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酸性成纤维细胞生长因子核转位序列敲除对其有丝分裂活性的影响

第一章 绪论第9-30页
    1 AFGF促分裂特性的生化基础第9-13页
        1.1 受体结合区第10-11页
        1.2 肝素结合区第11-12页
        1.3 核转位区第12-13页
    2 AFGF诱导的基因表达对AFGF功能的反馈调节第13-14页
        2.1 aFGF诱导一些调节基因表达第13页
        2.2 aFGF与膜受体结合启动生物化学反应第13-14页
    3 AFGF的非促有丝分裂生物学特性的生化基础第14-18页
        3.1 aFGF对于心肌缺血-再灌注后的保护作用第14-15页
        3.2 aFGF的舒张血管的作用第15页
        3.3 神经保护和神经调节作用第15-18页
    4 AFGF多肽链上其它的功能性氨基酸第18-19页
    5 RAS/MAPK的信号转导级联第19-20页
    6 C-Fos基因和AFGF第20-21页
    7 BCL-2第21-23页
    8 BCL-2和细胞凋亡第23页
    9 P53第23-26页
    10 AFGF和SURAMIN第26-27页
    11 AFGF非促分裂生物学活性的应用研究第27-29页
    技术路线第29-30页
第二章 材料与方法第30-42页
    1 材料第30-31页
        1.1 目的蛋白和细胞株第30页
        1.2 主要试剂第30-31页
        1.3 主要仪器第31页
    2 热稳定性、冻融稳定性和胰酶的敏感性第31-34页
        2.1 实验设计第31-32页
        2.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第32-33页
        2.3 Western-blot操作步骤第33-34页
    3 细胞增殖检测第34-35页
        3.1 实验前细胞的制备第34页
        3.2 实验设计第34页
        3.3 细胞增殖检测第34-35页
    4 FGF受体1的磷酸化检测第35-36页
        4.1 试剂制备第35页
        4.2 实验方案第35-36页
    5 细胞周期和凋亡检测第36-37页
        5.1 试验设计第36页
        5.2 检测前细胞制备第36-37页
    6.细胞膜通透性检测第37-38页
    7 线粒体膜电位检测第38页
        7.1 线粒体膜电位检测步骤第38页
        7.2 荧光显微镜下的染色细胞观察第38页
    8 反转录PCR检测基因表达第38-41页
        8.1 实验设计第38-39页
        8.2 引物设计第39页
        8.3 总RNA提取第39-40页
        8.4 RT-PCR第40-41页
    9 体内实验第41页
        9.1 实验设计第41页
        9.2 给药第41页
    10 统计分析第41-42页
第三章 结果第42-83页
    1 热稳定性、冻融稳定性和胰酶抗性的检测第43-46页
        1.1 热稳定性第43-44页
        1.2 冻融稳定性第44-45页
        1.3 对胰酶的敏感性第45-46页
    2 细胞增值检测第46-49页
        2.1 肝素作用的检测第46-48页
        2.2 waFGF及raFGF活性的检测第48-49页
    3 AFGF受体磷酸化检测第49-50页
    4 C-FOS基因表达检测第50-51页
    5 细胞周期检测第51-60页
        5.1 G_1期检测第51-56页
        5.2 G_2期检测第56-60页
    6 凋亡检测第60-65页
    7 p53基因和BCL-2基因MRNA的表达第65-67页
        7.1 p53基因mRNA的表达第65-66页
        7.2 Bcl-2基因mRNA的表达第66-67页
    8 细胞膜通透性检测第67-69页
    9 线粒体膜电位的检测第69-76页
    10 体内实验第76-83页
        10.1 体重的时程观察第76-78页
        10.2 外观的变化第78-81页
        10.3 存活率的比较第81-82页
        10.4 睁眼时间的比较第82-83页
第四章 讨论第83-96页
    1 靶细胞系的选择第84页
    2 重组AFGF的构建第84-85页
    3 WAFGF和RAFGF的结构稳定性比较第85-86页
    4 细胞增殖检测第86页
    5 受体介导的信号途径第86-88页
    6 AFGF对细胞周期进程的影响第88-89页
    7 细胞凋亡的检测第89-91页
    8 BCL-2和p53MRNA表达第91-92页
    9 线粒体膜电位检测第92-93页
    10 细胞膜通透性检测第93-94页
    11 体内试验第94-96页
结论第96-98页
致谢第98-99页
附图第99-107页
参考文献第107-121页
获奖第121-122页
中文详细摘要第122-130页
英文摘要第130页
吉林大学博士学位论文原创性声明第141页

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