67页 |
8 细胞膜通透性检测 | 第67-69页 |
9 线粒体膜电位的检测 | 第69-76页 |
10 体内实验 | 第76-83页 |
10.1 体重的时程观察 | 第76-78页 |
10.2 外观的变化 | 第78-81页 |
10.3 存活率的比较 | 第81-82页 |
10.4 睁眼时间的比较 | 第82-83页 |
第四章 讨论 | 第83-96页 |
1 靶细胞系的选择 | 第84页 |
2 重组AFGF的构建 | 第84-85页 |
3 WAFGF和RAFGF的结构稳定性比较 | 第85-86页 |
4 细胞增殖检测 | 第86页 |
5 受体介导的信号途径 | 第86-88页 |
6 AFGF对细胞周期进程的影响 | 第88-89页 |
7 细胞凋亡的检测 | 第89-91页 |
8 BCL-2和p53MRNA表达 | 第91-92页 |
9 线粒体膜电位检测 | 第92-93页 |
10 细胞膜通透性检测 | 第93-94页 |
11 体内试验 | 第94-96页 |
结论 | 第96-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
附图 | 第99-107页 |
参考文献 | 第107-121页 |
获奖 | 第121-122页 |
中文详细摘要 | 第122-130页 |
英文摘要 | 第130页 |
吉林大学博士学位论文原创性声明 | 第141页 |